專利名稱：藥用的微膠囊化乳芽孢桿菌的制作方法
背景技術：
1.與有關申請的交叉參考本申請是1994年9月7日提交的08/301,996號申請的部分繼續(xù)申請，而后者是1993年12月3日提交的08/161,659號申請的部分繼續(xù)申請。
2.發(fā)明領域本發(fā)明涉及含有微膠囊化乳芽孢桿菌的口服、局部和陰道內(nèi)施用的膠囊、片劑、乳膏、泡沫、油膏、粉劑或栓劑等劑型的藥物組合物，該藥物組合物用于治療或預防與抗菌素有關的腹瀉、皮膚和陰道感染。
3.現(xiàn)有技術概述抗菌素有關的腹瀉是廣譜抗菌治療的常見副作用，并且據(jù)信是由于用抗菌素治療而導致的腸內(nèi)菌叢轉移引起的，尤其是由于腸內(nèi)菌叢中的乳芽孢桿菌減少所致。這種狀況可以威脅患者的生命，并且如果是由難辨梭狀芽孢桿菌感染所引起的，那么該疾病非常難以治療。
先前有人試圖通過口服乳芽孢桿菌來治療與抗菌素有關的腹瀉。但是，已經(jīng)得到證實，由于兩個主要的原因，該治療僅獲得了有限的成功。第一，按照現(xiàn)有技術口服施用的乳芽孢桿菌與胃酸接觸，受到胃酸的破壞。因此，僅有不足的少量活乳芽孢桿菌達到下部腸道，它們需要在那里重新建立健康的乳芽孢桿菌菌叢。第二，在患有與抗菌素有關腹瀉的患者中經(jīng)常發(fā)現(xiàn)短暫的不耐乳糖現(xiàn)象(本領域專業(yè)人員將這種不耐乳糖現(xiàn)象歸因為抗菌素引起的腸絨毛刷狀緣缺失)。此外，這種不耐乳糖現(xiàn)象甚至經(jīng)常發(fā)生在那些其他狀況正常的、沒有不耐日常產(chǎn)物或乳糖史的個體中?，F(xiàn)有技術的乳芽孢桿菌制劑通常含有微量或殘留量的乳芽孢桿菌生長基質，因此其中含有乳糖、乳果糖和其他二糖。這些物質一旦進入與抗菌素有關腹瀉患者的下部腸內(nèi)，則會使不耐乳糖現(xiàn)象惡化。如上所述，在現(xiàn)有技術中存在改進的余地。尤其是，在現(xiàn)有技術中存在著改進用于治療與抗菌素有關的腹瀉以及用于治療或預防某些皮膚和陰道感染的藥物組合物和方法的需要。本發(fā)明提供了這種改進方法。
發(fā)明概述本發(fā)明的一個方面是，給患有與抗菌素有關腹瀉的患者口服存在于藥物組合物或給藥載體中的每單位劑量大于約103個活的微膠囊化的乳芽孢桿菌。服用乳芽孢桿菌以治療或預防腹瀉，并且該治療優(yōu)選在接受抗菌素治療的過程中或短時之后連續(xù)進行。微膠囊化的乳芽孢桿菌還可以與甲硝噠唑或其他殺難辨梭狀芽孢桿菌的抗菌素聯(lián)合施用。雖然與胃酸接觸，但是有足夠量的微膠囊化的乳芽孢桿菌得以存活下來，同時通過胃部到達下部腸中，在那里它們有助于建立或重建健康的菌叢，并消除或緩解與抗菌素有關的腹瀉。
本發(fā)明的另一方面是含有微膠囊化乳芽孢桿菌的藥物組合物局部施用在皮膚上，以預防或治療皮膚感染，或者使用陰道乳膏、泡沫、油膏或栓劑來預防或治療陰道感染。
可以使用各種各樣給藥載體，例如明膠膠囊、片劑或液體劑型，以口服微膠囊化的乳芽孢桿菌。同樣地，可以使用各種各樣給藥載體，例如乳膏、泡沫、油膏、栓劑或與惰性粉劑(如淀粉或滑石粉)的混合物，以局部和/或在陰道內(nèi)使用微膠囊化的乳芽孢桿菌。
下面是對本發(fā)明的詳細描述，以及證明本發(fā)明作用的某些實驗和結果的總結。
發(fā)明詳述按照本發(fā)明，嗜酸乳芽孢桿菌、鼠李糖乳芽孢桿菌或其他乳芽孢桿菌如保加利亞乳芽孢桿菌、嗜熱乳芽孢桿菌等是微膠囊化的，并且經(jīng)口、局部或陰道施用，用于預防或治療下述疾病和病癥。在下文中乳芽孢桿菌的各個種共同稱作此名，除非描述了具體的種名時才使用其更確定的名稱。本發(fā)明發(fā)現(xiàn)，與用未微膠囊化的乳芽孢桿菌治療或試圖治療某些疾病進行比較，微膠囊化的乳芽孢桿菌在治療應用上具有很大的優(yōu)點。首先，微膠囊化顯著增加了細菌的架藏期。但是，更為重要的是，在經(jīng)口服、局部或陰道內(nèi)施用于人或其他哺乳動物體之后，膠囊的膜緩緩崩解并將乳芽孢桿菌逐漸釋放至其周圍環(huán)境中，即釋放到下部腸中、皮膚上或陰道內(nèi)。當微膠囊化的乳芽孢桿菌經(jīng)口服施用時，該微膠囊化對乳芽孢桿菌提供了防胃液的保護作用，并使得活乳芽孢桿菌到達下部腸中，在那里它們可以具有有益的治療作用。
由于可以使用幾種劑型將微膠囊化的乳芽孢桿菌釋放到其作用部位(口服至下部腸中，局部用于皮膚，或陰道內(nèi)給藥)，一般來說在每一單位劑型中必需含有至少約103個活乳芽孢桿菌，不管該單位劑型是明膠膠囊、乳膏、油膏、用于皮膚表面的粉劑或陰道栓劑。這就意味著一般來說在每克或每毫升本發(fā)明藥物組合物中含有至少103個活微膠囊化的乳芽孢桿菌。更優(yōu)選的是，乳芽孢桿菌在給藥載體或藥物組合物中的濃度是每克或每毫升藥物組合物中約103至1012個活菌，尤為優(yōu)選的是105至1012個活菌。在此值得注意的是每克或每毫升1012個乳芽孢桿菌基本上表示了可以以每克或每毫升物質中的濃度表示的最高乳芽孢桿菌數(shù)。本發(fā)明最優(yōu)選的局部或口服用乳芽孢桿菌的濃度是每毫升或每克組合物約106至107個活微膠囊化的乳芽孢桿菌。
在本發(fā)明優(yōu)選的具體實施方案中，優(yōu)選鼠李糖乳芽孢桿菌。盡管有些細菌學家認為鼠李糖乳芽孢桿菌是獨立的但與嗜酸乳芽孢桿菌有關的菌種，但是更嚴格地說，鼠李糖乳芽孢桿菌是嗜酸乳芽孢桿菌的簡單變種。正如本領域已知的，嗜酸乳芽孢桿菌和鼠李糖乳芽孢桿菌以及其他乳芽孢桿菌是“有益”菌，并形成健康的陰道內(nèi)菌叢，也是健康的下部腸菌叢中的一部分。這兩種菌已知產(chǎn)生某些殺菌素和過氧化氫，這些物質有助于抑制致病菌。在本發(fā)明中鼠李糖乳芽孢桿菌超出嗜酸變種的優(yōu)點是鼠李糖乳芽孢桿菌更豐富(約8至10倍)，并且能夠發(fā)酵更多的碳水化合物(與嗜酸變種之比為23∶12)，并且鼠李糖乳芽孢桿菌產(chǎn)生L+乳酸，而不是象嗜酸變種那樣產(chǎn)生乳酸的外消旋混合物。具有上述優(yōu)點是由于鼠李糖變種能夠發(fā)酵更多的碳水化合物使其成為更強健、易存活的細菌。產(chǎn)生L+乳酸是有利的，因為L+對映體具有殺真菌作用。
用于本發(fā)明優(yōu)選實施方案的嗜酸乳芽孢桿菌和鼠李糖乳芽孢桿菌變種都可以購買到，或者可以由實驗菌株獲得。用于下述優(yōu)選實施方案的鼠李糖乳芽孢桿菌變種是從加拿大魁北克省的Institute RosellMontreal得到的。按照本發(fā)明將乳芽孢桿菌變種微膠囊化，并配制成適于口服、局部或陰道使用的藥物組合物。幾種將這些細菌微膠囊化的方法描述如下。將這些菌微膠囊化的目的在于增加其架藏期，如果是口服，確保足夠量的活乳芽孢桿菌活著到達下部腸中，并且如果是局部或陰道內(nèi)給藥，使其緩慢和逐漸的釋放。按照本發(fā)明，選擇用于將這些細菌微膠囊化的物質或包衣材料，在腸或陰道環(huán)境中或者一旦用于皮膚(主要是由于潮濕)將破壞這些物質的膜的完整性，并且釋放出乳芽孢桿菌。
下面描述將這些細菌微膠囊化的幾種方法。
微膠囊化的方法將除去培養(yǎng)基后已經(jīng)凍干的活的、凍干乳芽孢桿菌微膠囊化。這些細菌可以購買到，或者可以由實驗菌株得到。在目前優(yōu)選的實施方案中，鼠李糖乳芽孢桿菌購自加拿大魁北克省的Institute Rosell Montreal。在營養(yǎng)培養(yǎng)基中使生物體生長至對數(shù)期。合適的培養(yǎng)基包括Thayer-Martin培養(yǎng)基、Trypticase Soy、腦-心灌注培養(yǎng)基，或者任何其他適用于培養(yǎng)這些生物體的濃縮培養(yǎng)基，對培養(yǎng)基沒有特別的限制。唯一重要的因素是這些微生物的成活力和數(shù)量，這些因素一般通過標準臨床實驗稀釋法測定，例如將定量稀釋的細菌涂布在血液瓊脂板或其他濃縮培養(yǎng)基上，在5-10％二氧化碳氣氛中、在37℃保溫24-48小時，然后對菌落計數(shù)。在0-4℃，以14,000×g的轉速離心，并在離心后用無菌的平衡鹽和5％葡萄糖溶液洗滌至少三次，除去營養(yǎng)培養(yǎng)基。用液氮將細菌“速凍”，然后在高真空下凍干。
膠囊化方法A在0-4℃，將如上所述新制得的、經(jīng)洗滌和凍干的細菌懸浮在10毫升5％葡萄糖鹽水溶液中，從而得到細菌的重懸浮液，其中在每毫升懸浮液中含有10-100億個生物體。除非另外指明，所有這些方法均在0-4℃進行，以保持乳芽孢桿菌的生活力，這些細菌在室溫會失去生活力。將細菌懸浮液快速而輕柔地攪拌，同時加入0.2-0.4毫升藻酸鈉溶液(1.5％重量/體積)。然后經(jīng)帶護套的14個計量針用氮氣流將上述混合物轉入4升圓底燒瓶中。該4升圓底燒瓶預先用5％白蛋白溶液洗滌，然后在65℃加熱至少10小時，并且在該方法中所用的針和管也做同樣處理。
之后在加壓下，用大注射器和氮氣流使上述混合物強行通過30個多斜面計量針。在30個計量針的針頭末端生成很小的液滴，該液滴被氮氣和空氣流干燥，在1.3-2％氯化鈣的水溶液中收集這些液滴，在那里它們形成凝膠。然后，將其用0.08-0.13％的2-(N-環(huán)己基氨基)乙磺酸(CHES)溶液和1.0-1.5％的氯化鈣溶液洗滌至少三次。
將膠凝的液滴或小球進一步用至少5倍過量的0.1％CHES和1.1％氯化鈣洗滌，并用生理鹽水溶液洗滌。將所得到的球在液氮中“速凍”，然后凍干。經(jīng)過這些步驟后，膠囊化的生物體可以用于本發(fā)明的制劑中。
膠囊化方法B作為膠囊化方法A的改進方法，進行以下步驟，以使細菌對陽離子抗菌劑更具有抗性。在0-4℃進行這些步驟。于是，在經(jīng)過了膠囊化方法A中所述的洗滌后，將所述物質與聚L-賴氨酸(Sigma)溶液(0.05％w/v)反應10分鐘。然后用生理鹽水(用乳酸緩沖至pH4.5)洗滌所得的球形反應物。將所得到的球形反應物在液氮中“速凍”，然后凍干。經(jīng)過這些步驟后，膠囊化的生物體可以用于本發(fā)明的制劑中。
膠囊化方法C在0-4℃，將新制得的、經(jīng)洗滌和凍干的細菌與羥丙基甲基纖維素混合，使細菌與羥丙基甲基纖維素的重量比為10/90，當然其比例范圍可以在1/99至99/1的范圍內(nèi)變化。這將影響最終的質量和膠囊化的生物體的生活力。應該理解較高比例的纖維素將會在膠囊化方法中“保護”細菌。用“盤”包衣法將凍干的細菌和羥丙基甲基纖維素的混合物膠囊化。該方法用不銹鋼圓底燒瓶進行，該燒瓶預先已經(jīng)用約1％的硬脂酸鎂的水懸浮液“涂布”。將可自由透過水的丙烯酸甲基丙烯酸酯共聚物與可部分透過水的丙烯酸甲基丙烯酸酯共聚物的混合物(分別是EUDRAGITRLTM和EUDRAGIT RSTM，從德國Rhom Pharm.Ltd.，購得)以5-10％的濃度懸浮在丙酮-異丙醇(1∶1，含有1％w/v蓖麻油)中。兩種共聚物的比例可以是1∶1至1∶10，優(yōu)選1∶2。將該懸浮液裝入不銹鋼圓底燒瓶中。由于共聚物的懸浮液迅速殺死細菌，所以該方法采用羥丙基甲基纖維素對細菌的高比例快速進行。因此，將少量細菌與纖維素的混合物加入不銹鋼燒瓶中，劇烈攪拌3-10分鐘，同時用氮氣流干燥其中的物質。
膠囊化方法D在0-4℃和輕柔的攪拌下，將新制得的、經(jīng)洗滌和凍干的細菌迅速加入稠的聚乙烯吡咯烷酮(購自德國BASF)懸浮液中，后者可以在用鹽平衡的5％葡萄糖溶液中(pH5.0，在4.5-8.0的范圍內(nèi))與1％二乙烯基苯(Biorad)交聯(lián)或不交聯(lián)2-12小時。然后將所得物質“速凍”并凍干。
膠囊化方法E在輕柔的攪拌下，將新制得的、經(jīng)洗滌和凍干的細菌迅速加入聚乙烯吡咯烷酮(CrospovidoneTM)懸浮液中。尤其是，在0-4℃下將10克凍干的細菌加至50毫克聚乙烯吡咯烷酮(CrospovidoneTM)懸浮液中。經(jīng)過30-60分鐘的攪拌發(fā)生膠囊化，當然可以攪拌更長的時間。然后用干燥器在真空下除濕，或者將所得物質“速凍”并凍干。
口服微膠囊化的乳芽孢桿菌給患有抗菌素引起的腹瀉或其他形式的急性或慢性腹瀉及其并發(fā)癥的患者口服微膠囊化的乳芽孢桿菌(按照目前優(yōu)選的實施方案微膠囊化的鼠李糖乳芽孢桿菌變種)。結果發(fā)現(xiàn)，按照本發(fā)明，用微膠囊化的乳芽孢桿菌進行的治療顯著減輕或消除了抗菌素引起的腹瀉癥狀。采用本發(fā)明的治療方法可以使其腹瀉副作用顯著減小或消除的抗菌素的實例包括氯林可霉素、氨芐青霉素或四環(huán)素。本領域專業(yè)人員將容易理解，給患者服用抗菌素是治療感染所必須的，并且用本發(fā)明的微膠囊化的乳芽孢桿菌伴隨抗菌素進行治療可以消除或減輕其副作用。如果是被難辨梭狀芽孢桿菌感染的患者，本發(fā)明還推薦用甲硝噠唑、萬古霉素或其他合適藥物進行治療，因為這些藥物能夠殺死難辨梭狀芽孢桿菌。
很多公知的通常適用于口服給藥的載體也可以用于本發(fā)明微膠囊化乳芽孢桿菌的口服給藥。一般來說，微膠囊乳芽孢桿菌對患有抗菌素引起的腹瀉或其他形式急性或慢性腹瀉的成年患者的口服計量約為每天4×103至4×1012個活菌，優(yōu)選每天以4個基本相等的劑量給藥。更優(yōu)選的是，每天約4次口服約105至1012個活的微膠囊化的乳芽孢桿菌?？梢詫⒖诜┝康娜檠挎邨U菌與藥用賦形劑混合，這些賦形劑是本領域眾所周知的，用于形成片劑、粉劑、口服液、滴劑，或者這些微膠囊化的細菌可以裝入膠囊中并以膠囊的形式例如明膠膠囊給藥。但是口服液和滴劑應該是新配制的，否則該液體將會破壞微膠囊膜，并使得細菌在與胃液接觸時對其成活力產(chǎn)生不利的影響。目前優(yōu)選的口服微膠囊化乳芽孢桿菌的方式是膠囊。因此，需要注意的是，用膠囊例如明膠膠囊作微膠囊化的乳芽孢桿菌容器被看作是本說明書“可藥用賦形劑”的意圖，因為它用于釋放口服的“活性成分”，即微膠囊化的乳芽孢桿菌。其他可藥用賦形劑是本領域已知的制備片劑或粉末的物質，例如淀粉、微晶纖維素、緩沖劑和矯味劑。在下面有關局部(皮膚)和陰道內(nèi)應用的給藥載體的敘述中描述了其他賦形劑。盡管不是優(yōu)選的實施方案，但是微膠囊化的乳芽孢桿菌也可以與抗菌素或其他給患者施用的藥物結合制成口服劑型。
通過下列臨床實驗證明口服微膠囊化的乳芽孢桿菌顯著減輕或消除抗菌素的腹瀉副作用的功效。
口服的臨床實驗為了進行該實驗，給5位有經(jīng)常發(fā)生抗菌素引起的腹瀉病史的患者口服膠囊化的乳芽孢桿菌以防止因抗菌素引起的腹瀉。在抗菌素治療開始時，每天4次口服微膠囊化的乳芽孢桿菌，并持續(xù)到停止抗菌素治療后3天。所有這些患者針對適當?shù)尼t(yī)療癥狀服用抗菌素，這與該項研究完全獨立。經(jīng)得患者口頭同意并詳細說明該研究的潛在危險和益處。用每一劑量106個膠囊化的乳芽孢桿菌(按照膠囊化方法B制備的)治療患者，其中含有口服安全的聚賴氨酸基質。所服用的制劑是裝有如上所述劑量膠囊化微生物的明膠膠囊(每粒膠囊約106個活菌)。
表1患有抗菌素引起的腹瀉患者的情況患者以往抗菌素引起的編號 性別 年齡 腹瀉持續(xù)的時間 抗菌素抗菌素的劑量1 女 29 6-7天氯林可霉素 300毫克q.i.d.2 女 33 4-5天氯林可霉素 300毫克q.i.d.3 女 42 4-5天氨芐青霉素 500毫克q.i.d.4 女 45 3-4天氨芐青霉素 500毫克q.i.d.5 男 40 4-5天四環(huán)素 500毫克q.i.d.
“q.i.d.”是每天4次用膠囊化乳芽孢桿菌口服治療的結果在所有這些患者中均未出現(xiàn)腹瀉或其他腸部變化或癥狀。在這組患者中，沒有因該治療引起任何形式的不適當?shù)淖饔?。在這組人群中取得的這一成功的治療結果僅僅可以歸因為用膠囊化的乳芽孢桿菌的口服治療?？诜景l(fā)明微膠囊化的乳芽孢桿菌不僅適用于治療人，也適用于治療其他哺乳動物。
局部施用微膠囊化的乳芽孢桿菌以預防皮膚感染的臨床實驗為了進行該實驗，給5位有經(jīng)常發(fā)生皮膚感染史的患者局部施用膠囊化的乳芽孢桿菌以防止皮膚感染。選擇這些患者是因為它們經(jīng)常易患慢性皮膚感染。經(jīng)得所有患者口頭同意并詳細說明該研究的潛在危險和益處。每天3次將局部微膠囊乳芽孢桿菌施用在被感染的皮膚上，持續(xù)6個月。每次施用的乳芽孢桿菌的量為含有106個膠囊化的生物體(按照膠囊化方法D制備的)。將膠囊化的生物體與滑石混合，得到均勻的粉末，并施用在使用部位。施用在皮膚上的制劑中的活菌濃度為每克約106個細菌，根據(jù)治療面積使用大約0.5-1克。
表2局部使用膠囊化乳芽孢桿菌以阻止皮膚感染患者 性別與 分離出的直編號 年齡易感因素 人種 感染部位菌1 31 組成代謝類固醇濫用 白種男性 腹股溝 T.r.，T.v.2 33 組成代謝類固醇濫用 黑種男性 腹股溝 T.r.，T.v.3 27 組成代謝類固醇濫用 白種男性 腹股溝 T.r.，T.m.4 59 病態(tài)肥胖，糖尿病白種女性 腹血管翳C.a.5 39糖尿病白種女性 腹血管翳C.a.
C.a.是白色假絲酵母，T.r.是深紅色發(fā)癬菌，T.v.是疣狀發(fā)癬菌，T.m.是須發(fā)癬菌。
局部施用膠囊化乳芽孢桿菌的結果在此研究中，在每天三次局部施用微膠囊化的乳芽孢桿菌的任何患者中，在整個研究期間，均未觀察到酵母感染。而且，在這些患者中沒有任何形式的不適當?shù)姆磻Ｒ虼藨摾斫?，局部施用本發(fā)明微膠囊化的乳芽孢桿菌不僅限于上述實驗中5位患者接受治療的皮膚部位。本發(fā)明的藥物組合物實際上適用于治療或預防人以及哺乳動物任何皮膚部位的感染。
陰道內(nèi)施用微膠囊化的乳芽孢桿菌以降低感染危險的臨床實驗正常的陰道菌叢必需含有適當?shù)娜檠挎邨U菌作為主要的菌種為當代醫(yī)學和科學思想所認同，并且在大量科學文獻中有所反映。另外，合乎需要的是，菌叢的乳芽孢桿菌能夠產(chǎn)生過氧化氫和殺菌素。為了證明局部陰道施用微膠囊化的乳芽孢桿菌可用于防止陰道感染，選擇有在一年中多于六次經(jīng)常發(fā)生陰道感染歷史并對陰道感染有易感因素的5位患者，用微膠囊化的乳芽孢桿菌進行局部陰道治療。經(jīng)得所有這些患者口頭同意并詳細說明該研究的潛在危險和益處。每天在晚上就寢時局部施用微膠囊化的乳芽孢桿菌，持續(xù)6個月。出于倫理道德方面的原因，該研究不設“安慰劑組”，而以患者以前的歷史作為“對照”。在該實驗中，所有這些患者在該研究開始之前一周于就寢時用克霉唑(商品名Mycelex-G500，每粒栓劑500毫克)進行治療。這一治療是必須的，因為所有這些患者都有被如下面表3中所示的真菌感染的癥狀，在此實驗開始之前必須將這些真菌根除。用每一劑量106個膠囊化的乳芽孢桿菌(按照膠囊化方法C制備的，其中含有纖維素基質)治療患者。膠囊化方法C的產(chǎn)物可以在模中制成固體或半固體的栓劑，以便于容易地插入陰道內(nèi)。在該栓劑中可以加入或不加入纖維素或乳糖或其他常規(guī)成分。
因此，需要注意的是，一般來說，對于局部應用和陰道內(nèi)應用，可以使用本領域已知的多種載體(制劑)。例如，可以將微膠囊化的乳芽孢桿菌與玉米淀粉、滑石或其他合適的粉末物質混合。可以制成乳膏、泡沫和油膏以及常規(guī)栓劑，其中除了活性成分微膠囊化的乳芽孢桿菌之外，可以使用填料例如微晶纖維素、羥丙基甲基纖維素、硬脂酸鎂、二氧化硅和乳糖。在栓劑、或乳膏、泡沫、油膏、粉末或本發(fā)明其他制劑中可以包括的其他可有可無的成分是香料、薄荷醇、桉葉油、水楊酸甲酯或其他用作局部冷卻劑的相關的水楊酸酯；用作抗炎劑的氫化可的松或相關抗炎類固醇(每粒栓劑1-500毫克)；用作潤濕劑和溫和殺菌劑的EDTA；作為潤濕劑和用于“使其具有結構特征”的丙二醇或其他可藥用二元醇、對羥基苯甲酸甲酯或有關的對羥基苯甲酸酯衍生物；用作殺精子劑和溫和殺菌劑的對二異丁基苯氧基聚乙氧基乙醇、壬苯聚醇-9或十二烷二醇月桂酸-酯；用作殺精子劑、溫和殺菌劑和潤濕劑的tritions和苯聚醇。
表3陰道內(nèi)使用膠囊化乳芽孢桿菌以阻止陰道感染治療前每 治療前分離 治療后分離出患者編號年陰道感 出的主要微 的主要微生物和年齡 易感因素染次數(shù)生物1糖尿病，肥胖 9C.a. L.a.，L.r.33歲2糖尿病，肥胖 10 C.a. L.a.，L.r.45歲3肥胖，細胞毒素治療 8C.g. L.a.，L.r.29歲4糖尿病，肥胖，細胞毒 11 C.a.，C.p. L.a.，L.r.41歲 素治療，自免疫疾病5糖尿病，肥胖，細胞毒 10 C.t. L.a.，L.r.37歲 素治療C.a.是白色假絲酵母，C.g.是團假絲酵母，C.t.是熱帶假絲酵母，C.p.是近平滑假絲酵母，L.a.是嗜酸乳芽孢桿菌，L.r.是鼠李糖乳芽孢桿菌。
陰道施用膠囊化乳芽孢桿菌的結果在就寢時使用局部、陰道內(nèi)施用的微膠囊化的乳芽孢桿菌的患者的研究中，整個研究期間，均未觀察到酵母感染。而且，在這些患者中沒有任何形式的不適當?shù)姆磻?，并且實驗結果表明，在治療后，陰道菌叢的主要生物體是嗜酸乳芽孢桿菌或鼠李糖乳芽孢桿菌。
權利要求
1.藥物組合物，該組合物在單位劑量中含有至少約103個活乳芽孢桿菌，所述乳芽孢桿菌是微膠囊化的，因此可以在組合物的貯存過程中保持存活，用作乳芽孢桿菌膠囊化包衣的物質在與水分或其他因素延長接觸時間時釋放出乳芽孢桿菌，以及可藥用的微膠囊化乳芽孢桿菌的給藥載體，所述給藥載體包括可藥用賦形劑。
2.權利要求1的藥物組合物，該組合物在單位劑量中含有至少約105個活嗜酸乳芽孢桿菌或其鼠李糖乳芽孢桿菌變種。
3.權利要求1的藥物組合物，其中所述細菌是鼠李糖乳芽孢桿菌變種。
4.權利要求1的藥物組合物，其中給藥載體是適于給人類患者口服微膠囊化乳芽孢桿菌的載體。
5.權利要求4的藥物組合物，其中給藥載體包括明膠膠囊。
6.權利要求5的藥物組合物，該組合物在一粒膠囊中含有至少約105個活嗜酸乳芽孢桿菌或其鼠李糖乳芽孢桿菌變種。
7.權利要求1的藥物組合物，其中給藥載體是適于對人類患者皮膚局部釋放微膠囊化乳芽孢桿菌的載體。
8.權利要求7的藥物組合物，其中每1克和1毫升該組合物含有至少約106個活嗜酸乳芽孢桿菌或其鼠李糖乳芽孢桿菌變種。
9.權利要求8的藥物組合物，其中可藥用賦形劑是粉劑。
10.權利要求1的藥物組合物，其中給藥載體是適于給人類患者陰道內(nèi)釋放微膠囊化乳芽孢桿菌的載體。
11.權利要求10的藥物組合物，包括陰道栓劑。
12.權利要求11的藥物組合物，其中每粒栓劑含有至少約106個活嗜酸乳芽孢桿菌或其鼠李糖乳芽孢桿菌變種。
13.適于給人類患者口服給藥的藥物組合物，該組合物在單位劑量中含有至少約103個活乳芽孢桿菌，所述乳芽孢桿菌是微膠囊化的，因此可以在組合物的貯存過程中保持存活，用作乳芽孢桿菌膠囊化包衣的物質在與水分延長接觸時間時釋放出乳芽孢桿菌。
14.權利要求13的藥物組合物，其中組合物的單位劑量是明膠膠囊。
15.權利要求14的藥物組合物，其中明膠膠囊含有至少約105個活嗜酸乳芽孢桿菌或其鼠李糖乳芽孢桿菌變種。
16.適于對人類患者的皮膚局部給藥的藥物組合物，該組合物在單位劑量中含有至少約103個活乳芽孢桿菌，所述乳芽孢桿菌是微膠囊化的，因此可以在組合物的貯存過程中保持存活，用作乳芽孢桿菌膠囊化包衣的物質在與水分延長接觸時間時釋放出乳芽孢桿菌。
17.權利要求16的藥物組合物，其中每1克和1毫升該組合物含有至少約106個活嗜酸乳芽孢桿菌或其鼠李糖乳芽孢桿菌變種。
18.適于給人類患者陰道內(nèi)給藥的藥物組合物，該組合物在單位劑量中含有至少約103個活乳芽孢桿菌，所述乳芽孢桿菌是微膠囊化的，因此可以在組合物的貯存過程中保持存活，用作乳芽孢桿菌膠囊化包衣的物質在與水分延長接觸時間時釋放出乳芽孢桿菌。
19.權利要求18的藥物組合物，為陰道栓劑。
20.權利要求19的藥物組合物，其中每粒栓劑含有至少約103個活嗜酸乳芽孢桿菌或其鼠李糖乳芽孢桿菌變種。
21.通過給哺乳動物、包括人口服藥物組合物治療或預防所述哺乳動物與抗菌素有關的腹瀉或其他急性或慢性腹瀉的方法，所述藥物組合物在單位劑量中含有至少約103個活乳芽孢桿菌，所述乳芽孢桿菌是微膠囊化的，因此可以在組合物的貯存過程中保持存活，用作乳芽孢桿菌膠囊化包衣的物質在經(jīng)哺乳動物攝入后主要在下部腸中釋放出乳芽孢桿菌。
22.權利要求21的方法，其中哺乳動物是人，并且其中每天給人服用至少約4×103個活嗜酸乳芽孢桿菌或其鼠李糖乳芽孢桿菌變種。
23.權利要求21的方法，其中以明膠膠囊的形式給人口服活微膠囊化的乳芽孢桿菌。
24.權利要求23的方法，其中每粒膠囊含有至少約105個微膠囊化的活嗜酸乳芽孢桿菌或其鼠李糖乳芽孢桿菌變種，并且其中每天給人服用約4粒膠囊。
25.通過在哺乳動物、包括人的經(jīng)常發(fā)生皮膚感染的皮膚上局部施用藥物組合物治療或預防所述哺乳動物皮膚感染的方法，所述藥物組合物在單位劑量中含有至少約103個活乳芽孢桿菌，所述乳芽孢桿菌是微膠囊化的，因此可以在組合物的貯存過程中保持存活，用作乳芽孢桿菌膠囊化包衣的物質在與水分延長接觸時間時釋放出乳芽孢桿菌。
26.權利要求25的方法，其中哺乳動物是人，并且其中單位劑量的所述組合物含有至少約105個活嗜酸乳芽孢桿菌或其鼠李糖乳芽孢桿菌變種。
27.權利要求27的方法，其中所述組合物包括粉劑。
28.通過給雌性哺乳動物、包括女性人類患者陰道內(nèi)施用藥物組合物治療或預防所述哺乳動物酵母感染的方法，所述藥物組合物在單位劑量中含有至少約103個活乳芽孢桿菌，所述乳芽孢桿菌是微膠囊化的，因此可以在組合物的貯存過程中保持存活，用作乳芽孢桿菌膠囊化包衣的物質在與陰道內(nèi)水分延長接觸時間時釋放出乳芽孢桿菌。
29.權利要求28的方法，其中藥物組合物是陰道栓劑，并且該栓劑含有至少約105個活嗜酸乳芽孢桿菌或其鼠李糖乳芽孢桿菌變種。
30.微膠囊化的乳芽孢桿菌，其中含有至少約103個活乳芽孢桿菌以及膠囊化包衣，用作乳芽孢桿菌膠囊化包衣的物質在與水分延長接觸時間時釋放出乳芽孢桿菌。
31.權利要求30的微膠囊化的乳芽孢桿菌，其中所述乳芽孢桿菌是嗜酸乳芽孢桿菌或其鼠李糖乳芽孢桿菌變種。
全文摘要
給哺乳動物、包括人口服微膠囊化的乳芽孢桿菌以治療或預防與抗菌素有關的腹瀉或其他急性或慢性腹瀉。在皮膚上局部施用微膠囊化的乳芽孢桿菌以治療或預防經(jīng)常發(fā)生的皮膚感染,以及陰道內(nèi)施用微膠囊化的乳芽孢桿菌以治療或預防陰道酵母感染。
文檔編號A61K9/02GK1192151SQ96194393
公開日1998年9月2日 申請日期1996年5月31日 優(yōu)先權日1995年6月2日
發(fā)明者拉里·C·福特 申請人:萊弗實驗有限公司