專利名稱：乳腺炎的治療方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及反芻動物乳腺炎的治療或預防。
乳腺炎即乳房發(fā)炎是一個難以解決的問題，對乳品工業(yè)來說尤其如此。乳腺炎是由于包括葡萄球菌屬、鏈球菌屬和其他種屬在內(nèi)的多種不同病原體中的任一病原體感染所致。但乳腺炎的治療卻有些困難。有一種可用的方法是“干母?！悲煼ǎ?，在母牛停止泌乳后的停奶期對母牛進行治療。對干母牛的治療來說唯一得到公認的途徑是經(jīng)乳頭向乳房內(nèi)注入抗生素。然而抗生素在乳房內(nèi)注入后在乳腺內(nèi)的擴散可能會受到限制。此外，這種治療途徑有引入致乳腺炎病原體的危險。曾考慮過全身性給藥，但這樣做的問題是能否使藥物在乳腺內(nèi)達到足以產(chǎn)生藥效的濃度。
本申請人現(xiàn)已意外地發(fā)現(xiàn)，使用美國專利4，820，695所述的化合物，能夠有效地治療乳腺炎。上述專利描述了某些大環(huán)內(nèi)酯類抗生素衍生物。其中有一種衍生物被美國沿用名組織(the United States Adopted Names organization)命名為“提米考新(tilmicosin)”。提米考新和美國專利4，820，695的其他化合物可用來治療乳腺炎。
因此，本發(fā)是明的一個方面提供了一種治療或預防乳腺炎的方法，該方法包括在不晚于妊娠雌性反芻動物分娩前25天，給予該動物式Ⅰ化合物或其酸加成鹽，其前提是如果該妊娠雌性反芻動物一直在泌乳，則在給藥后直到分娩前保持不再進一步泌乳;
其中R為下式的飽和或不飽和仲氨基
其中氮原子是另一個碳環(huán)體系的一部分，該碳環(huán)體系選自含有5-16個環(huán)原子的單環(huán)或含有8-20個環(huán)原子的二環(huán)或三環(huán)體系，或者這樣一種基團，該基團中有一個或多個碳原子被以下基團取代C1-C4烷基、C2-C4鏈烯基、C2-C4炔基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷氧羰基、羥基、C1-C4鏈烷酰氧基、鹵素、鹵-C1-C4烷基、-N(C1-C4烷基)2、-N(CH2)m、
(C1-C4烷基)2、
、氰基、亞乙二氧基、芐基、苯基、或被1-3個選自下列基團的取代基取代的苯基硝基、鹵素、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、羥基、氨基、或一或二(C1-C4烷基)氨基;
m是4-7的整數(shù);
R1是
R2是氫;C1-C5鏈烷?；驇в?-3個鹵素取代基的C1-C5鏈烷?；?苯甲酰基、苯乙酰基或苯丙?；?或帶有1-5個鹵素或甲基或1-2個甲氧基、硝基或羥基取代基的苯甲?；⒈揭阴；虮奖；?
R3是羥基;C1-C5鏈烷酰氧基;帶有1-3個鹵素取代基的C1-C5鏈烷酰氧基;苯甲酰氧基、苯乙酰氧基或苯氧乙酰氧基;或帶有1-5個鹵素或甲基或1-2個甲氧基、硝基或羥基取代基的苯甲酰氧基、苯乙酰氧基或苯氧乙酰氧基;或
本發(fā)明可用于任何反芻動物，但對牛特別有用。在本發(fā)明的一個實施方案中，在動物正在泌乳時給藥，但給藥后要把動物作為干母牛進行控制，使其一直到下一次分娩前不再進一步泌乳。在另一個實施方案中，在分娩前治療非泌乳動物如未產(chǎn)母牛。
式Ⅰ化合物皮下給藥。其用量并不嚴格，只要求該用量能有效控制與乳腺炎有關(guān)的具體病原體。一般來說，每千克體重用0.5-10毫克就能對乳腺炎達到所要求的控制效果;在許多情況下，適宜用量為每千克體重2-8毫克。有效用量可以分成多個劑量給予，但這樣做沒有什么優(yōu)越之處，所以優(yōu)選單次給藥。
式Ⅰ化合物最好經(jīng)過配制以便于給藥。獸醫(yī)配藥技術(shù)已經(jīng)很成熟。美國專利4，820，695提出了許多制劑。下面的實施例1提出了一種優(yōu)選制劑。
因此，本發(fā)明的第二方面提供式Ⅰ化合物或其酸加成鹽在制備用于治療或預防妊娠雌性反芻動物乳腺炎的皮下藥物中的應用，
m是4-7的整數(shù);
R1是
R2是氫;C1-C5鏈烷?；驇в?-3個鹵素取代基的C1-C5鏈烷酰基;苯甲?；?、苯乙?；虮奖；?或帶有1-5個鹵素或甲基或1-2個甲氧基、硝基或羥基取代基的苯甲?；⒈揭阴；虮奖；?
R3是羥基;C1-C5鏈烷酰氧基;帶有1-3個鹵素取代基的C1-C5鏈烷酰氧基;苯甲酰氧基、苯乙酰氧基或苯氧乙酰氧基;或帶有1-5個鹵素或甲基或1-2個甲氧基、硝基或羥基取代基的苯甲酰氧基、苯乙酰氧基或苯氧乙酰氧基;或
為使本發(fā)明在減少提米考新殘留濃度的同時達到最大收益，給藥時間參照預產(chǎn)期來選擇。應在不晚于分娩前25天時給藥，優(yōu)選在不晚于分娩前30天時給藥。這段時間既能保證對乳腺炎進行有效治療，又能保證動物在產(chǎn)犢時體內(nèi)的提米考新已消失。
用下列實施例來說明本發(fā)明。
實施例1制劑的制備取一定量的提米考新在水中打漿，加磷酸將pH調(diào)至6，并加入丙二醇。所得制劑的配方如下提米考新 300毫克/毫升丙二醇 250毫克/毫升該制劑適用于按本發(fā)明來治療乳腺炎。
實施例2制備致乳腺炎微生物的野外分離物，針對這些微生物對提米考新進行體外評定。已知其中的許多微生物對抗生素具有抗性。有三種金黃色葡萄球菌對氨芐青霉素和青霉素都有抗性，有幾種無乳葡萄球菌(Staphylococcus agalactiae)和乳房葡萄球菌(Staphylococcus uberis)對鏈霉素和三磺嘧啶有抗性。
對標準的培養(yǎng)液稀釋試驗對提米考新進行體外評定，結(jié)果如下。
表1乳腺炎病原體的體外易感性微生物 分離物數(shù)目 不同MIC(μg/ml)下的累積數(shù)0.195 0.39 0.78 1.56 3.12 6.25 ＞50金黃色葡萄球菌 (24) 0 2 14 24 - -無乳鏈球菌 (10) 0 3 8 10 - -停乳鏈球菌 (10) 5 7 10 - - -乳房鏈球菌 (10) - - - 2 5 10實施例3對青年母牛給予提米考新本實驗采用九頭青年母牛，它們經(jīng)配種后在兩個月內(nèi)按預產(chǎn)期產(chǎn)犢。將它們關(guān)在干燥的牛欄中，喂以未加藥的配種青年母牛飼料，并讓其隨時可飲淡水。每頭牛在背外胸部一次注射10毫克/千克的實施例1制劑。在分娩后首次泌乳時從每頭青年母牛體內(nèi)收集乳汁和血清樣品，然后在12、24、36、48、60、72、84、96、108、120、132、144、156和168小時后收集。用藤黃微球菌(ATCC 9341)作為試驗微生物進行微生物學測定，測定乳汁和血清樣品中的提米考新活性。在任何一個血清樣品中都沒有檢測到提米考新活性。乳汁提米考新活性和產(chǎn)犢間隔列在表2中。
表2產(chǎn)犢前34-60天一次皮下注射10毫克/千克提米考新后青年母牛中的乳汁提米考新活性(微克/毫升)
NA無活性NS無樣品1從處理到產(chǎn)犢的間隔(天)實施例4停乳時給予提米考新本實驗采用九頭處于泌乳晚期的荷斯坦乳牛作為研究對象。給乳牛喂以未加藥的乳用完全飼料，并讓其可隨時飲用淡水。停乳時，九頭乳牛都一次皮下注射5毫克/千克的實施例1制劑，以三頭乳牛為一組進行分組，令各組的停藥時間各為24、72和120小時。在每個停藥期中，從所有乳牛的每只乳房中采集乳汁樣品。然后處死乳牛，從所有乳牛采集每只乳房的乳房組織樣品。用HPLC測定法測定乳汁和乳房組織中的提米考新濃度。用對照乳汁和乳房組織制做標準曲線。乳汁和乳房組織各自的提米考新濃度分別列在表3表4中。每頭乳牛的四只乳房中乳汁和乳房組織中提米考新的濃度比較一致，只有少數(shù)例外。
還測定了上述三組中每一組的平均值。對于24、72和120小時的停藥期來說，乳汁中提米考新的平均濃度(微克/毫升)分別為4.30、2.16和1.85，而乳房組織中提米考新的平均濃度(微克/克)分別為3.57、3.34和5.97。處理后24、72和120小時時乳房組織與乳汁中提米考新平均濃度的比例為0.83、1.55和3.23，這表明在此期間提米考新在乳房組織中的濃度持續(xù)高于乳汁中的濃度。乳汁和乳房組織中提米考新的濃度均高于實施例2提出的抑制幾乎所有受試分離菌生長的濃度。
表3乳汁提米考新濃度(微克/毫升)停藥時間 取樣乳房動物編號 (小時) RF RR LF LR 平均值 標準差727 24 4.21 5.84 4.67 5.16 4.97 0.70400 24 4.90 3.77 3.86 4.58 4.28 0.55754 24 3.16 4.29 3.46 3.63 3.64 0.484.30 0.67407 72 2.07 2.27 1.74 1.87 1.99 0.23760 72 3.84 3.58 2.73 2.42 3.14 0.68390 72 1.34 1.21 1.41 1.48 1.36 0.122.16 0.90386 120 0.66 1.84 0.97 0.82 1.07 0.53789 120 2.46 2.66 2.46 2.50 2.52 0.10770 120 0.55 2.71 1.83 2.71 1.95 1.021.85 0.73
表4乳房組織提米考新濃度(微克/克)停藥時間 取樣乳房動物編號(小時) RF RR LF LR 平均值 標準差727 24 4.38 3.99 3.87 4.66 4.23 0.36400 24 2.58 2.69 4.12 3.61 3.25 0.74754 24 3.75 2.75 3.10 3.27 3.22 0.423.57 0.57407 72 3.55 2.90 3.71 1.99 3.04 0.78760 72 0.51 4.26 6.12 1.67 3.14 2.53390 72 4.80 3.26 3.68 3.68 3.85 0.663.34 0.44386 120 3.15 5.47 3.94 3.77 4.08 0.99789 120 10.50 6.50 11.20 5.79 8.50 2.75770 120 2.63 5.34 7.37 6.03 5.34 2.005.97 2.28實施例5對患乳腺炎的停乳期乳牛給予提米考新以正進入停乳期的若干乳牛來進一步評定本發(fā)明，這些乳牛被診斷為由于金黃色葡萄球菌感染而在一只或多只乳房中患有乳腺炎。將經(jīng)過診斷的動物分成不同的五組。一組動物不做處理，作為對照;另一組動物用常規(guī)療法治療，即乳頭注入Cefa-Dri 300毫克頭孢吡硫(Ayerst);其余三組按本發(fā)明進行治療，即皮下給予按實施例1制備的提米考新制劑，這樣給予提米考新的劑量在三組中各不相同，分別為2毫克/千克、4毫克/千克、或8毫克/千克。然后使所有動物都保持在典型的干母牛條件下直至分娩后，此時再評定所有動物由金黃色葡萄球菌所致的乳腺炎。結(jié)果如下
治療方法 感染乳房數(shù) 治愈乳房數(shù)無(對照) 1 0Cefa-Dri300毫克頭孢吡硫 5 3提米考新2毫克/千克 1 04毫克/千克 7 48毫克/千克 5 3這樣，在被金黃色葡萄球菌感染的總共13只乳房中，按本發(fā)明進行治療治愈了7只乳房。
權(quán)利要求
1.一種治療或預防乳腺炎的方法，該方法包括在不晚于妊娠雌性反芻動物分娩前25天，皮下給予該動物式Ⅰ化合物或其酸加成鹽，其前提是如果該妊娠雌性反芻動物一直在泌乳，則在給藥后直到分娩前保持不再進一步泌乳；
其中R為下式的飽和或不飽和仲氨基
其中氮原子是另一個碳環(huán)體系的一部分，該碳環(huán)體系選自含有5-16個環(huán)原子的單環(huán)或含有8-20個環(huán)原子的二環(huán)或三環(huán)體系，或者這樣一種基團，該基團中有一個或多個碳原子被以下基團取代C1-C4烷基、C2-C4鏈烯基、C2-C4炔基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷氧羰基、羥基、C1-C4鏈烷酰氧基、鹵素、鹵-C1-C4烷基、-N(C1-C4烷基)2、-N(CH2)m、
(C1-C4烷基)2、
、氰基、亞乙二氧基、芐基、苯基、或被1-3個選自下列基團的取代基取代的苯基硝基、鹵素、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、羥基、氨基、或一或二(C1-C4烷基)氨基；m是4-7的整數(shù)；R1是
R2是氫；C1-C5鏈烷?；驇в?-3個鹵素取代基的C1-C5鏈烷?；?；苯甲?；⒈揭阴；虮奖；?；或帶有1-5個鹵素或甲基或1-2個甲氧基、硝基或羥基取代基的苯甲?；?、苯乙?；虮奖；?；R3是羥基；C1-C5鏈烷酰氧基；帶有1-3個鹵素取代基的C1-C5鏈烷酰氧基；苯甲酰氧基、苯乙酰氧基或苯氧乙酰氧基；或帶有1-5個鹵素或甲基或1-2個甲氧基、硝基或羥基取代基的苯甲酰氧基、苯乙酰氧基或苯氧乙酰氧基；或
2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中妊娠雌性反芻動物一直在泌乳。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的方法，其中式Ⅰ化合物為提米考新。
4.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項的方法，其中式Ⅰ化合物作為一次治療給予。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至4中任一項的方法，其中反芻動物為乳牛。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中妊娠雌性反芻動物并未一直在泌乳。
7.根據(jù)權(quán)利要求6的方法，其中式Ⅰ化合物為提米考新。
8.根據(jù)權(quán)利要求6或7的方法，其中式Ⅰ化合物作為一次治療給予。
9.根據(jù)權(quán)利要求6或7的方法，其中反芻動物為青年母牛。
全文摘要
本發(fā)明涉及美國專利4,820,695中的提米考新和其他化合物在治療非泌乳反芻動物如乳牛的乳腺炎中的應用。
文檔編號A61K31/365GK1066269SQ9210313
公開日1992年11月18日 申請日期1992年4月30日 優(yōu)先權(quán)日1991年5月2日
發(fā)明者T·松岡, D·G·麥克拉里, E·E·奧澤, T·D·湯姆森 申請人:伊萊利利公司