專利名稱：5h－吡咯并[2,1－c][1,4]－苯并二氮雜的3－甲酰胺衍生物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及新的三環(huán)非肽血管加壓素拮抗劑，它們可以用于治療需要降低血管加壓素作用的疾病，例如充血性心力衰竭、過量腎水再吸收疾病和血管阻力增加以及冠狀血管收縮增加的疾病。
本發(fā)明的背景血管加壓素是由垂體后葉相應于腦滲透壓感受器檢測的血漿滲透性的增加或低壓容量感受器以及動脈壓力感受器感覺的血容量和血壓的降低而釋放的。該激素通過兩種明確定義的受體亞型，即血管V1a受體和腎上皮V2受體而起作用。血管加壓素誘導的抗利尿作用(由腎上皮V2受體介導)有助于維持正常的血漿滲透性、血容量和血壓。
血管加壓素與部分充血性心力衰竭有關，在該病中外周阻力增加。V1a受體拮抗劑可以降低系統(tǒng)性血管阻力、增加心輸出量并預防血管加壓素誘導的冠狀血管收縮。因此，對于血管加壓素誘導的總外周阻力增加和局部血流改變的疾病，V1a受體拮抗劑可以作為有效的治療藥物。V1a受體拮抗劑可以降低血壓、誘導低血壓作用，因此可以有效治療部分類型的高血壓。
阻斷V2受體可以用于治療以自由水的過量腎再吸收為特征的疾病?？估蜃饔檬怯上虑鹉X釋放的血管加壓素(抗利尿激素)調(diào)節(jié)的，該激素可以與腎集合小管細胞上的特異受體結合。此種結合可以刺激腺甘酸環(huán)化酶，并促進cAMP-介導的水滲透入這些細胞的腔表面。V2拮抗劑可以校正充血性心力衰竭、肝硬變、腎病綜合征、中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷、肺病和低鈉血癥中的流體潴流。
血管加壓素水平升高發(fā)生于充血性心力衰竭的病人中，在具有慢性心力衰竭的老年病人中更普遍。在低鈉血的充血性心力衰竭和血管加壓素水平升高的病人中，V2拮抗劑通過拮抗抗利尿激素的作用可以有助于促進自由水的排泄。基于該激素的生化和藥理作用，預期血管加壓素拮抗劑可以有效治療和/或預防高血壓、心機能不全、冠狀血管痙攣、心肌缺血、腎血管痙攣、肝硬變、不適當?shù)目估蚣に胤置诰C合征(SIADH)、充血性心力衰竭、腎病綜合征、腦水腫、腦缺血、腦出血性休克、血栓形成-出血和異常水潴流。
下列先有技術文獻描述肽血管加壓素拮抗劑M.Manning等的J.Med.Chem.,35,382(1992)；M.Manning等的J.Med.Chem.,35,3895(1992)；H.Gavras和B.Lammek的美國專利5,070,187(1991)；M.Manning和W.H.Sawyer的美國專利5,055,448(1991)；F.E.Ali的美國專利4,766,108(1988)；R.R.Ruffolo等的Drug News and Perspective,4(4),217,(5月)(1991)。P.D.Williams等報道有效的六肽催產(chǎn)素拮抗劑[J.Med.Chem.,35,3905(1992)]，該激素與V1和V2受體結合也顯示微弱的血管加壓素拮抗劑活性。肽血管加壓素拮抗性不具有口服活性和選擇性。某些顯示部分激動劑活性。
最近已經(jīng)公開了非肽血管加壓素拮抗劑，見Y.Yamamura等的Science,252,579(1991)；Y.Yamamura等的Br.J.Pharmacol,105,787(1992)；J.D.Albright等的美國專利5,536,718A，美國專利5,532,235A，美國專利5,516,774A，美國專利5,512,563A，美國專利5,459,131A；A.Venkatessan等的美國專利5,521,173A；Ogawa等(Otsuka Pharm Co.,LTD)EP0514667-A1、EPO382185-A2、WO9105549和U.S.5,258,510、WO9404525；Yamanouchi Pharm.Co.,Ltd.,WO9420473、WO9412476、WO9414796；Fujisawa Co.Ltd.,EP620216-Al；Ogawa等(Otsuka Pharm.Co.)。EP470514A公開喹諾酮衍生物以及含有它們的藥用組合物。已公開了非肽催產(chǎn)素和血管加壓素拮抗劑，見Merck and Co.；M.G.Bock和P.D.Williams,EP0533242A；M.G.Bock等的EP 0533244A；J.M.Erb,D.F.Verber,P.D.Williams的EP0533240A；K.Gilbert等的EP0533243A。美國專利5,436,333(Venkatesan等)提出制備三環(huán)雜環(huán)類化合物的方法，該類化合物可以用作生產(chǎn)心血管藥物的中間體。
本發(fā)明涉及新的三環(huán)衍生物，這些衍生物體外對V2受體顯示血管加壓素拮抗劑活性，體內(nèi)顯示血管加壓素拮抗劑活性。此外，與以前所述的3-酰基吡咯并苯并二氮雜衍生物相比，這些化合物水溶性增加。
本發(fā)明的簡述本發(fā)明涉及選自通式Ⅰ的新化合物或其藥學上可接受的鹽、酯或前體藥物形式
式Ⅰ其中R選自-OH、-NR1R3、-NHOR1、-NH-(CH2)-COOH、
或
R1和R2獨立為氫或低級烷基；R3為
或
X為CH2、NR1、O、S；n為1-4；p為1-4；q為2-4；R4和R5獨立選自氫、低級烷基、鹵素、氰基、三氟甲基、氨基、羥基或低級烷氧基；R6為下式的部分
Ar選自
或
R7和R8獨立選自氫、鹵素、氰基、低級烷基、低級烷氧基、羥基或三氟甲基；R9為下式的部分
或
R10選自C3-C7環(huán)烷基、環(huán)戊烯基、環(huán)己烯基或下式部分
Ar’選自
或
R11和R12獨立選自氫、F、Cl、Br、氰基、低級烷基、低級烷氧基、三氟甲基、苯氧基或如下式的取代的苯氧基
其中R14選自氫、鹵素、氰基、低級烷基、低級烷氧基、羥基或三氟甲基；Ar”選自a)苯基；b)具有一個或兩個選自N、O、S的雜原子的5元芳(不飽和)雜環(huán)；c)具有三個或四個氮原子的5元芳(不飽和)雜環(huán)；或d)具有一個、兩個或三個氮原子的6元芳(不飽和)雜環(huán)；且A”可任選被鹵素、低級烷基、羥基、低級烷氧基或三氟甲基取代。
在本說明書中，低級烷基指C1-C6、優(yōu)選C1-C4的直鏈或支鏈烷基，例如甲基、乙基、正丁基、叔丁基，低級烷氧基指C1-C6、優(yōu)選C1-C4的直鏈或支鏈烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丁氧基或叔丁氧基。鹵素為氟、氯、溴或碘。環(huán)烷基指C3-C7單環(huán)環(huán)烷基部分。
還可以理解上述對R3的定義包括下列結構部分
可以理解本發(fā)明的為具有一個或兩個選自N、O、S雜原子的5元芳(不飽和)雜環(huán)的Ar”取代基包括(但不限于)噻吩基、呋喃基、吡咯基、吡唑基、噁唑基、噻唑基、異噻唑基、異噁唑基和咪唑基。具有三個或四個氮原子的含有5元芳(不飽和)雜環(huán)的Ar”基團包括三唑基和四唑基部分。具有一個、兩個或三個氮原子的含有6元芳(不飽和)雜環(huán)的Ar”基團包括(但不限于)吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、1,2,3-三嗪基、1,2,4-三嗪基和1,3,5-三嗪基。
本發(fā)明更優(yōu)選的化合物為具有下列式Ⅰ的化合物或其藥學上可接受的鹽、酯或前體藥物形式
式Ⅰ其中R選自-OH、-NR1R3、-NH-(CH2)-COOH、
或
R1和R2獨立為氫或低級烷基；R3為
X為CH2、NR1、O、S；n為1-4；q為2-4；R4和R5獨立選自氫、低級烷基、鹵素、氨基、羥基、氰基、三氟甲基或低級烷氧基；R6為下式的部分
Ar選自
或
R7和R8獨立選自氫或鹵素；R9為下式的部分
或
R10為Ar”式的部分
Ar’選自
或
R11和R12獨立選自氫、F、Br、Cl或低級烷基；Ar”選自苯基或具有一個或兩個選自N、O、S的雜原子的5元芳(不飽和)雜環(huán)。
本發(fā)明更優(yōu)選的化合物為具有下式的化合物或其藥學上可接受的鹽、酯或前體藥物形式
其中R選自-OH、-NR1R3或
R9為
或
R10為2-Ar”-環(huán)戊烯基；且R1、R2、R3、R6、R7、R9、R10、R11、R12、X、n、p、q、Ar、Ar’和Ar”與上述大類的定義系統(tǒng)，更優(yōu)選與亞類的定義相同。
本發(fā)明的詳述本發(fā)明包括上述的化合物以及含有這些化合物和一種或多種藥學上可接受的載體、賦形劑等的藥用組合物。本發(fā)明也包括治療哺乳動物、優(yōu)選人類的疾病的方法，在所述疾病中需要降低血管加壓素的作用，該方法包括給予需要的哺乳動物治療有效量的一種或多種本發(fā)明的化合物。
本發(fā)明的化合物可以以藥學上或生理上可接受的酸或堿衍生的鹽的形式使用。這些鹽包括(但不限于)根據(jù)具體情況，與無機酸例如鹽酸、硫酸、硝酸、磷酸形成的鹽，與有機酸如乙酸、草酸、檸檬酸、酒石酸、琥珀酸和馬來酸形成的鹽。其它的鹽包括堿金屬鹽或堿土金屬鹽，例如鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽或鎂鹽或與有機堿形成的鹽。這些化合物也可以以酯、氨基甲酸酯以及其它的常規(guī)前體藥物的形式使用，當以此類形式給藥時，在體內(nèi)可以轉(zhuǎn)化為活性部分。當將這些化合物用于上述用途時，可以將它們與一種或多種藥學上可接受的賦形劑或載體，例如溶劑、稀釋劑等混合，可以例如以片劑、膠囊劑、分散粉劑、顆粒劑或含有如約0.05-5％懸浮劑的懸浮液、含有如約10-50％糖的糖漿劑和含有如約20-50％乙醇的酏劑等形式經(jīng)口給藥，或者以無菌注射液或在等滲介質(zhì)中含有約0.05-5％懸浮劑的懸浮液形式經(jīng)胃腸外給藥。此類藥用制劑可以含有如約25-約90％的活性組分以及載體，更常見為約5％-60％(重量)。
使用的活性組分的有效劑量可以根據(jù)使用的特定化合物、給藥方式、治療的疾病的嚴重程度而改變。但是，一般而言，當以約0.5-約500mg/kg哺乳動物體重、優(yōu)選在一天中分兩次至四次的日劑量或以緩釋形式給予本發(fā)明的化合物時即可獲得令人滿意的結果。對于大部分大的哺乳動物而言，總日劑量為約1-100mg、優(yōu)選約2-80mg。適合內(nèi)服的劑型包含約0.5-500mg與固體或液體藥學上可接受的載體緊密混合的活性化合物?？梢哉{(diào)整該劑量方案以得到最佳治療反應。例如，可以每日給予數(shù)個分劑量，或者可以根據(jù)治療的緊迫性按比例降低劑量。
這些活性化合物可以經(jīng)口給予，也可以經(jīng)靜脈、肌內(nèi)或皮下途徑給予。固體載體包括淀粉、乳糖、磷酸二鈣、微晶纖維素、蔗糖和高嶺土，而液體載體包括無菌水、聚乙二醇、非離子表面活性劑和食用油例如玉米油、花生油和芝麻油，只要它們與活性組分的性質(zhì)和所需的給藥形式相符即可。制備藥用組合物中通常使用的輔助劑最好包括如矯味劑、著色劑、防腐劑和抗氧劑如維生素E、抗壞血酸、BHT和BHA。
從易于制備和給藥的觀點來看，優(yōu)選的藥用組合物為固體組合物，特別是片劑和硬填充的或液體填充的膠囊劑。優(yōu)選化合物口服給藥。
這些活性化合物也可以胃腸外給藥或腹膜內(nèi)給藥?？梢灾苽溥@些活性化合物的以游離堿或藥理上可接受的鹽在適當與表面活性劑如羥丙基纖維素混合的水中的溶液或懸浮液。也可以制備在甘油、液體聚乙二醇以及它們在油中的混合物中的分散液。在通常的儲存和使用條件下，這些制劑含有防腐劑以防止微生物的生長。
適合注射使用的藥用形式包括無菌水溶液或分散液以及臨時制備無菌注射溶液或分散液的無菌粉末。在所有這些情況下，該劑型必須是無菌的，并且必須為流體以存在易注射性。在生產(chǎn)和儲存條件下，該劑型必須穩(wěn)定，并且必須可以不受微生物例如細菌和真菌的污染作用。所述載體可以為溶劑或分散介質(zhì)，包括如水、醇(如甘油、丙二醇和液體聚乙二醇)、它們的適當?shù)幕旌衔锖椭参镉汀?br> 如上所述，本發(fā)明的新的三環(huán)非肽血管加壓素拮抗劑可以用于治療需要降低血管加壓素作用的疾病，例如充血性心力衰竭，過量腎水再吸收疾病和血管阻力增加以及冠狀血管收縮增加的疾病。
具體地講，本發(fā)明的血管加壓素拮抗劑可以有效治療和/或預防高血壓、心機能不全、冠狀血管痙攣、心肌缺血、腎血管痙攣、肝硬變、不適當?shù)目估蚣に胤置诰C合征(SIADH)、充血性心力衰竭、腎病綜合征、腦水腫、腦缺血、腦出血性休克、血栓形成-出血和異常水潴流。
本發(fā)明也提供制備上述定義的通式Ⅰ化合物的方法。更具體地講，本發(fā)明提供制備式Ⅰ化合物的方法，該方法包括下列步驟之一a)使下式的化合物
(A)或
(B)其中R4、R5和R6與上述定義相同，hal為鹵素，例如氯，與式HNZ1Z2的胺反應，其中-NZ1Z2可以為-NR1R3、NHOR1、-NH-(CH2)n-COOH、
或
其中n、X、R1、R2和R3與上述定義相同，得到相應的式Ⅰ化合物，其中R與上述定義相同；或b)用堿水溶液處理下式的化合物
(A)其中R4、R5和R6與上述定義相同，hal為鹵素，如氯，得到相應的式Ⅰ化合物，其中R為OH；或c)用下式的酸
或其活性衍生物，如酰鹵或酸酐，使下式的化合物酰化
其中R、R4和R5與上述定義相同，但是R不為OH；R14為
或
其中R7和R8與上述定義相同，得到相應的式Ⅰ化合物，其中R9與上述定義相同。
在本發(fā)明的化合物中，3-?；倪量┎⒈讲⒍s衍生物7(流程Ⅰ)可以由相同的3-三鹵代甲基酮衍生物(如4)用兩種方法制備。該中間體和其前體的合成已有描述(EP636625A2)。使3-三鹵代甲基酮衍生物4直接與伯胺或仲胺反應得到所需產(chǎn)物7?；蛘撸脡A水溶液例如氫氧化鈉水溶液處理3-三鹵代甲基酮衍生物4，在酸化后得到相應的羧酸5。通過轉(zhuǎn)化為酰氯、酰溴或酸酐，或者首先與活化試劑例如N,N-二環(huán)己基碳二亞胺、氰基膦酸二乙酯以及在“肽酰胺鍵”形成中使用的相關的活化試劑反應使該羧酸活化以進行偶合。根據(jù)與分子中其它取代基團的配伍性選擇活化這些酸的方法。一個實例為用草酰氯/二甲基甲酰胺處理酸5得到酰氯6，當用伯胺或仲胺處理時，得到所需產(chǎn)物7，其中-NZ1Z2可以為-NR1R3、NHOR1、-N-(CH2)n-COOH、
或
R1和R2獨立為氫或低級烷基；R3為
或
X為CH2、NR1、O、S；n為1-4；p為1-4；q為2-4；流程Ⅰ
用適當?shù)娜u代乙酰鹵試劑使吡咯并苯并二氮雜的3-位酰化得到3-三鹵代甲基酮衍生物4。3-位未取代的化合物3為完全組合的目標化合物，其中R17選自式Ⅰ或者中間體的R6，其中R17為
或
當R17為
時，可以根據(jù)流程Ⅱ所述方法制備該化合物，然后進行流程Ⅰ的適當步驟。
可以根據(jù)流程Ⅱ所示制備通式4a和4b的化合物。使三環(huán)衍生物1與取代或未取代的4-硝基芳基碳酰氯或6-硝基吡啶-3-碳酰氯反應得到中間體8a或8b。使中間體8a和8b的硝基還原得到相應的氨基衍生物9a和9b。8a和8b的硝基還原可以在催化還原(即氫/Pd/C，肼-乙醇/Pd/C)條件下，或者在化學還原(即氯化亞錫/乙醇，鋅/乙酸-三氯化鈦)條件下或本領域已知的相關還原條件下進行。根據(jù)保持分子中其它官能團的配伍性選擇將硝基轉(zhuǎn)化為氨基的條件。
通過轉(zhuǎn)化為酰氯、酰溴或酸酐，或者首先與活化試劑例如N,N-二環(huán)己基碳二亞胺、氰基膦酸二乙酯以及在“肽酰胺鍵”形成中使用的相關的活化試劑反應使下式的吡啶和芳基羧酸試劑被活化以進行偶合
。根據(jù)與分子中其它取代基的配伍性選擇活化這些酸以進行三環(huán)衍生物9a和9b偶合的方法。選擇的方法是將羧酸轉(zhuǎn)化為相應的酰氯。根據(jù)本領域已知的標準方法，例如與亞硫酰氯、草酰氯等反應可以制備所述酰氯
。所述偶合反應在鹵化了的溶劑例如氯仿、二氯甲烷，醚溶劑如二氧六環(huán)、四氫呋喃或烴類溶劑如甲苯中，在吡啶或叔胺堿如三乙胺等存在下進行。另外，由羧酸制備的酰氯可以在有或無4-(二甲基氨基)吡啶存在的吡啶中與衍生物9a和9b反應得到化合物10a和10b。
式9a和9b化合物與芳酰氯、芳基乙酰氯或環(huán)烯基碳酰氯或相應的活化羧酸在鹵化了的溶劑例如氯仿、二氯甲烷，醚溶劑如二氧六環(huán)、四氫呋喃或烴類溶劑如甲苯中，在叔胺堿例如三乙胺、二異丙基乙胺或吡啶等的存在下反應得到衍生物10a和10b。在惰性溶劑例如氯仿、二氯甲烷或醚溶劑例如四氫呋喃中、于0℃至溶劑的回流溫度下，衍生物10a和10b與三鹵代甲基酰氯反應得到三鹵代甲基酮衍生物4a和4b。
流程Ⅱ
如流程Ⅱb所示可以用另外的步驟順序制備目標化合物。中間體12a和12b(其中-NZ1Z2可以為-NR1R3、NHOR1、-N-(CH2)n-COOH，R7和R8獨立選自氫、鹵素、氰基、低級烷基、低級烷氧基、羥基或三氟甲基)中的硝基還原得到相應的氨基衍生物13a和13b。12a和12b中的硝基還原可以在催化還原(即氫/Pd/C，肼-乙醇/Pd/C)條件下，或者在化學還原(即氯化亞錫/乙醇，鋅/乙酸-三氯化鈦)條件下或本領域已知的相關還原條件下進行。根據(jù)保持分子中其它官能團的配伍性選擇將硝基轉(zhuǎn)化為氨基的條件。用適當取代和活化的吡啶和芳基羧酸使氨基衍生物13a和13b?；玫侥繕嘶衔?4a和14b。
通過轉(zhuǎn)化為酰氯、酰溴或酸酐，或者首先與活化試劑例如N,N-二環(huán)己基碳二亞胺、氰基膦酸二乙酯以及在“肽酰胺鍵”形成中使用的相關的活化試劑反應使下式的吡啶和芳基羧酸試劑活化以進行偶合
。根據(jù)與分子中其它取代基的配伍性選擇活化這些酸以進行三環(huán)衍生物13a和13b偶合的方法。選擇的方法是將羧酸轉(zhuǎn)化為相應的酰氯。根據(jù)本領域已知的標準方法，例如與亞硫酰氯、草酰氯等反應可以制備所述酰氯
。所述偶合反應在溶劑如鹵代烴、甲苯、二甲苯、四氫呋喃或二氧六環(huán)中，在吡啶或叔胺堿如三乙胺等存在下進行。另外，由羧酸制備的酰氯可以在有或無4-(二甲基氨基)吡啶存在的吡啶中與衍生物13a和13b反應得到化合物14a和14b。
流程Ⅱb
另外，可以將中間體1(流程Ⅲ)轉(zhuǎn)化為更具活性的氟化物衍生物15。15與取代的胺NHR1(R1=低級烷基)反應得到相應的氨基煙堿基(nicotinyl)衍生物16。這些衍生物16的酰化得到目標分子17?？梢杂萌u代甲基乙酰氯處理該化合物得到流程Ⅱ的式4b的相應產(chǎn)物。流程Ⅲ
合成如式Ⅰ所示的本發(fā)明化合物，其中R6如下所示
其中Ar為
or
的另外的方法為使通式18的吡啶基或芳基羧酸與三環(huán)衍生物1偶合得到目標化合物20，然后與三鹵代甲基乙酰氯反應時得到流程Ⅰ的中間體4。
通過轉(zhuǎn)化為酰氯、酰溴或酸酐，或者首先與活化試劑例如N,N-二環(huán)己基碳二亞胺、氰基膦酸二乙酯以及在“肽酰胺鍵”形成中使用的相關的活化試劑反應使所述的吡啶和芳基羧酸活化以進行偶合。根據(jù)與分子中其它取代基的配伍性選擇活化這些酸18以進行三環(huán)衍生物1(流程Ⅳ)偶合的方法。選擇的方法是將羧酸18轉(zhuǎn)化為相應的酰氯19。根據(jù)本領域已知的標準方法，例如與亞硫酰氯、草酰氯等反應可以制備酰氯19。偶合反應在鹵化了的溶劑例如氯仿、二氯甲烷，醚溶劑例如二氧六環(huán)、四氫呋喃或烴溶劑如甲苯中，在吡啶或叔胺堿如三乙胺等存在下進行(流程Ⅳ)。另外，由羧酸制備的酰氯19可以在有或無4-(二甲基氨基)吡啶存在的吡啶中與衍生物1反應。
一般而言，當酸18用“肽型”活化試劑活化時，比用酰氯所需的溫度高。流程Ⅳ
如流程Ⅴ所示的方法可以制備下式酸(由23、26、29部分代表)
流程Ⅴ
n=1,2n=1,2n=1,22927 28用零價鈀或鎳催化劑、在存在或不存在配位配體如三苯膦和有機或無機堿下，使芳基(或雜芳基)硼烷、硼酸酯、鎂、三烷基錫或鋅試劑與芳基21或吡啶基24化合物偶合，其中Q選自溴、碘、氟代磺酸酯或三氟甲基磺酸酯，R11為氫、氟、氯或溴。然后用試劑例如高錳酸鉀氧化產(chǎn)生的甲基雙芳基(雜芳基芳基)22或芳基吡啶基(雜芳基吡啶基)25化合物得到相應的羧酸23和26。在零價鈀催化劑存在下，用相應的低級烷基硼烷處理23和26的甲酯可以制備23和26的衍生物，其中R11為低級烷基。
若為環(huán)烷基，則化合物29可以由適當?shù)耐?7開始制備。酮酯27與如三鹵(溴、碘)化磷或三氟甲磺酸酐反應得到相應的β-鹵代或β-三氟甲基磺酸酯化合物28。在零價鈀或鎳催化劑和有機或無機堿存在下，使化合物28與芳基(雜芳基)硼烷、硼酸酯、鎂、三烷基錫或鋅試劑反應得到為酯的目標化合物29。用堿金屬氫氧化物在醇水溶液或醚溶劑中水解29的酯部分得到羧酸29。
另外，可以根據(jù)流程Ⅵ所示對通式Ⅰ的化合物進行加工，其中J選自B(OH)2、Sn(低級烷基)3,R16選自Br、I、OSO2CF3,Ar”如上述定義選擇。
流程Ⅵ
分別在Stille或Suzuki條件下，用零價鈀催化劑，在存在或不存在配位配體和堿下，使中間體30與芳基錫或硼試劑偶合得到通式31的化合物。
參照下列非限定性實施例可以進一步理解本發(fā)明。
實施例1
10-[2-氯代-4-(5-氟代-2-甲基-苯甲酰氨基)-苯甲?；鵠-10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-3-甲酸步驟a)N-{3-氯代-4-[3-(三氯代羰基)-(5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-10-羰基]-苯基}-5-氟代-2-甲基-苯甲酰胺于室溫、氮氣下，將N-{3-氯代-4-(5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-10-羰基)-苯基]-5-氟代-2-甲基-苯甲酰胺(4.73g,10mmol)的二氯甲烷(300ml)懸浮液與三氯代乙酰氯(1.81g,10mmol)一起攪拌6小時。加入第二份量的三氯代乙酰氯(1.81g,10mmol)，于室溫下攪拌該反應物過夜。用二氯甲烷(500ml)稀釋后，通過硅膠塞柱(2x)過濾該反應混合物，濾液真空蒸發(fā)成殘留物。將該殘留物再溶于二氯甲烷(300ml)中，用0.5N氫氧化鈉和水洗滌，干燥(硫酸鎂)。通過硅膠塞柱(2x)過濾，真空蒸發(fā)濾液，得到6.2g(10mmol)3-三氟甲基酮，為褐色無定形粉末，將其不經(jīng)進一步純化用于實施例1步驟b中。
步驟b)10-[2-氯代-4-(5-氟代-2-甲基-苯甲酰氨基)-苯甲?；鵠-10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-3-甲酸于室溫、氮氣下，將N-{3-氯代-4-[3-(三氯代羰基)-(5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-10-羰基]-苯基}-5-氟代-2-甲基-苯甲酰胺(1.22g,2mmol)在丙酮(5ml)中與2.5N氫氧化鈉(1.6ml,4mmol)一起攪拌45分鐘。用2N鹽酸(2ml,4mmol)將該反應混合物中和至pH7.0。加入水(10ml)后，過濾沉淀，順序用冷水、乙醇和乙醚洗滌，空氣干燥后得到粗品產(chǎn)物，為無色粉末(750mg,72％)。使粗品產(chǎn)物從甲醇-水(3:1,10ml)中重結晶，于25℃真空干燥3小時后得到為均一無色結晶固體的目標化合物600mg(1.2mmol),m.p.218℃(分解)。MS(+FAB),m/z:520/518(M+H)。C28H21ClFN3O4.0.62H2O分析計算值C,63.55；H,4.24；N,7.94。
實測值C,63.53；H,4.21；N,7.82。
實施例210-[2-氯代-4-(5-氟代-2-甲基-苯甲酰氨基)-苯甲?；鵠-10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-3-甲酸，鉀鹽(1∶1)用1N氫氧化鉀(1ml,1mmol)處理實施例1步驟b產(chǎn)物10-[2-氯代-4-(5-氟代-2-甲基-苯甲酰氨基)-苯甲?；鵠-10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-3-甲酸(517mg,1mmol)的甲醇(10ml)中的懸浮液并過濾。真空蒸發(fā)溶劑后，將殘留物再溶于丙酮(50ml)中，再過濾(2x)，濃縮至小體積(20ml)。加入乙醚并冷卻，過濾固體并于70℃真空干燥3小時后得到270mg(0.49mmol)該酸的鉀鹽，為微帶色的無定形粉末，m.p.195-205℃。MS(+FAB),m/z:520/518(M+H)。C28H20ClFKN3O4.3.2H2O分析計算值C,60.48；H,3.63；N,7.56。
實測值C,59.22；H,4.03；N,7.30。
實施例3N-{3-氯代-4-[3-(N’,N’-二甲基-肼基羰基)-5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-10-羰基]-苯基}-5-氟代-2-甲基-苯甲酰胺于60℃、氮氣下，將N-{3-氯代-4-[3-(三氯代羰基)-(5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-10-羰基]-苯基}-5-氟代-2-甲基-苯甲酰胺(1.86g,3mmol)與過量的N,N-二甲基肼(5ml)一起攪拌3小時。高真空下去除過量的N,N-二甲基肼。將殘留物溶于乙酸乙酯中，通過短硅膠塞柱過濾，真空蒸發(fā)濾液，得到1.63g(2.9mmol,97％)粗品產(chǎn)物。經(jīng)硅膠(150g)快速柱層析純化，用乙酸乙酯洗脫，于25℃真空干燥過夜后得到1.15g(2.1mmol)目標化合物，為淡黃色無定形粉末，保留0.33mol乙酸乙酯，m.p.133-135℃。MS(-ESI),m/z:560/558(M-H)-。C30H27ClFN5O3.0.33C4H8O2分析計算值C,63.85；H,5.07；N,11.88。
實測值C,63.17；H,5.10；N,11.77。
實施例42-[[10-[2-氯代-4-[(5-氟代-2-甲基苯甲?；?氨基]苯甲酰基]-10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-3-基]羰基]-1,1,1-三甲基碘化用過量的碘代甲烷(5g,35mmol)在二氯甲烷(100ml)中處理實施例3的產(chǎn)物N-{3-氯代-4-[3-(N’,N’-二甲基-肼基羰基)-5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-10-羰基]-苯基}-5-氟代-2-甲基-苯甲酰胺(700mg,1.25mmol)，并于室溫、氮氣下攪拌60小時。過濾沉淀，順序用冷的二氯甲烷和乙醚洗滌，于25℃、真空干燥過夜后得到700mg(1.0mmol)目標化合物，為無色無定形粉末，m.p.(188)193℃。MS(-ESI),m/z:828(MI+I)-MS(+FAB),m/z:574(M+H)+C31H30ClFIN5O3.H2O.0.6CH2Cl2分析計算值C,49.23；H,4.34；N,9.08；I,16.47。
實測值C,48.83；H,4.00；N,9.11；I,17.02。
實施例52-[[10-[2-氯代-4-[(5-氟代-2-甲基苯甲?；?氨基]苯甲?；鵠-10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-3-基]羥基亞甲基]-1,1,1-三甲基內(nèi)鹽用0.1N氫氧化鈉(5.7ml,0.57mmol)在甲醇-水(10ml∶10滴)混合液中處理實施例4的產(chǎn)物2-[[10-[2-氯代-4-[(5-氟代-2-甲基苯甲?；?氨基]苯甲?；鵠-10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-3-基]羰基]-1,1,1-三甲基碘化(400mg,0.57mmol)。真空濃縮后，再加入水。過濾沉淀，順序用水、冷甲醇和乙醚洗滌，于25℃、真空干燥5小時后得到160mg(0.28mmol)目標化合物，為無色無定形粉末，m.p.255℃。MS(+ESI),m/z:576/574(M+H)+C31H29ClFN5O3分析計算值C,64.86；H,5.09；N,12.20。
實測值C,63.44；H,5.09；N,12.15。
實施例6N-[5-[3-三氯代甲基羰基]-[5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-10(11H)-基]羰基]-2-氯代苯基]-2-苯基-苯甲酰胺于氮氣下，向攪拌的2-苯基-N-[4-(5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-10(11H)-基-羰基]-2-氯代苯基]-苯甲酰胺(5.00g,9.7mmol)的二氯甲烷(55ml)溶液中加入N,N-二異丙基乙胺(3.39ml,19.4mmol)，接著用5分鐘滴加三氯乙酰氯(3.25ml,29.1mmol)。于室溫下將該反應混合物攪拌過夜。用水將該反應混合物洗滌三次。用二氯甲烷回洗合并的水萃取物，干燥有機萃取物，去除溶劑得到粗品產(chǎn)物(8.05g)。從乙酸乙酯-己烷中結晶得到純品產(chǎn)物(5.12g)。重結晶后得到分析樣品m.p.168-170℃。MS(+ESI),m/z:663 M+。C34H27N3O5分析計算值C,61.56；H,3.49；N,6.33。
實測值C,61.28；H,3.22；N,6.32。
實施例710-{4-[(聯(lián)苯基-2-羰基)-氨基]-2-氯代-苯甲酰基)-10,11-二氫-5H-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮雜-3-甲酸向N-[5-[3-三氯甲基羰基]-[5H-吡咯并-[2,1-c]-[1,4]苯并二氮雜-10(11H)-基]羰基-2-氯代苯基]-2-苯基苯甲酰胺(2.24g,3.4mmol)的丙酮(22ml)溶液中加入氫氧化鈉水溶液(2.48ml,2.5N,6.2mmol)，于室溫下將該反應物攪拌1.25小時。用鹽酸(3.47ml,2N)酸化該反應物，真空去除溶劑。使殘留物分配于乙酸乙酯-水之間，干燥并去除溶劑，得到粗品產(chǎn)物(2.41g)。用乙醚-己烷研磨得到固體(1.9g)。使樣品從氯仿-甲醇-乙醚中結晶m.p.216-218℃。MS(+FAB),m/z:562/564(M+H)+。C34H27N3O5分析計算值C,70.52；H,4.30；N,7.48。
實測值C,69.25；H,4.39；N,7.14。
實施例810-(4-[(聯(lián)苯基-2-羰基)-氨基]-2-氯代-苯甲?；?-10,11-二氫-5H-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮雜-3-甲酸-1,1-二甲基酰肼向N-[5-[3-三氯甲基羰基]-[5H-吡咯并-[2,1-c]-[1,4]苯并二氮雜-10(11H)-基]羰基-2-氯代苯基]-2-苯基苯甲酰胺(0.941g,1.5mmol)的二氯甲烷(2ml)懸浮液中加入1,1-二甲基肼(1.1ml,15mmol)，將該反應物攪拌24小時。該固體溶于溶液中，然后變?yōu)閼腋∫?。蒸發(fā)溶劑，真空去除過量的肼。殘留物經(jīng)硅膠柱甲醇-乙酸乙酯(1∶20)中層析純化，用相同的溶劑洗脫，得到0.8g化合物。從甲醇-乙醚中結晶兩次得到0.454g純品，m.p.173-176℃。MS(+FAB),m/z:604(M+H)+。C34H27N3O5分析計算值C,69.59；H,5.01；N,11.59。
實測值C,69.40；H,5.01；N,11.60。
實施例910-(4-[(聯(lián)苯基-2-羰基)-氨基]-2-氯代-苯甲?；?-10,11-二氫-5H-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮雜-3-甲酸-哌嗪-N-甲基酰胺方法A于氮氣下，將所述羧酸(實施例7)(4g,7.12mmol)的二氯甲烷(27ml)和二甲基甲酰胺(0.66ml,8.54mmol)懸浮液冷卻至約0-5℃。逐漸加入在二氯甲烷(3ml)中的草酰氯(0.75ml,8.54mmol)。于室溫下，將該混合物攪拌1.5小時。于氮氣下，用約15分鐘向N-甲基哌嗪(3.2ml,28.5mmol)的含有二異丙基乙胺(7.45ml,42.72mmol)的二氯甲烷(30ml)溶液中加入新制備的酰氯溶液。于室溫下，將該反應物攪拌1.5小時。用二氯甲烷(20ml)稀釋該混合物，用水、5％碳酸氫鈉和25％鹽水洗滌該混合物。用二氯甲烷回洗水溶液萃取物，干燥合并的有機溶液，真空去除溶劑，得到粗品產(chǎn)物(5.8g)。殘留物經(jīng)硅膠(140g)柱在甲醇-乙酸乙酯(1∶20)中層析純化。用甲醇-乙酸乙酯(1∶10)洗脫產(chǎn)物，得到為灰白色泡沫狀物的純品化合物。將樣品(0.97g,1.51mmol)溶于甲醇-乙醚(1∶1,6ml)混合液中，加入甲醇制氯化氫(1N,2ml,1.96mM)。攪拌45分鐘后，真空去除所有溶劑。用含數(shù)毫升甲醇的乙醚將殘留物研磨過夜。過濾產(chǎn)生的無定形固體，得到粗品鹽酸鹽(0.876g)。從乙醇-乙醚中再沉淀得到其鹽(0.516g)。MS(EI)m/z:604(M+H)+。C38H34ClN5O3.HCl.1.5H2O分析計算值C,64.44；H,5.22；N,9.89。
實測值C,64.15；H,5.39；N,9.61。
方法B向?qū)嵤├?產(chǎn)物(2.0g,3.56mmol)的二氯甲烷(150ml)懸浮液中順序加入N-甲基哌嗪(0.414ml,3.74mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.716g,3.74mmol)和4-二甲基氨基吡啶(催化量)。于室溫下，將該反應物攪拌36小時，用二氯甲烷稀釋，用水、氫氧化鈉(1N)、鹽水洗滌，干燥(硫酸鎂)。經(jīng)快速層析(硅膠，洗脫溶劑為氯仿-甲醇50∶1，然后為20∶1)純化，得到白色泡沫狀物(1.55g)。
實施例1010-{4-[(聯(lián)苯基-2-羰基)-氨基]-2-氯代-苯甲?；鶀-10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-3-甲酸(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-酰胺用與實施例9方法A所述相同的方法，制備實施例10的化合物，但是用N,N,N’-三甲基乙二胺代替N-甲基哌嗪。得到為灰白色無定形固體的目標化合物。m.p.100-120℃,MS(+FAB),m/z:646(M+H)+。
實施例11聯(lián)苯基-2-羧酸{3-氯代-4-[3-(4-哌啶基-哌啶-1-羰基)-5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-10-羰基]-苯基}-酰胺用與實施例9方法A所述相同的方法，制備實施例11的化合物，但是用4-哌啶基-哌啶代替N-甲基哌嗪。得到為灰白色無定形固體的目標化合物。m.p.209-219℃,MS(+FAB),m/z:712/714(M+H)+。
實施例12聯(lián)苯基-2-羧酸{3-氯代-4-[3-(4-二甲基氨基-哌啶-1-羰基)-5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-10-羰基]-苯基}-酰胺用與實施例9方法A所述相同的方法，制備實施例12的化合物，但是用4-二甲基氨基-哌啶代替N-甲基哌嗪。得到為棕色無定形固體的目標化合物。m.p.138-152℃,MS(+FAB),m/z:672(M+H)+。C40H38ClN5O3.HCl,H2O分析計算值C,66.04；H,5.64；N,9.63。
實測值C,65.22；H,5.49；N,9.32。
實施例13聯(lián)苯基-2-羧酸{3-氯代-4-[3-(4-甲基-哌嗪-1-氨基羰基)-5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-10-羰基]-苯基}-酰胺用與實施例9方法A所述相同的方法，制備實施例13的化合物，但是用4-N-甲基-N-氨基哌嗪代替二甲基肼。得到為淡黃色固體的目標化合物。m.p.172-182℃,MS(+FAB),m/z:660(M+H)+。
實施例1410-{4-[(聯(lián)苯基-2-羰基)-氨基]-2-氯代-苯甲酰基}-10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-3-甲酸(2-二甲基氨基-乙基)-酰胺用與實施例9方法A所述相同的方法，制備實施例14的化合物，但是用N,N-二甲基乙二胺代替N-甲基哌嗪。得到為白色固體的目標化合物。m.p.85-94℃,MS(+FAB)m/z:632(M+H)+。C37H34ClN5O3.2H2O分析計算值C,66.45；H,5.69；N,10.47。
實測值C,64.57；H,5.50；N,9.28。
實施例15聯(lián)苯基-2-羧酸{3-氯代-4-[3-(4-嗎啉代-哌啶-1-羰基)-5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-10-羰基]-苯基}-酰胺用與實施例9方法A所述相同的方法，制備實施例15的化合物，但是用4-嗎啉代-哌啶代替N-甲基哌嗪。得到為無定形固體的目標化合物。MS(+FAB),m/z:714(M+H)+。
實施例1610-(4-[(聯(lián)苯基-2-羰基)-氨基]-2-甲氧基-苯甲?；?-10,11-二氫-5H-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮雜-3-甲酸哌嗪-N-甲基酰胺步驟a)2-甲氧基-4-硝基苯甲酸甲酯通過注射器向4-硝基-2-甲氧基苯甲酸(50g,250mmol)和甲醇于室溫下攪拌的溶液中加入亞硫酰氯(13.9ml,190mmol)。于室溫下將該反應物攪拌16小時。真空去除揮發(fā)物。將殘留物溶于二氯甲烷中。用氫氧化鈉(1N)洗滌，分離有機層并干燥(硫酸鎂)。真空蒸發(fā)得到淡黃色固體(50g),mp80-81℃，將其直接用于下一步驟。C9H9NO5分析計算值C,51.19；H,4.30；N,6.63。
實測值C,50.97；H,4.11；N,6.51。
步驟b)4-氨基-2-甲氧基苯甲酸甲酯于室溫、50psi氫氣下，將2-甲氧基-4-硝基苯甲酸甲酯(12g,57mmol)、鈀(10％在活性炭上)和乙醇(150ml)的混合物振搖2小時。通過硅藻土過濾該反應物，用氯仿洗滌硅藻土。蒸發(fā)氯仿洗滌液得到黃色固體。經(jīng)結晶純化得到淡黃色結晶固體(8.76g),mp148-149℃。C9H11NO3分析計算值C,59.66；H,6.12；N,7.73。
實測值C,59.42；H,6.02；N,7.69。
步驟c)4-[(聯(lián)苯基-2-羰基)-氨基]-2-甲氧基-苯甲酸甲酯向回流的2-聯(lián)苯基羧酸(9.2g,46mmol)的二氯甲烷溶液中加入二甲基甲酰胺(0.1ml,1.4mmol)，然后通過注射器加入純品草酰氯(8.1ml,92mmol)。將該反應物回流10分鐘，然后真空去除揮發(fā)物。將殘留物再溶于二氯甲烷中，濃縮并高真空下干燥15分鐘。將該酰氯溶于二氯甲烷(50ml)中，并加至0℃的4-氨基-2-甲氧基-苯甲酸甲酯(8.4g,46mmol)、二異丙基乙胺(10.5ml,60mmol)和二氯甲烷(200ml)溶液中。將該反應物溫熱至室溫并攪拌16小時。用二氯甲烷稀釋該反應物，用水、(1N)氫氧化鈉、(1N)鹽酸和鹽水洗滌，干燥(硫酸鎂)。蒸發(fā)得到黃色泡沫狀物，使其從甲醇中結晶得到淡黃色固體(16.08g),mp 141-142℃。C22H19NO4分析計算值C,73.12；H,5.30；N,3.88。
實測值C,72.93；H,520；N,3.83。
步驟d)4-[(聯(lián)苯基-2-羰基)-氨基]-2-甲氧基-苯甲酸將氫氧化鈉(1N,38ml,38mmol)加至回流的4-[(聯(lián)苯基-2-羰基)-氨基]-2-甲氧基-苯甲酸甲酯(11.6g,32mmol)的甲醇(200ml)溶液中。將該反應物回流2小時。真空去除揮發(fā)物，殘留物溶于乙酸乙酯/HCl(水溶液)中。用乙酸乙酯再萃取水溶液層，合并有機萃取物并干燥(硫酸鎂)。蒸發(fā)得到淡橙色泡沫狀物，使其從甲醇中結晶得到白色固體(9.33g),mp158-159℃。C21H17NO4分析計算值C,72.61；H,4.93；N,4.03。
實測值C,72.20；H,4.61；N,3.96。
步驟e)[3-甲氧基-4-(5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-10-羰基)-苯基]-聯(lián)苯基-2-甲酰胺(carboxylic acid-amide)向回流的4-[(聯(lián)苯基-2-羰基)-氨基]-2-甲氧基-苯甲酸(3.29g,9.5mmol)的二氯甲烷(50ml)溶液中加入二甲基甲酰胺(0.02ml,0.28mmol)，然后通過注射器加入純品草酰氯(0.87ml,10mmol)。將該反應物回流10分鐘，然后真空去除揮發(fā)物。將殘留物再溶于二氯甲烷中，蒸發(fā)并高真空下干燥15分鐘。將該酰氯溶于二氯甲烷(50ml)中，并加至0℃的10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜(1.57g,8.55mmol)、N,N-二異丙基乙胺(1.93ml,12.35mmol)和二氯甲烷(200ml)溶液中。將該反應物溫熱至室溫并攪拌2小時。用二氯甲烷稀釋該反應混合物，用水、(1N)氫氧化鈉、(1N)鹽酸和鹽水洗滌，干燥(硫酸鎂)。蒸發(fā)得到黃色泡沫狀物，使其從甲醇中結晶得到白色固體(2.05g),mp224-226℃。C33H27N3O3分析計算值C,76.87；H,5.35；N,8.07。
實測值C,76.82；H,5.23；N,8.04。
步驟f)N-[5-[3-三氯甲基羰基]-[5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-10(11H)-基]羰基]-2-甲氧基苯基]-2-苯基苯甲酰胺于0℃，通過注射器向?qū)嵤├?57步驟e產(chǎn)物(2.5g,4.87mmol)的二氯甲烷(50ml)溶液中加入三氯乙酰氯(1.09ml.9.74mmol)，于室溫下將該反應物攪拌4小時。用二氯甲烷稀釋該反應物，用碳酸氫鈉和鹽水洗滌，干燥(硫酸鎂)有機萃取物。蒸發(fā)并通過硅膠墊過濾殘留物，用乙酸乙酯/己烷1∶1洗脫，得到為白色泡沫狀物的所需產(chǎn)物(1.5g),mp139-143℃。C35H26Cl3N3O4+0.25H2O分析計算值C,63.36；H,4.03；N,6.33。
實測值C,63.05；H,4.03；N,6.21。
步驟g)10-{4-[(聯(lián)苯基-2-羰基)-氨基]-2-甲氧基苯甲?；?-10,11-二氫-5H-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮雜-3-甲酸將氫氧化鈉(1N,2.0ml,1.92mmol)加至室溫下的N-[5-[3-三氯甲基羰基]-[5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-10(11H)-基]羰基]-2-甲氧基苯基]-2-苯基苯甲酰胺(0.8g,1.2mmol)的四氫呋喃(10ml)溶液中，將該反應物攪拌1.5小時。加入鹽酸(1N)，用冰稀釋該反應物。真空去除揮發(fā)物，過濾白色固體，干燥得到0.8g目標化合物，mp149-151℃。C34H27N3O5分析計算值C,70.21；H,5.14；N,7.22。
實測值C,70.20；H,4.89；N,7.31。
步驟h)10-(4-[(聯(lián)苯基-2-羰基)-氨基]-2-甲氧基-苯甲?；?-10,11-二氫-5H-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮雜-3-甲酸哌嗪-N-甲基酰胺于室溫下，將10-{4-[(聯(lián)苯基-2-羰基)-氨基]-2-甲氧基苯甲?；?-10,11-二氫-5H-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮雜-3-甲酸(0.434g,0.778mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.157g,0.817mmol)、4-二甲基氨基吡啶(催化量)和N-甲基哌嗪(.091ml,0.817mmol)的二氯甲烷溶液攪拌3.5小時。用二氯甲烷稀釋該反應物，用水和鹽水洗滌。干燥(硫酸鎂)有機萃取物，濃縮得到白色泡沫狀物。經(jīng)快速層析(硅膠，洗脫劑為氯仿-甲醇50∶1，然后為20∶1)純化，并從乙醇中結晶得到白色固體(0.23g),mp139-140℃。C39H37N5O4+1.0H2O分析計算值C,71.21；H,5.98；N,10.65。
實測值C,71.25；H,5.99；N,10.64。
實施例1710-(4-[(聯(lián)苯基-2-羰基)-氨基]-2-甲氧基-苯甲?；?-10,11-二氫-5H-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮雜-3-甲酸-1,1-二甲基酰肼于0℃，通過注射器向?qū)嵤├?6步驟h的產(chǎn)物(1.0g,1.947mmol)的二氯甲烷(20ml)溶液中加入三氯乙酰氯(0.434ml,3.89mmol)，于室溫下將該反應物攪拌4小時。用二氯甲烷稀釋該反應物，用碳酸氫鈉和鹽水洗滌，干燥(硫酸鎂)有機萃取物。蒸發(fā)并通過硅膠墊過濾殘留物，用乙酸乙酯-己烷1∶1洗滌，得到三氯代酮，濃縮時為白色泡沫狀物。于室溫下，將該泡沫狀物溶于純N,N-二甲基肼中，然后回流下加熱25分鐘。真空去除揮發(fā)物，將殘留物吸附于硅膠上，經(jīng)快速層析純化(洗脫溶劑為乙酸乙酯-己烷1∶1，然后為乙酸乙酯-甲醇4∶1)。從乙醇中結晶得到褐色固體(0.23g),mp164-165℃。C36H33N5O4+1.0H2O分析計算值C,70.0；H,5.71；N,11.34。
實測值C,70.01；H,5.62；N,11.29。
實施例1810-{4-[(聯(lián)苯基-2-羰基)-氨基]-2-氯代-苯甲?；鶀-10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-3-甲酸(甘氨?；?-酰胺用與實施例8所述相同的方法，但是用叔丁基甘氨酸代替二甲基肼作為反應物制備實施例18的化合物。于室溫下，通過用甲酸(2.3ml)處理，將產(chǎn)生的目標化合物的叔丁酯(0.725g)處理48小時得到目標化合物，為白色無定形固體。mp176-186℃。MS(ESI)m/z617(M-H)+。C36H30N4O6分析計算值C,67.9；H,4.40；N,9.05。
實測值C,66.51；H,4.23；N,8.44。
實施例1910-[2-氯代-4-(2-噻吩-2-基-苯甲酰氨基)-苯甲?；鵠-10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-3-甲酸-1,1-二甲基酰肼N-[3-氯代-4-(5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜草-10-羰基)-苯基]-2-噻吩-2-基-苯甲酰胺步驟a)2-溴代苯甲酰氯于氮氣下，向溴代苯甲酸(1.88g,9.35mmol)的無水四氫呋喃(20ml)溶液中加入1滴二甲基甲酰胺，接著加入草酰氯(1ml,11.4mmol)。于室溫下，攪拌該混合物至不再產(chǎn)生氣體，然后加熱至回流。將該溶液冷卻至室溫，然后真空濃縮得到金黃色油狀物(1.87g)，將其不經(jīng)進一步純化使用。
步驟b)2-溴代-N-[3-氯代-4-(10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-10-羰基)-苯基]-苯甲酰胺于氮氣下，向攪拌的10,11-二氫-10-(2-氯代-4-氨基苯甲酰基)-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜(2.25g,6.66mmol)的二氯甲烷(40ml)溶液中加入三乙胺(1.19ml,8.53mmol)。將該混合物冷卻至0℃，然后滴加2-溴代苯甲酰氯(1.87g,8.52mmol)的二氯甲烷(20ml)溶液。去除冷卻浴，繼續(xù)攪拌14小時。將該反應混合物傾至水中。分離有機層，順序用水、飽和的碳酸氫鈉水溶液和水洗滌，然后干燥(硫酸鈉)。過濾該物質(zhì)，真空濃縮得到淡橙色泡沫狀物(2.00g)。經(jīng)硅膠快速層析純化，用己烷-乙酸乙酯(1∶1)作為流動相，得到白色粉末(1.39g),mp188-189℃。MS(EI)m/z519(M)+。C26H19BrClN3O2+0.5H2O分析計算值C,58.93；H,3.80；N,7.93。
實測值C,59.12；H,3.62；N,7.75。
步驟c)N-[3-氯代-4-(5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-10-羰基)-苯基]-2-噻吩-2-基-苯甲酰胺將2-溴代-N-[3-氯代-4-(10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-10-羰基)-苯基]-苯甲酰胺(1.04g,2.0mmol)、噻吩-2-硼酸(boronic acid)(0.32g,2.4mmol)和氫氧化鋇八水合物(0.88g,2.8mmol)懸浮于乙二醇二甲醚(28.8ml)和水(4.8ml)中。于室溫下攪拌該不均一的混合物，通入氮氣10分鐘，然后加入雙(三苯膦)氯化鈀(Ⅱ)(0.17g,0.24mmol)，將該反應物置于氮氣壓力下。將該反應物于70℃油浴上加熱。20小時后，再向該反應物中加入噻吩-2-硼酸(0.13g,1mmol)。共反應24小時后，再向反應燒瓶中加入雙(三苯膦)氯化鈀(Ⅱ)(84mg,0.12mmol)。將該反應物冷卻至室溫,將混合物萃取入苯中。用鹽水洗滌合并的有機萃取物，干燥(硫酸鎂)，過濾并真空濃縮，得到棕色固體(1.42g)。用乙酸乙酯研磨該固體并過濾。濾液經(jīng)硅膠快速層析純化，用己烷-乙酸乙酯(1∶1)作為流動相，得到淡黃色固體，于78℃、真空下干燥兩天(0.59g),mp132-136℃。MS(EI)m/z523(M)+。C30H22ClN3O2S+0.5H2O分析計算值C,67.53；H,4.36；N,7.88。
實測值C,67.53；H,4.08；N,7.90。
步驟d)N-[3-氯代-4-[3-(三氯代羰基)-(5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-10-羰基]-苯基}-2-噻吩-2-基-苯甲酰胺根據(jù)實施例1步驟A所示的方法，將步驟C的產(chǎn)物轉(zhuǎn)化為相應的三氯代酮。
步驟e)10-[2-氯代-4-(5-噻吩-2-基-苯甲酰氨基)-苯甲?；鵠-10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-3-甲酸根據(jù)實施例1步驟B所示的方法，將步驟D制備的三氯代酮水解為目標酸。
步驟f)10-[2-氯代-4-(2-噻吩-2-基-苯甲酰氨基)-苯甲?；鵠-10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-3-甲酸-1,1-二甲基酰肼根據(jù)實施例8的方法，使步驟D制備的三氯代酮與N,N-二甲基肼反應。
實施例2010-[2-氯代-4-(3-吡啶-2-基-苯甲酰氨基)-苯甲?；鵠-10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-3-甲酸-哌嗪-N-甲基酰胺N-[3-氯代-4-(5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-10-羰基)-苯基]-3-吡啶-2-基-苯甲酰胺步驟a)用與實施例19步驟19a和19b所述相同的方法制備實施例20a化合物。在步驟19a中，用2-(吡啶-3-基)-苯甲酸代替2-溴代苯甲酸。2-(吡啶-3-基)-苯甲酸的制備根據(jù)Timari等(Chem.Ber.1992,125,929)所述方法進行，用3-溴代吡啶代替2-溴代吡啶。得到為灰白色粉末的目標化合物(0.21g),mp155-158℃。C31H23ClN4O2+0.85H2O分析計算值C,69.68；H,4.66；N,10.49。
實測值C,69.69；H,4.70；N,10.16。
N-{3-氯代-4-[3-(三氯代羰基)-(5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-10-羰基)-苯基}-3-吡啶-2-基-苯甲酰胺步驟b)根據(jù)實施例1步驟A所示方法，將步驟A的產(chǎn)物轉(zhuǎn)化為相應的三氯代酮。
10-[2-氯代-4-(3-吡啶-2-基-苯甲酰氨基)-苯甲?；鵠-10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-3-甲酸步驟c)根據(jù)實施例1步驟B所示方法，將步驟B制備的三氯代酮水解為目標酸。
10-[2-氯代-4-(3-吡啶-2-基-苯甲酰氨基)-苯甲?；鵠-10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-3-甲酸-哌嗪-N-甲基酰胺步驟d)用實施例9的方法A將步驟C制備的酸轉(zhuǎn)化為酰胺。
實施例2110-[2-氯代-4-(4-吡啶-2-基-苯甲酰氨基)-苯甲?；鵠-10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-3-甲酸(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-酰胺N-[3-氯代-4-(5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-10-羰基)-苯基]-2-吡啶-4-基-苯甲酰胺步驟a)用與實施例19步驟19a和19b所述相同的方法制備實施例21a化合物。在步驟19a中，用2-(吡啶-4-基)-苯甲酸代替2-溴代苯甲酸。2-(吡啶-4-基)-苯甲酸的制備根據(jù)Timari等(Chem.Ber.1992,125,929)所述方法進行，用4-溴代吡啶鹽酸鹽和增加量的堿代替2-溴代吡啶。得到為淡黃色固體的目標化合物(1.21g),mp165-168℃。C31H23ClN4O2+0.47H2O分析計算值C,70.59；H,4.57；N,10.62。
實測值C,70.58；H,4.50；N,10.33。
N-{3-氯代-4-[3-(三氯代羰基)-(5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-10-羰基)-苯基}-2-吡啶-4-基-苯甲酰胺步驟b)根據(jù)實施例1步驟A所示方法，將步驟A的產(chǎn)物轉(zhuǎn)化為相應的三氯代酮。
10-[2-氯代-4-(4-吡啶-2-基-苯甲酰氨基)-苯甲?；鵠-10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-3-甲酸步驟c)根據(jù)實施例1步驟B所示方法，將步驟B制備的三氯代酮水解為目標酸。
10-[2-氯代-4-(4-吡啶-2-基-苯甲酰氨基)-苯甲?；鵠-10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-3-甲酸(2-二甲基氨基乙基)-甲基-酰胺步驟d)用實施例10的方法將步驟C制備的酸轉(zhuǎn)化為其2-二甲基氨基-乙基-甲基酰胺。
實施例2210-[2-氯代-4-(2-吡啶-2-基-苯甲酰氨基)-苯甲?；鵠-10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-3-甲酸-哌嗪-N-甲基酰胺N-[4-(3-甲氧基-5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-10-羰基)-苯基]-2-吡啶-2-基-苯甲酰胺步驟a)2-甲氧基-4-[(2-吡啶-2-基苯甲?；?氨基]苯甲酰氯于氮氣下，向2-甲氧基-4-[(2-吡啶-2-基苯甲?；?氨基]苯甲酸(0.92g,2.64mmol)的無水四氫呋喃(25ml)溶液中加入1滴二甲基甲酰胺，接著加入草酰氯(0.28ml,3.17mmol)。于室溫下，攪拌該混合物至氣體不再產(chǎn)生。真空濃縮該溶液，得到褐色固體(1.16g)，將其不經(jīng)純化使用。
步驟b)N-[4-(3-甲氧基-5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-10-羰基)-苯基]-2-吡啶-2-基-苯甲酰胺于氮氣下，向攪拌的10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜(0.405g,2.20mmol)的二氯甲烷(30ml)溶液中加入三乙胺(0.37ml,2.64mmol)。將該混合物冷卻至0℃，滴加粗品2-甲氧基-4-[(2-吡啶-2-基苯甲酰基)氨基]苯甲酰氯(1.16g)的二氯甲烷(30ml)溶液。5小時后，將該反應混合物傾至水中。分離有機層，順序用水和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次，用水洗滌一次，干燥(硫酸鈉)。過濾該物質(zhì)并真空濃縮得到栗色(marron)固體(1.1g)。經(jīng)硅膠快速層析純化，用己烷-乙酸乙酯-二氯甲烷-甲醇(3∶6∶2∶0.5)作為流動相，接著真空濃縮，得到淡紫色固體(0.88g),mp138-140℃。MS(FAB)m/z515(M+H)。C32H26N4O3+0.43H2O分析計算值C,73.58；H,5.18；N,10.73。
實測值C,73.59；H,5.05；N,10.47。
N-{3-氯代-4-[3-(三氯代羰基)-(5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-10-羰基)-苯基}-2-吡啶-2-基-苯甲酰胺步驟c)根據(jù)實施例1步驟A所示方法，將步驟B的產(chǎn)物轉(zhuǎn)化為相應的三氯代酮。
10-[2-氯代-4-(2-吡啶-2-基-苯甲酰氨基)-苯甲?；鵠-10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-3-甲酸步驟d)根據(jù)實施例1步驟B所示方法，將步驟C制備的三氯代酮水解為目標酸。
10-[2-氯代-4-(2-吡啶-2-基-苯甲酰氨基)-苯甲?；鵠-10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-3-甲酸-哌嗪-N-甲基酰胺步驟d)根據(jù)實施例9的方法B，將步驟D制備的酸轉(zhuǎn)化為其N-甲基哌嗪酰胺。
實施例2310-[2-溴代-4-(2-吡啶-2-基-苯甲酰氨基)-苯甲?；鵠-10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-3-甲酸-1,1-二甲基酰肼N-[3-溴代-4-(5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-10-羰基)-苯基]-2-吡啶-2-基-苯甲酰胺步驟a)2-溴代-4-氨基苯甲酸甲酯用1滴二甲基甲酰胺處理2-(吡啶-2-基)苯甲酸(2.85g,14.3mmol)的無水四氫呋喃(20ml)溶液，接著用草酰氯(1.5ml,17.1mmol)的無水四氫呋喃(5ml)溶液處理。當不再產(chǎn)生氣體時，將該混合物溫熱至回流5分鐘，冷卻至室溫，真空濃縮得到亮黃色固體。將該固體用四氫呋喃(20ml)制成淤漿，再次濃縮。將粗品酰氯不經(jīng)進一步純化用于下一步驟。
步驟b)2-溴代-4-[(2-吡啶-2-基-苯甲酰基)氨基]苯甲酸甲酯將2-溴代-4-氨基苯甲酸甲酯(3g,13mmol)和三乙胺(2.5ml,18mmol)的二氯甲烷(50ml)溶液冷卻至0℃，用2-(吡啶-2-基)苯甲酰氯的二氯甲烷(20ml)淤漿處理。于室溫下攪拌4小時。用20％乙酸驟冷該反應物，順序用飽和的碳酸氫鈉水溶液、水和飽和的鹽水洗滌。干燥(硫酸鎂)，過濾并真空濃縮，得到5.23g白色泡沫狀物。MS(+FAB)m/z411/413(M+H)+。C20H15BrN2O3分析計算值C,58.41；H,3.68；N,6.81。
實測值C,57.73；H,3.66；N,6.54。
步驟c)2-溴代-4-[(2-吡啶-2-基-苯甲酰基)氨基]苯甲酸用1N氫氧化鈉(15ml,1.2eq)處理2-溴代-4-[(2-吡啶-2-基-苯甲?；?氨基]苯甲酸甲酯的甲醇(100ml)溶液。將該溶液溫熱至回流3.5小時，再加入1N氫氧化鈉(10.4ml，共2eq)。再回流2小時，于室溫下將該反應物攪拌過夜。真空濃縮樣品得到淤漿，用水稀釋。用乙酸乙酯洗滌水溶液，用乙酸將水層的pH調(diào)至4.5-5。產(chǎn)物沉淀，過濾并空氣中干燥，得到棕色固體(4.43g)。MS(EI)m/e:397/399(M+)。
步驟d)2-溴代-4-[(2-吡啶-2-基-苯甲?；?氨基]苯甲酰氯于氮氣下，向2-溴代-4-[(2-吡啶-2-基-苯甲?；?氨基]苯甲酸(1.4g,3.52mmol)的無水四氫呋喃(25ml)溶液中加入1滴二甲基甲酰胺，接著加入草酰氯(0.37ml,4.23mmol)。于室溫下攪拌該混合物至無氣體產(chǎn)生，然后加熱至回流。將該反應混合物冷卻至室溫，真空濃縮得到棕色固體(1.385g)，將其不經(jīng)進一步純化使用。
步驟e)N-[3-溴代-4-(5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-10-羰基)-苯基]-2-吡啶-2-基-苯甲酰胺于氮氣下，向攪拌的10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜(0.54g,2.93mmol)的二氯甲烷(35ml)溶液中加入三乙胺(0.49ml,3.52mmol)。將該混合物冷卻至0℃，然后滴加粗品2-甲氧基-4-[(2-吡啶-2-基-苯甲酰基)氨基]苯甲酰氯(1.4g)的二氯甲烷(5ml)的懸浮液。加入完畢后，將該反應混合物溫熱至室溫。18小時后，將該反應混合物傾至水中，順序用水、飽和的碳酸氫鈉水溶液、10％乙酸水溶液(兩次)、飽和的碳酸氫鈉水溶液(一次)和水(一次)洗滌。干燥(硫酸鈉)有機溶液，過濾并真空濃縮，得到深紫色泡沫狀物(1.73g)。經(jīng)硅膠快速層析純化，用己烷-乙酸乙酯(1∶2)作為流動相，然后真空濃縮，得到白色固體(1.23g),mp 227.5-229℃。MS(ESI)m/z563(M)+。C31H23BrN4O2分析計算值C,66.08；H,4.11；N,9.94。
實測值C,65.84；H,3.86；N,9.85。
N-[3-溴代-4-[3-(三氯代羰基)-(5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-10-羰基)-苯基}-2-吡啶-2-基-苯甲酰胺步驟f)根據(jù)實施例1步驟A所示方法，將步驟E的產(chǎn)物轉(zhuǎn)化為相應的三氯代酮。
10-[2-溴代-4-(2-吡啶-2-基-苯甲酰氨基)-苯甲?；鵠-10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-3-甲酸步驟g)根據(jù)實施例1步驟B所示方法，將步驟F制備的三氯代酮水解為目標酸。
10-[2-溴代-4-(2-吡啶-2-基-苯甲酰氨基)-苯甲?；鵠-10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-3-甲酸-1,1-二甲基酰肼步驟h)根據(jù)實施例8所示方法，用1,1-二甲基肼處理步驟F制備的三氯代酮。
實施例2410-[2-氯代-4-(8-喹啉基(quinoloinylyl)氨基)-苯甲?；鵠-10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-3-甲酸-哌嗪-N-甲基酰胺喹啉-8-羧酸[4-(5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-10-羰基)-3-氯代-苯基]-酰胺步驟a)用與實施例19步驟19a和19b所述相同的方法，制備實施例24的化合物。在步驟19a中，用喹啉-8-羧酸代替2-溴代苯甲酸。得到為白色粉末的目標化合物(0.69g),mp230-231℃。C29H21ClN4O2+0.33H2O分析計算值C,69.81；H,4.38；N,11.23。
實測值C,69.81；H,4.09；N,11.14。
喹啉-8-羧酸-4-[3-(三氯代羰基)(5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-10-羰基)-3-氯代-苯基]-酰胺步驟b)根據(jù)實施例1步驟a所示方法，將步驟A的產(chǎn)物轉(zhuǎn)化為相應的三氯代酮。
10-[2-氯代-4-(8-喹啉甲酰氨基)-苯甲?；鵠-10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-3-甲酸步驟c)根據(jù)實施例1步驟b所示方法，將步驟B制備的三氯代酮水解為目標酸。
10-[2-氯代-4-(8-喹啉基氨基)-苯甲酰基]-10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-3-甲酸-哌嗪-N-甲基酰胺步驟d)根據(jù)實施例9的方法B，將步驟c制備的酸轉(zhuǎn)化為N-甲基哌嗪酰胺。
實施例252-苯基-環(huán)戊-1-烯甲酸[3-氯代-4-(3-甲酸(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-酰胺-5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-10-羰基)-苯基]-酰胺步驟a)[2-苯基-環(huán)戊-1-烯羧酸]將氫氧化鈉(1N,10.7ml,11.8mmol)加至回流的2-苯基-環(huán)戊-1-烯羧酸甲酯(2.32g,10.7mmol)(Lin等，J.Chin.Chem.Soc.,1993,40,273-282)的甲醇(40ml)溶液中。將該反應物回流2小時。真空去除揮發(fā)物，式殘留物分配于乙酸乙酯和鹽酸(1N)之間。用乙酸乙酯再萃取水層，合并有機萃取物，干燥(硫酸鎂)。真空蒸發(fā)溶液得到淡黃色固體，使其從丙酮/己烷中重結晶得到白色固體(1.27g),mp145-146℃。C12H12O2分析計算值C,76.57；H,6.43；N,
實測值C,76.47；H,6.35；N,步驟b)2-苯基-環(huán)戊-1-烯碳酰氯通過注射器向2-苯基-環(huán)戊-1-烯羧酸(0.43g,2.28mmol)的二氯甲烷(20ml)溶液中加入二甲基甲酰胺(1滴)，然后加入純品草酰氯(0.4ml,4.56mmol)。于室溫下，將該反應物攪拌2小時，然后真空去除揮發(fā)物。將殘留物再溶于二氯甲烷中，真空濃縮，在高真空下干燥15分鐘，得到琥珀色油狀物，將其不經(jīng)進一步純化直接用于下一步驟。
步驟c)2-苯基-環(huán)戊-1-烯羧酸[4-(5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-10-羰基)-3-氯代-苯基]-酰胺將實施例25步驟b的產(chǎn)物2-苯基-環(huán)戊-1-烯碳酰氯溶于二氯甲烷(20ml)中，于室溫下加至10,11-二氫-10-(2-氯代-4-氨基苯甲?；?-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜(0.77g,2.28mmol)、4-二甲基氨基吡啶(催化量)的二氯甲烷(20ml)溶液中。然后通過注射器加入三乙胺(0.38ml,2.74mmol)。將該反應物攪拌16小時，用二氯甲烷稀釋，用碳酸氫鈉、鹽酸(1N)和鹽水洗滌。干燥(硫酸鎂)二氯甲烷溶液，真空濃縮得到黃色固體。經(jīng)快速層析純化(洗脫溶劑氯仿/甲醇50/1和己烷/乙酸乙酯2/1)，得到白色固體(0.70g),mp121-122℃。C31H26ClN3O2分析計算值C,73.29；H,5.16；N,8.27。
實測值C,73.18；H,5.02；N,8.11。
2-苯基-環(huán)戊-1-烯甲酸[3-氯代-4-(3-三氯代羰基)-5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-10-羰基)-苯基]-酰胺步驟d)根據(jù)實施例1步驟A所示方法，將步驟C的產(chǎn)物轉(zhuǎn)化為相應的三氯代酮。
2-苯基-環(huán)戊-1-烯甲酸[3-氯代-4-(3-羧酸-5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-10-羰基)-苯基]-酰胺步驟e)根據(jù)實施例1步驟B所示方法，將步驟D制備的三氯代酮水解為目標酸。
2-苯基-環(huán)戊-1-烯甲酸[3-氯代-4-(3-甲酸(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-酰胺-5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-10-羰基)-苯基]-酰胺步驟f)根據(jù)實施例10所示方法，使上述步驟e制備的酸反應制備目標酰胺。
對在實驗前(但不是在實驗中)可以自由飲水的清醒大鼠中內(nèi)源性精氨酸血管加壓素抗利尿(V2)反應的拮抗作用的影響給雄性或雌性血壓正常的Sprague-Dawley大鼠(Charles RiverLaboratories,Inc.,Kingston,NY)(體重400-450g)供應LaboratoryRodent食料5001號(PMI Feeds,Inc.,Richmond,IN)，水隨意。在實驗當天，將大鼠單獨置于配有不銹鋼網(wǎng)(以分離糞便和尿)和收集尿的漏斗的代謝籠中。以各種口服劑量給予溶媒或參照藥物。在試驗過程中，不給大鼠提供水或食物。給予受試化合物后收集尿4小時。4小時后，測定尿體積。用Fiske One-Ten滲透壓計(Fiske Associates,Norwood,MA,02062)或Advanced CRYOMATIC滲透壓計(3 C2型，AdvancedInstruments,Norwood,MA)測定尿重量摩爾滲透壓濃度。Na+、K+和Cl-離子的測定用Beckman SYNCHRON EL-ISE Electrolyte Systemanalyzer離子特異性電極進行。在下列結果中，相對于AVP-對照尿體積增加和重量摩爾滲透壓濃度降低表明有活性。本發(fā)明代表性化合物的該實驗結果列于表5中。
與用表達人V2血管加壓素受體的cDNA轉(zhuǎn)染的小鼠成纖維細胞系(LV-2)細胞膜的結合細胞膜的制備吸出含有生長至匯合的貼壁細胞的175ml容量的燒瓶中的培養(yǎng)液。用2×5ml磷酸鹽緩沖液(PBS)洗滌含有貼壁細胞的燒瓶，每次吸出液體。最后，加入5ml不含酶的Hank氏基的溶液(Specialty Media,Inc.,Lafayette,NJ)，使燒瓶靜置2分鐘。將所有燒瓶中的內(nèi)容物傾至離心管中，于300×g使細胞沉淀15分鐘。吸出Hank氏基溶液，將細胞在含有0.25M蔗糖和1.0mM EDTA、pH為7.4的10.0mMTris.HCl緩沖液中，用polytron勻化10秒鐘，設置為6號。將勻漿于1500×g離心10分鐘以去除空胞膜。將上清液于100,000×g離心60分鐘以沉淀受體蛋白。離心后，將該沉淀再懸浮于少量的pH為7.4的50.0mM Tris.HCl緩沖液中。用Lowry法測定蛋白含量，將受體膜懸浮于含有0.1mM苯基甲基磺酰氟(PMSF)和0.2％牛血清清蛋白(BSA)的50.0mM Tris.HCl緩沖液中，使每毫升懸浮液中含有2.5mg受體蛋白。
受體結合在進行結合實驗時，將下列物質(zhì)以毫升為單位加至微量滴定板的96孔內(nèi)含有0.2％熱滅活的BSA、10.0mM氯化鎂和下列蛋白酶抑制劑的100.0ml的100.0mM Tris.HCl緩沖液亮抑蛋白酶肽，1.0mg％；抑酶肽，1.0mg％；1,10-二氮雜菲，2.0mg％；胰蛋白酶抑制劑，10.0mg％和0.1mM PMSF；20.0ml[3H]精氨酸8，血管加壓素(S.A.75.0Ci/mmol)0.8nM，并加入80.0ml組織膜(200.0mg組織蛋白)開始反應。將所述滴定板置于桌面上靜置120分鐘以達到平衡。非特異性結合在1.0mM未標記的配體(以體積20ml加入)存在下測定。對于受試化合物而言，將其溶于50％二甲基亞砜(DMSO)中，以體積20.0ml加入，至最終孵化體積為200ml。結合完成后，用Brandel細胞捕獲儀(Gaithersburg,MD)過濾收集每孔的內(nèi)容物。由配體-受體配合物捕獲于濾膜上的放射活性在Packard LS計數(shù)儀上液體閃爍計數(shù)測定，氚的效能為65％。用LUNDON-2的競爭程序(LUNDON SOFTWARE,OH)分析數(shù)據(jù)得到IC50值。
本發(fā)明的代表性化合物在該實驗中的結果示于表5中。
表5大鼠尿體積數(shù)據(jù)*和與用表達人V2受體的cDNA轉(zhuǎn)染的小鼠成纖維細胞系(LV-2)膜的結合測定實施例號尿體積(ml/4hr)血管加壓素V2結合受體10mg/kg大鼠口服nM實施例113.214實施例211.5實施例3 22 15實施例49.2 60實施例59.1 60實施例65.6實施例719.24.3實施例840.98.6實施例923.73.3實施例10 22.25.5實施例11 20.59.3實施例12 21.4實施例13 16.8實施例14 11.3實施例15 19.310.7實施例16 24.3實施例17 9.4實施例18 7.8 7.6*口服給予大鼠10mg/kg劑量后4小時產(chǎn)生的尿體積
權利要求
1．下式的化合物或其藥學上可接受的鹽、酯或前體藥物形式
其中R選自-OH、-NR1R3、-NHOR1、-NH-(CH2)-COOH、
或
R1和R2獨立為氫或低級烷基；R3選自
或
X為CH2、NR1、O、S；p為1-4；q為2-4；R4和R5獨立選自氫、低級烷基、鹵素、氨基、氰基、三氟甲基、羥基或低級烷氧基；R6為下式的部分
Ar選自
或
R7和R8獨立選自氫、鹵素、氰基、低級烷基、低級烷氧基、羥基或三氟甲基；R9為下式的部分
或
R10選自C3-C7環(huán)烷基、環(huán)戊烯基、環(huán)己烯基或下式部分
Ar’選自
或
R11和R12獨立選自氫、F、Cl、Br、氰基、低級烷基、低級烷氧基、苯氧基、取代的苯氧基或三氟甲基；Ar”選自a)苯基；b)具有一個或兩個選自N、O、S的雜原子的5元芳(不飽和)雜環(huán)；c)具有三個或四個氮原子的5元芳(不飽和)雜環(huán)；或d)具有一個、兩個或三個氮原子的6元芳(不飽和)雜環(huán)；且A”可任選被鹵素、低級烷基、羥基、低級烷氧基或三氟甲基取代。
2．具有下式的權利要求1的化合物或其藥學上可接受的鹽、酯或前體藥物形式
其中R選自-OH、-NR1R3、-NH-(CH2)-COOH、
或
R1和R2獨立為氫或低級烷基；R3為
X為CH2、NR1、O、S；p為1-4；q為2-4；R4和R5獨立選自氫、低級烷基、鹵素、氨基、羥基、氰基、三氟甲基或低級烷氧基；R6為下式的部分
Ar選自
或
R7和R8獨立選自氫或鹵素、低級烷氧基；R9為下式的部分
或
R10為下式部分
Ar’選自
或
R11和R12獨立選自氫、F、Cl、Br、氰基、低級烷基、低級烷氧基、三氟甲基、苯氧基或具有下式的取代的苯氧基；
其中R14選自氫、鹵素、氰基、低級烷基、低級烷氧基、羥基或三氟甲基；A”選自苯基2-吡啶基或具有一個或兩個選自N、O、S的雜原子的5元芳(不飽和)雜環(huán)。
3．具有下式的權利要求1的化合物或其藥學上可接受的鹽、酯或前體藥物形式
其中R選自-OH、-NR1R3或
R1和R2獨立選自氫或低級烷基；R3為
q為2-4；R6為下式的部分
Ar選自
或
R7和R8獨立選自氫或鹵素；R9為下式的部分
或
R10為下式的部分
Ar”選自苯基或具有一個或兩個選自N、O、S的雜原子的5元芳(不飽和)雜環(huán)。
4．權利要求1的化合物為10-[2-氯代-4-(5-氟代-2-甲基-苯甲酰氨基)-苯甲?；鵠-10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-3-甲酸或其藥學上可接受的鹽、酯或前體藥物形式。
5．權利要求1的化合物為10-[2-氯代-4-(5-氟代-2-甲基-苯甲酰氨基)-苯甲?；鵠-10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-3-甲酸，鉀鹽(1∶1)。
6．權利要求1的化合物為N-{3-氯代-4-[3-(N’,N’-二甲基-肼基羰基)-5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-10-羰基]-苯基}-5-氟代-2-甲基-苯甲酰胺或其藥學上可接受的鹽、酯或前體藥物形式。
7．權利要求1的化合物為2-[[10-[2-氯代-4-[(5-氟代-2-甲基苯甲?；?氨基]苯甲?；?bnezol)]-10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-3-基]羰基]-1,1,1-三甲基碘化或其藥學上可接受的鹽、酯或前體藥物形式。
8．權利要求1的化合物為2-[[10-[2-氯代-4-[(5-氟代-2-甲基苯甲?；?氨基]苯甲?；鵠-10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-3-基]羥基亞甲基]-1,1,1-三甲基內(nèi)鹽或其藥學上可接受的鹽、酯或前體藥物形式。
9．權利要求1的化合物為N-[5-[3-三氯代甲基羰基-[5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-10(11H)-基]羰基]-2-氯代苯基]-2-苯基-苯甲酰胺或其藥學上可接受的鹽、酯或前體藥物形式。
10．權利要求1的化合物為10-{4-[(聯(lián)苯基-2-羰基)-氨基]-2-氯代-苯甲?；?-10,11-二氫-5H-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮雜-3-甲酸或其藥學上可接受的鹽、酯或前體藥物形式。
11．權利要求1的化合物為10-(4-[(聯(lián)苯基-2-羰基)-氨基]-2-氯代-苯甲?；?-10,11-二氫-5H-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮雜-3-甲酸-哌嗪-N-甲基酰胺或其藥學上可接受的鹽、酯或前體藥物形式。
12．權利要求1的化合物為10-{4-[(聯(lián)苯基-2-羰基)-氨基]-2-氯代-苯甲酰基}-10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-3-甲酸(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-酰胺或其藥學上可接受的鹽、酯或前體藥物形式。
13．權利要求1的化合物為聯(lián)苯基-2-羧酸{3-氯代-4-[3-(4-哌啶基-哌啶-1-羰基)-5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-10-羰基]-苯基}-酰胺或其藥學上可接受的鹽、酯或前體藥物形式。
14．權利要求1的化合物為聯(lián)苯基-2-羧酸{3-氯代-4-[3-(4-二甲基氨基-哌啶-1-羰基)-5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-10-羰基]-苯基}-酰胺或其藥學上可接受的鹽、酯或前體藥物形式。
15．權利要求1的化合物為聯(lián)苯基-2-羧酸{3-氯代-4-[3-(4-甲基-哌嗪-1-氨基羰基)-5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-10-羰基]-苯基}-酰胺或其藥學上可接受的鹽、酯或前體藥物形式。
16．權利要求1的化合物為10-{4-[(聯(lián)苯基-2-羰基)-氨基]-2-氯代-苯甲?；鶀-10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-3-甲酸(2-二甲基氨基-乙基)-酰胺或其藥學上可接受的鹽、酯或前體藥物形式。
17．權利要求1的化合物為聯(lián)苯基-2-羧酸{3-氯代-4-[3-(4-嗎啉代-哌啶-1-羰基)-5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-10-羰基]-苯基}-酰胺或其藥學上可接受的鹽、酯或前體藥物形式。
18．權利要求1的化合物為10-(4-[(聯(lián)苯基-2-羰基)-氨基]-2-甲氧基-苯甲酰基)-10,11-二氫-5H-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮雜-3-甲酸哌嗪-N-甲基酰胺或其藥學上可接受的鹽、酯或前體藥物形式。
19．權利要求1的化合物為10-(4-[(聯(lián)苯基-2-羰基)-氨基]-2-甲氧基-苯甲?；?-10,11-二氫-5H-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮雜-3-甲酸-1,1-二甲基酰肼或其藥學上可接受的鹽、酯或前體藥物形式。
20．權利要求1的化合物為10-{4-[(聯(lián)苯基-2-羰基)-氨基]-2-氯代-苯甲?；鶀-10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-3-甲酸(甘氨?；?-酰胺或其藥學上可接受的鹽、酯或前體藥物形式。
21．權利要求1的化合物為10-[2-氯代-4-(2-噻吩-2-基-苯甲酰氨基)-苯甲?；鵠-10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-3-甲酸-1,1-二甲基酰肼或其藥學上可接受的鹽、酯或前體藥物形式。
22．權利要求1的化合物為10-[2-氯代-4-(3-吡啶-2-基-苯甲酰氨基)-苯甲?；鵠-10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-3-甲酸-哌嗪-N-甲基酰胺或其藥學上可接受的鹽、酯或前體藥物形式。
23．權利要求1的化合物為10-[2-氯代-4-(4-吡啶-2-基-苯甲酰氨基)-苯甲?；鵠-10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-3-甲酸(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-酰胺或其藥學上可接受的鹽、酯或前體藥物形式。
24．權利要求1的化合物為10-[2-氯代-4-(2-吡啶-2-基-苯甲酰氨基)-苯甲?；鵠-10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-3-甲酸-哌嗪-N-甲基酰胺或其藥學上可接受的鹽、酯或前體藥物形式。
25．權利要求1的化合物為10-[2-溴代-4-(2-吡啶-2-基-苯甲酰氨基)-苯甲?；鵠-10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-3-甲酸-1,1-二甲基酰肼或其藥學上可接受的鹽、酯或前體藥物形式。
26．權利要求1的化合物為10-[2-氯代-4-(8-喹啉基(quinoloinylyl)氨基)-苯甲酰基]-10,11-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-3-甲酸-哌嗪-N-甲基酰胺或其藥學上可接受的鹽、酯或前體藥物形式。
27．權利要求1的化合物為2-苯基-環(huán)戊-1-烯甲酸[3-氯代-4-(3-甲酸(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-酰胺-5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-10-羰基)-苯基]-酰胺或其藥學上可接受的鹽、酯或前體藥物形式。
28．權利要求1的化合物為10-{4-[(聯(lián)苯基-2-羰基)-氨基]-2-氯代-苯甲酰基}-10,1 1-二氫-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮雜-3-甲酸(甘氨?；?-酰胺或其藥學上可接受的鹽、酯或前體藥物形式。
29．用于治療哺乳動物以過量腎水再吸收為特征的疾病的藥用組合物，該藥用組合物包含有效量的權利要求1的化合物或其藥學上可接受的鹽、酯或前體藥物以及適當?shù)乃幱幂d體。
30．權利要求29的藥用組合物，其中所述哺乳動物的以過量腎水再吸收為特征的疾病為充血性心力衰竭、腎病綜合征、低鈉血、冠狀血管痙攣、心肌缺血、腎血管痙攣、肝硬變、不適當?shù)目估蚣に胤置诰C合征、腦水腫、腦缺血或腦出血性休克。
31．治療哺乳動物的以過量腎水再吸收為特征的疾病的方法，該方法包括給予需要的哺乳動物有效量的權利要求1的化合物或其藥學上可接受的鹽、酯或前體藥物以及適當?shù)乃幱幂d體。
32．權利要求31的方法，其中所述哺乳動物的以過量腎水再吸收為特征的疾病為充血性心力衰竭、腎病綜合征、低鈉血、冠狀血管痙攣、心肌缺血、腎血管痙攣、肝硬變、不適當?shù)目估蚣に胤置诰C合征、腦水腫、腦缺血或腦出血性休克。
33．制備權利要求1所定義的式Ⅰ化合物的方法，該方法包括下列步驟之一a)使下式的化合物
(A)或
(B)其中R4、R5和R6與權利要求1定義相同，hal為鹵素，例如氯，與式HNZ1Z2的胺反應，其中-NZ1Z2可以為-NR1R3、NHOR1、-NH-(CH2)n-COOH、
或
其中n、X、R1、R2和R3與權利要求1定義相同，得到相應的式Ⅰ化合物，其中R與上述定義相同；或b)用堿水溶液處理下式的化合物
(A)其中R4、R5和R6與權利要求1定義相同，hal為鹵素，如氯，得到相應的式Ⅰ化合物，其中R為OH；或c)用下式的酸
或其活性衍生物，如酰鹵或酸酐，使下式的化合物?；?br> 其中R、R4和R5與權利要求1定義相同，但是R不為OH；R14為
或
其中R7和R8與權利要求1定義相同，得到相應的式Ⅰ化合物，其中R9與權利要求1定義相同。
全文摘要
本發(fā)明涉及三環(huán)非肽血管加壓素拮抗劑,它們可以用于治療需要降低血管加壓素水平的疾病,例如充血性心力衰竭,過量腎水再吸收疾病和血管阻力增加以及冠狀血管收縮增加的疾病,所述化合物具有通式(Ⅰ)結構。
文檔編號A61P13/12GK1234801SQ97199129
公開日1999年11月10日 申請日期1997年10月22日 優(yōu)先權日1996年11月1日
發(fā)明者E·J·特布斯基, A·J·莫利納里, J·F·伯格利, M·A·阿什韋爾, T·J·卡吉安努 申請人:美國家用產(chǎn)品公司