專利名稱：具有消炎和免疫抑制活性的化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的化合物及其作為消炎和免疫抑制劑的用途。
細胞因子(例如IL-1β和α,TNFα和IL-6在發(fā)炎反應(yīng)的發(fā)生中的作用是已知的(Dinarello C.A.和Wolff S.M.,New Eng.J.Med.(新英格蘭醫(yī)學(xué)雜志)328(2):106113,1993；Tracey K.J.和Cerami A.,Crit.CareMed.21:S415,1993；Melli M.和Parente L.，炎癥中的細胞因子和脂皮質(zhì)蛋白及其區(qū)別，Wiley-liss.紐約1990；Dawson M.M.淋巴因子和白細胞介素.CRC出版，Boca Raton,FL 1991)。為了尋找稱作細胞因子抑制性消炎藥(SAID)的化合物已經(jīng)進行了大量的研究工作，這種化合物對促炎細胞因子的產(chǎn)生有一種抑制作用，特別是對IL-1β和TNFα(LeeJ.C.等人，自然372:739,1994；Davidsen S.K.和Summers J.B.,Exp.Opin.Ther.Patents.5(10):1087,1995)，最近公開了稱作非傳統(tǒng)的非甾類的消炎藥的廣譜性藥劑(Chiou G.C.Y.和Liu S.X.L.,Exp.Opin.Ther.Patents.6(1):41,1996)。
Tanaka等人，Chem.Pharm.Bull.(化學(xué)藥物公報),31(8),2810-2819(1983)報道了作為消炎活性成分的異羥肟基團的重要性它被說成具有如此重要的作用以至于使分子的其他部分顯得不太重要，其中的基團如甲氧基可以提高炎性的效力，而其他的基團，如乙酰氨基，可導(dǎo)致活性降低。
現(xiàn)在令人驚奇的發(fā)現(xiàn)，含有苯基酰氨部分的異羥肟酸衍生物，相對于前面報導(dǎo)的技術(shù)，具有顯著的消炎作用，以及免疫抑制活性。
因此本發(fā)明涉及分子式(Ⅰ)的化合物
其中R′為氫原子或(C1-4)烷基，A為金剛烷基或單-，雙-或三環(huán)殘基，其可選擇性地部分或全部為不飽和的，其可以包含一個或多個選自N,S或O的雜原子，且可選擇地被羥基，烷酰氧基，伯，仲或叔氨基，氨基(C1-4)烷基，單-或雙-(C1-4)烷基-氨基(C1-4)烷基，鹵原子，(C1-4)烷基，三(C1-4)烷基銨(C1-4)烷基取代；
為可選擇地含有雙鍵或NR′基團的1到5個碳原子的鏈，其中R′如上所定義；R為氫或苯基；X為氧原子或NR′基團，其中R′如上所定義或不存在；r和m獨立地為0,1或2；B為亞苯基或亞環(huán)己基環(huán)；Y為羥基或氨基(C1-4)烷基鏈，可選擇地被氧原子間隔；其條件為僅當(dāng)X不為O且同時Y不為羥基時作為A所定義的三環(huán)基團是芴基，除非所說的芴基是被三(C1-4)烷基銨(C1-4)烷基基團取代的。
根據(jù)下文所述，上面定義的烷基基團為，例如甲基，乙基，2-甲基乙基，1,3-丙基，1,4-丁基，2-乙基乙基，3-甲基丙基，1,5-戊基，2-乙基丙基，2-甲基丁基和類似的基團，而上面定義的單-，雙-或三環(huán)基團可以是苯基，環(huán)己基，吡啶基，哌啶基，嘧啶基，噠嗪基，萘基，茚基，蒽基，菲基，芴基，呋喃基，吡喃基，苯并呋喃基，苯并吡喃基，呫噸基，異噻唑基，異噁唑基，吩噻嗪基，吩噁嗪，嗎啡酚基，硫代苯基，苯并硫代苯基等等。鹵原子可以是氯，溴或氟。最后，烷酰氧基基團為，乙酰氧基，丙酰氧基，異丙酰氧基，丁酰氧基和類似的基團。
首先優(yōu)選的分子式(Ⅰ)的化合物為其中R＇為氫；A選自選擇性地如上取代的苯基，1-或2-萘基，環(huán)己基，1-或2-1,2,3,4-四氫化萘基，金剛烷基，喹啉基，異喹啉基，1-或2-茚基，四氫喹啉基，四氫異喹啉基；
為C1-5鏈，優(yōu)選C1-3，例如亞甲基，1,2-亞乙基，1，2-亞丙基或丙烯基基團；Y為OH且R，B，m和r如上所定義。
其次優(yōu)選的化合物為其中R′為氫；A為可選擇地取代的苯基或1-或2-萘基，更優(yōu)選地為1-或2-萘基；當(dāng)A為苯基時R為苯基，或當(dāng)A為1-或2-萘基時R為氫；R,B,m和r如上所定義；Y為OH，C1-3的亞烷基鏈如上面首先優(yōu)選的化合物所定義。
A代表的基團優(yōu)選地被(C1-4)-烷基氨基(C1-4)-烷基基團取代。
本發(fā)明進一步的目標(biāo)涉及分子式(Ⅰ)的化合物作為消炎和免疫抑制劑的用途，以及它們的包括藥物可接受的賦形劑的藥物組合物。
本發(fā)明的化合物可根據(jù)本領(lǐng)域已知的技術(shù)來制備。用于此制備方法的起始化合物是市售的化合物或者可根據(jù)文獻制備的化合物。存在X的分子式(Ⅰ)化合物是從分子式(Ⅱ)的化合物開始制備的
其中R和A如上所定義，X ′為氧原子或NR′基團，其中R′為上述定義的。此化合物與碳酸反應(yīng)性衍生物如二琥珀酰亞胺碳酸酯或羰基二咪唑(CDI)反應(yīng)，且在叔胺存在下，如三乙胺，或芳族的，如吡啶，在惰性溶劑如乙腈，四氫呋喃(THF)，二噁烷，氯化溶劑中，在室溫到溶劑回流溫度下反應(yīng)，并且反應(yīng)時間在1到48小時范圍內(nèi)。
得到的化合物(Ⅲ)
其中R,A和X′如上所定義，R1為咪唑基或羥基琥珀酰亞胺基團，與所需要的氨基酸在水和水-可混溶有機溶劑如四氫呋喃，乙腈或乙醇的混合物中反應(yīng)，且在無機堿存在下進行，如堿金屬氫氧化物，例如氫氧化鈉，堿或堿土金屬的碳酸鹽或碳酸氫鹽，例如碳酸鈉，在室溫下進行1到48小時。
得到分子式(Ⅳ)的酸
其中R,A,X′,B,m和r如上所定義，將其活化為?；鹊姆磻?yīng)是通過在氯化溶劑中或用亞硫酰氯作溶劑與亞硫酰氯作用，溫度范圍從室溫到溶劑回流溫度且進行1到12小時。
然后，在分子式(Ⅰ)的化合物中Y為所要求的羥基的情況下，酰基氯與鹽酸羥胺反應(yīng)，或在其它情況下與合適的亞烷基二胺反應(yīng)。此反應(yīng)發(fā)生在水和水-可混溶有機溶劑如四氫呋喃，乙腈的混合物中，且在上步所述的無機堿的存在下，在室溫下進行1到48小時，得到要求的化合物(Ⅰ)。
可供選擇的，酸(Ⅳ)和鹽酸羥胺或亞烷基二胺在存在縮合劑如CDI時進行反應(yīng)，且存在叔胺如三乙胺，在惰性溶劑如乙腈，四氫呋喃，二噁烷，氯化的溶劑中反應(yīng)，在室溫下進行1到24小時，最終產(chǎn)物按常用的色譜法或結(jié)晶法純化。
分子式(Ⅰ)的化合物中不存在X時，化合物從相應(yīng)的分子式(Ⅴ)的酸制備
其中R和A如上所定義，通過在氯化的溶劑中或用亞硫酰氯作溶劑時與亞硫酰氯作用活化為?；?，溫度在室溫到溶劑的回流溫度范圍內(nèi)變化，進行約1-12小時。?；扰c所需要的氨基酸在水和水-可混溶有機溶劑如THF或乙腈中反應(yīng)，在存在堿如堿金屬氫氧化物，如氫氧化鈉時，或堿金屬或堿土金屬碳酸鹽或碳酸氫鹽，如碳酸鈉存在時，在室溫進行1-72小時。
所得分子式(Ⅵ)的化合物
其中R,A,B,m和r如上所定義，可按照上面1所描述的步驟轉(zhuǎn)化為所要求的化合物(Ⅰ)。
下面，對一些本發(fā)明的代表化合物的制備實施例進行說明。如果沒有另外指明，在二甲亞砜(DMSO)中用1H-NMR譜與VARIAN GEMINI200分光計紀(jì)錄。
實施例14-(5-苯基戊酰氨基)苯基異羥肟酸A．向5-苯基戊酸(5g,28毫摩爾)的氯仿(100ml)溶液中加入亞硫酰氯(2.5ml,34毫摩爾)。反應(yīng)混合物回流4小時，然后蒸干。殘余物再次溶解在氯仿中且再次蒸干反復(fù)三次。所得的5-苯基戊烷酰氯再溶解在THF(50ml)中，所得溶液緩慢地加入4-氨甲基苯甲酸(3.8g,28毫摩爾)的1N氫氧化鈉(56ml)溶液中。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3小時，然后在低溫下蒸發(fā)THF同時水溶液用HCl酸化。將形成的沉淀物過濾，再次溶解在THF中，用無水氯化鈣干燥且蒸去溶劑得到6.7g的4-(5-苯基戊酰氨基)苯甲酸(產(chǎn)率81％)；m.p.=227-230℃。
1H-NMR d 12.5(s,1H，與D2O交換)，10.3(s,1H),7.92(d,2H),7.75(d,2H),7.25(m,5H),2.63(t,2H),2.41(t,2H),1.65(m,4H)。
B．向A中所得的化合物(6.7g,22毫摩爾)的氯仿(100ml)溶液加入亞硫酰氯(3.3ml,45毫摩爾)和3滴吡啶。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌5小時，然后蒸干。殘余物再次溶解在氯仿中且再次蒸干反復(fù)三次。所得的4-(5-苯基戊酰氨基)苯甲酰氯溶解在THF(50ml)中，所得溶液緩慢地加入鹽酸羥胺(1.9g,27毫摩爾)和碳酸氫鈉(1.9g,22毫摩爾)的1N氫氧化鈉(27ml,27毫摩爾)和THF(25ml)溶液中。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3小時，然后用1N HCl酸化并且在低溫下蒸發(fā)THF。用乙酸乙酯萃取水相，得到的有機相用無水硫酸鈉干燥后蒸去溶劑。所得的粗品用乙醚處理，過濾得到4.8g的標(biāo)題化合物。(產(chǎn)率69％)；m.p.=189-191℃。
1H-NMR d 11.12(s,1H),10.13(s,1H),8.97(s,1H),7.691(m,4H),7.33/7.13(m,5H),2.61(m,2H),2.38(m,2H),1.65/1.58(m,4H)。
實施例2
4-[2,2-(二苯基)乙氧基氨基甲?；谆鵠苯基異羥肟酸A.將2,2-二苯基乙醇(6g,30毫摩爾)，和CDI(4.9g,30毫摩爾)在THF(30ml)中的混合物，室溫下攪拌2小時，然后向其中加入4-氨甲基苯甲酸(4.6g,30毫摩爾)的1N氫氧化鈉(30ml)溶液。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3小時，然后用HCl酸化，低溫下蒸出THF，然后水溶液用乙酸乙酯萃取。有機相用無水硫酸鈉干燥后，蒸去溶劑。所得的粗品用熱正己烷處理并過濾得到10g的4-[2,2-(二苯基)乙氧基氨基甲?；?甲基]苯甲酸(產(chǎn)率90％)；m.p.=102-105℃。
1H-NMR d12.7(s,1H,與D2O交換),7.91(d,2H),7.78(t,1H),7.50-7.20(m,12H),4.61(d,2H),4.38(t,1H),4.23(d,2H)。
B．向在步驟A中所得的化合物(4.5g,12毫摩爾)的氯仿(50ml)溶液中，加入亞硫酰氯(1.3ml,18毫摩爾)和3滴吡啶。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3小時，然后蒸干。殘余物再次溶解在氯仿中且再次蒸干反復(fù)三次。所得的4-[2,2-(二苯基)乙氧基氨基甲?；谆鵠-苯甲酰氯溶解在THF(50ml)中，且將溶液緩慢地加入鹽酸羥胺(1.0g,14.4毫摩爾)和碳酸氫鈉(1g,12毫摩爾)的1N氫氧化鈉(14.4ml,14.4毫摩爾)和THF(20ml)溶液中。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3小時，然后用1N HCl酸化，低溫下蒸出THF.用熱乙酸乙酯萃取水相，合并的有機相用無水硫酸鈉干燥后蒸出溶劑。所得的粗品用硅膠色譜柱純化(洗脫劑∶二氯甲烷/甲醇15∶1)，將得到的產(chǎn)物用熱乙醚處理并過濾從而得到1.5g的標(biāo)題化合物.(產(chǎn)率32％)；m.p.=164-166℃。
1H-NMR d 11.12(s,1H),9.04(s,1H),7.74(t,1H),7.72(m,2H),7.38/7.20(m,12H),4.60(d,2H),4.38(t,1H),4.20(d,2H)。
實施例34-[2-(金剛烷-1-基)-乙氧基氨基甲酰基]苯基異羥肟酸A．2-(金剛烷-1-基)乙醇(2.1g,12毫摩爾)，羧酸二琥珀酰亞胺(3.3g,13毫摩爾)和吡啶(0.86ml,10毫摩爾)在乙腈(50ml)中的混合物，室溫下攪拌24小時，然后低溫下蒸出溶劑，殘余物溶解在二氯甲烷(100ml)中。溶液用水洗(50ml)，再用1N HCl(50ml)和水(50ml)洗。有機相用無水硫酸鈉干燥后，蒸去溶劑。將所得的3g(9毫摩爾)的2-(金剛烷基-1-基)乙基-琥珀酰亞胺碳酸酯粗品再次溶解在THF(30ml)中。所得溶液加入4-氨基苯甲酸(1.3g,9毫摩爾)和碳酸鈉(0.98g,9毫摩爾)的水(30ml)溶液中，然后在室溫下攪拌一夜并用HCl酸化，低溫下蒸出THF，然后水相用乙酸乙酯萃取。有機相用無水硫酸鈉干燥后，蒸去溶劑，所得的粗品用熱正己烷處理并過濾，得到3.2g的4-[2-(金剛烷基-1-基)乙氧基氨基甲酰基]苯甲酸(產(chǎn)率77％)；m.p.=197-200℃。
1H-NMR d 12.6(s,1H，與D2O交換)，10.0(s,1H),7.89(d,2H),7.60(d,2H),4.19(t,2H),1.93(m,5H),1.75/1.40(m,12H)。
B．在步驟A中所得的化合物(3g,8.7毫摩爾)的氯仿(50ml)溶液中，加入亞硫酰氯(1.2ml,17.4毫摩爾)和3滴吡啶。反應(yīng)混合物回流5小時，然后蒸干。殘余物再次溶解在氯仿中且再次蒸干反復(fù)三次。所得的4-[2-(金剛烷-1-基)乙氧基氨基甲?；鵠苯甲酰氯溶解在THF(50ml)中，且將溶液緩慢地加入鹽酸羥胺(0.7g,10.4毫摩爾)和碳酸氫鈉(0.7g,8.7毫摩爾)的1N氫氧化鈉(10.4ml,10.4毫摩爾)和THF(20ml)溶液中。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌8小時，然后用1N HCl酸化，低溫下蒸出THF。用乙酸乙酯萃取水相，合并的有機相用無水硫酸鈉干燥后蒸出溶劑。所得的粗品用熱乙醚處理并過濾，得到1.5g的標(biāo)題化合物。(產(chǎn)率48％)；m.p.=198-200℃。
1H-NMR d 11.08(s,1H),9.84(s,1H),8.94(s,1H),7.70(m,2H),7.53(m,2H),4.17(m,2H),1.94(m,3H),1.73/1.37(m,14H)。
實施例44-[(萘-1-基)甲氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸A．萘-1-基-甲醇(5g,31毫摩爾)為起始物，接下來的步驟如實施例3A描述的，得到7g純的4-[(萘-1-基)甲氧基氨基甲酰基]苯甲酸(產(chǎn)率81％)。
1H-NMR d 12.7(s,1H，與D2O交換)，10.2(s,1H),8.18(d,1H),7.97(m,4H),7.61(m,6H),5.69(s,2H)。
B．在步驟A中所得的化合物(6g,19毫摩爾)為起始物，接下來的步驟如實施例3B描述的，得到1.86g的標(biāo)題化合物(產(chǎn)率30％)；m.p.=192-194℃。
1H-NMR d 11.12(s,1H),10.06(s,1H),8.98(s,1H),8.14(m,1H),8.03/7.96(m,2H),7.76/7.50(m,8H),5.67(s,2H)。
實施例54-[(1,2,3,4-四氫化萘-2-基)甲氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸A．(1,2,3,4-四氫化萘-2-基)甲醇(4g,24毫摩爾)為起始物，接下來的步驟如實施例3A描述的，得到5.2g純的4-[(1,2,3,4-四氫化萘-2-基)甲氧基氨基甲?；鵠苯甲酸(產(chǎn)率67％)；m.p.=203-206℃。
1H-NMR d 12.6(s,1H，與D2O交換)，10.1(s,1H),7.92(d,2H),7.63(d,2H),7.1(m,4H),4.14(d,2H),2.88(m,3H),2.54(m,1H),2.25-1.90(m,2H),1.49(m,1H)。
B．在步驟A中所得的化合物(5.2g,16毫摩爾)為起始物，接下來的步驟如實施例3B描述的，得到4.1g的標(biāo)題化合物(產(chǎn)率75％)；m.p.=184-186℃。
1H-NMR d 11.10(s,1H),9.97(s,1H),8.96(s,1H),7.72(m,2H),7.54(m,2H),7.09(s,4H),4.11(d,2H),2.92/2.75(m,3H),2.61/2.47(m,1H),2.17/1.93(m,2H),1.56/1.35(m,1H)。
實施例64-[(3-苯基丙氧基)氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸A．3-苯基丙醇(5g,36毫摩爾)為起始物，接下來的步驟如實施例3A描述的，得到7.7g純的4-[(3-苯基丙氧基)氨基甲酰基]苯甲酸(產(chǎn)率71％)；m.p.=171-173℃。
1H-NMR d 12.6(s,1H，與D2O交換)，10.1(s,1H),7.90(d,2H),7.61(d,2H),7.28(m,5H),4.13(t,2H),2.72(t,2H),1.98(m,2H)。
B．在步驟A中所得的化合物(7g,23毫摩爾)為起始物，接下來的步驟如實施例3B描述的，得到5.8g的標(biāo)題化合物(產(chǎn)率80％)；m.p.=179-181℃。
1H-NMR d 11.09(s,1H),9.94(s,1H),8.95(s,1H),7.71(m,2H),7.54(m,2H),7.36/7.15(m,5H),4.10(t,2H),2.70(m,2H),1.95(m,2H)。
實施例74-[(萘-2-基)甲氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸A．萘-2-基-甲醇(5g,31毫摩爾)為起始物，接下來的步驟如實施例3A描述的，得到6.6g純的4-[(萘-2-基)甲氧基氨基甲?；鵠苯甲酸(產(chǎn)率68％)；m.p.=241-243℃。
1H-NMR d 12.7(s,1H，與D2O交換)，10.2(s,1H),7.95(m,6H),7.60(m,5H),5.39(s,2H)。
B．在步驟A中所得的化合物(6g,18.6毫摩爾)為起始物，接下來的步驟如實施例3B描述的，得到4.5g的標(biāo)題化合物(產(chǎn)率72％)；m.p.=220-222℃。
1H-NMR d 11.10(s,1H),11.01(s,1H),8.95(s,1H),7.99/7.90(m,4H),7.73(m,2H),7.61/7.50(m,5H),5.36(s,2H)。
實施例8(E)-4-[(3-苯基-丙-2-烯基)氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸A．將1.75g(13毫摩爾)的反式-肉桂醇在氬氣保護下溶解在130ml乙腈中，然后加入5g(19毫摩爾)N,N＇-二琥珀酰亞胺基-羧酸并加熱至完全溶解，然后將混合物冷卻至20℃并加入吡啶(0.65ml,1g,12毫摩爾)。反應(yīng)混合物用鋁覆蓋并且在室溫下攪拌30小時。低溫下蒸發(fā)溶劑，殘余物用乙酸乙酯處理并反復(fù)用0.1N HCl洗，最后用水洗。干燥溶液，然后低溫蒸干，粗品溶解在26ml二噁烷中，再加入到對-氨基苯甲酸(1.79g,13毫摩爾)的碳酸鈉1.38g(13毫摩爾)水溶液26ml中。然后在室溫下攪拌60小時，再加入THF和鹽水。分離有機相，用0.1N HCl洗(二次)再用鹽水洗，然后干燥并蒸去溶劑。所得的粗品用異丙基醚處理并過濾，得到0.7g的(E)-4-[(3-苯基-丙-2-烯基)-氨基甲?；鵠苯甲酸(產(chǎn)率18％)；m.p.=176-178℃。
1H-NMR d 12.70(s,1H，與D2O交換)，10.20(s,1H),7.93(d,2H),7.61(d,2H),7.55/7.25(m,5H),6.78(d,1H),6.46(dt,1H),4.87(d,2H)。
B．在步驟A中所得的化合物(0.7g,2.3毫摩爾)溶解在8ml無水THF中并且在0℃時加入CDI(0.46g,2.8毫摩爾)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢枰灰?，然后向其中加入鹽酸羥胺(0.2g,2.3毫摩爾)并且在室溫下連續(xù)攪拌60小時。過濾產(chǎn)生的沉淀并懸浮于1N HCl中，然后攪拌一夜。真空過濾干燥，得到400mg的標(biāo)題化合物(產(chǎn)率55.6％)；m.p.=194-195℃。
1H-NMR d 11.14(s,1H，與D2O交換)，10.07(s,1H),8.97(s,1H，與D2O交換)，7.75(d,2H),7.65/7.25(m,7H),6.79(d,1H),6.48(dt,1H),4.85(d,2H)。
實施例9(Z)-4-[(3-苯基-丙-2-烯基)氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸A．順式-肉桂醇(2.82g,20毫摩爾)為起始物，接下來的步驟如實施例8A中描述的，得到2.4g的(Z)-4-[(3-苯基-丙-2-烯基)-氨基甲?；鵠苯甲酸(產(chǎn)率40％)。
1H-NMR d 12.72(s,1H，與D2O交換)，10.20(s,1H),7.92(d,2H),7.60(d,2H),7.55/7.25(m,5H),6.73(d,1H),5.91(dt,1H),4.96(d,2H)。
B．以步驟A中所得的化合物(0.7g,2.3毫摩爾)為起始物，接下來的步驟如實施例8B中描述的，得到400mg的標(biāo)題化合物(產(chǎn)率55.6％)；m.p.=169-170℃。
1H-NMR d 11.13(s,1H，與D2O交換)，10.05(s,1H),8.98(s,1H，與D2O交換)，7.74(d,2H),7.55(d,2H),7.50/7.25(m,5H),6.77(d,1H),5.90(dt,1H),4.94(d,2H)。
實施例104-[3,3-(二苯基)丙氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸A．3,3-二苯基丙醇(3g,14毫摩爾)為起始物，接下來的步驟如實施例3A中描述的，得到4.2g的4-[3,3(二苯基)丙氧基氨基甲酰基]苯甲酸(產(chǎn)率80％)；m.p.=156-159℃。
1H-NMR d 12.6(s,1H，與D2O交換)，10.1(s,1H),7.90(d,2H),7.60(d,2H),7.40/7.15(m,10H),4.17(t,1H),4.03(t,2H),2.46(m,2H)。
B．以步驟A中所得的化合物(4.0g,10毫摩爾)為起始物，接下來的步驟如實施例3B中描述的，得到1g的標(biāo)題化合物(產(chǎn)率26％)；m.p.=196-197℃。
1H-NMR d 11.08(s,1H),9.93(s,1H),8.93(s,1H),7.70(m,2H),7.54(m,2H),7.39/7.15(m,10H),4.15(t,1H),3.99(t,2H),2.44(q,2H)。
實施例11N-[2-氨基乙基-4-乙(芴-9-基)甲氧基-氨基甲酰基甲基]苯胺·HClA．將9-芴基甲基氯甲酸酯(5g,19毫摩爾)的TNF(50ml)溶液緩慢地加入4-氨基甲基苯甲酸(2.9g,19毫摩爾)溶液中。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3小時，然后用1N HCl酸化，再在低溫下蒸去TNF。水相用乙酸乙酯萃取，合并的有機相用無水硫酸鈉干燥后將溶劑蒸除。得到的粗品用熱乙醚處理過濾，得到7g的4-[(芴-9-基)甲氧基-氨基甲?；谆鵠苯甲酸(產(chǎn)率98％)；m.p.=232-235℃。
1H-NMR d 12.7(s,1H，與D2O交換)，7.94(s,5H),7.77(d,2H),7.58/7.30(m,6H),4.42(d,2H),4.30(m,3H)。
B．向步驟A中所得的化合物(3.7g,10毫摩爾)的氯仿(100ml)溶液中加入亞硫酰氯(1.46ml,20毫摩爾)，再將反應(yīng)混合物回流2小時，然后蒸干。殘余物溶解在氯仿中并且再次蒸發(fā)反復(fù)三次。得到的4-[(芴-9-基)甲氧基-氨基甲?；谆鵠苯甲酰氯溶解在THF(30ml)中，再將溶液緩慢地加入2-(叔-丁氧基亞氨基)乙胺(1.6g,10毫摩爾)和碳酸氫鈉(0.8g,10毫摩爾)的水(20ml)和THF(30ml)溶液中。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌12小時，低溫下蒸去THF,水相用1N HCl酸化并且用乙酸乙酯萃取。有機相用無水硫酸鈉干燥后蒸去溶劑。所得的粗品用熱乙醚處理并過濾得到3.85g的N-(2-叔-丁氧基氨基甲?；谆?-4-(芴-9-基)甲氧基氨基甲?；谆鵠苯甲酰胺(產(chǎn)率75％)；m.p.=167-169℃。
1H-NMR d 8.45(t,1H),7.94/7.70(m,7H),7.54/7.25(m,6H),6.96(t,1H),4.42(d,2H),4.27(m,3H),3.32(q,2H),3.13(q,2H),1.41(s,9H)。
C．將步驟B的產(chǎn)物(3.6g,7毫摩爾)在0℃時分批加入三氟乙酸(25ml)中。混合物在室溫下攪拌4小時，然后蒸去酸并將殘余物用熱乙醚處理過濾后得到的產(chǎn)物溶解在THF和甲醇中，向其中加入HCl醚溶液。蒸去溶劑并重復(fù)此步驟4次。粗品在0℃下用水處理并過濾得到2g的標(biāo)題化合物(產(chǎn)率65％)；m.p.=182-184℃。
1H-NMR d 8.79(t,1H),8.17(s,3H),7.96/7.86(m,5H),7.72(m,2H),7.48/7.29(m,6H),4.38(m,2H),4.25(m,3H),3.55(q,2H),3.00(t,2H)。
實施例124-[6-(二乙基氨基甲基)萘-2-基甲氧基氨基甲酰基]苯基異羥肟酸氫氯化物A．將1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺氫氯化物(EDCI)(22.2g,115毫摩爾)加入2,6-萘基二羧酸(25g,115毫摩爾)和羥基苯并三唑(15.6g,1/5毫摩爾)的二甲基甲酰胺(1800ml)溶液中，并且在室溫下攪拌2小時，加入二乙胺(34.3ml,345毫摩爾)，溶液在室溫下攪拌一夜。減壓蒸餾除去溶劑后將粗品用1N HCl(500ml)和乙酸乙酯(500ml)處理，過濾未溶解的化合物分離有機相和水相。有機相用5％的碳酸鈉(3×200ml)萃取同時將合并得到的水溶液用濃HCl酸化并用乙酸乙酯(3×200ml)萃取。然后有機溶液用1N HCl(6×100ml)洗，用無水硫酸鈉干燥后減壓蒸去溶劑，產(chǎn)物為純的18.5g(產(chǎn)率60％)6-(二乙基氨基羰基)-2-萘基羧酸；m.p.=122-124℃。
1H-NMR d 8.67(s,1H),8.25-8.00(m,4H),7.56(d,1H),3.60-3.20(m,4H),1.30-1.00(m,6H)。
B．將6-(二乙基氨基羰基)-2-萘羧酸(18g,66毫摩爾)的THF(200ml)溶液緩慢地加入在THF(500ml)中回流的氫化鋁鋰懸浮液(7.5g,199毫摩爾)?；旌衔锘亓?小時，然后冷卻至室溫并用水(3.5ml)和THF(25ml)的混合物，20％的氫氧化鈉(8.5ml)，最后用水(33ml)處理。過濾出白色固體并減壓除去溶劑。粗品溶解在乙醚(200ml)中并且用1N HCl(3×100ml)萃取。水溶液用32％的氫氧化鈉處理并用乙醚(3×100ml)萃取。有機溶液用無水硫酸鈉干燥并減壓除去溶劑，產(chǎn)物12.7g(產(chǎn)率79％)，為純的粘稠的油狀物6-(二乙基氨基甲基)-2-萘基甲醇。
1H-NMR d 7.90-7.74(m,4H),7.49(m,2H),5.32(t,1H,與D2O交換),4.68(d,2H),3.69(s,2H),2.52(q,4H),1.01(t,6H)。
C．6-(二乙基氨基甲基)-2-萘基甲醇(12.5g,51毫摩爾)和N,N＇-二琥珀酰亞胺碳酸酯-(13.2g,51毫摩爾)的乙腈(250ml)溶液在室溫下攪拌3小時，然后除去溶劑并將粗品溶解在THF(110ml)中。將此溶液加入4-氨基苯甲酸(7.1g,51毫摩爾)和碳酸鈉(5.5g,51毫摩爾)的水(200ml)和THF(100ml)溶液中?；旌衔镌谑覝叵聰嚢枰灰?，然后減壓蒸去THF并將溶液用1NHCl(102ml,102毫摩爾)處理。過濾沉淀，減壓干燥，用乙醚處理三次過濾得產(chǎn)物為13.2g(產(chǎn)率64％)純的4-[6-(二乙基氨基甲基)萘-2-基甲氧基氨基甲?；鵠-苯甲酸；m.p.=201-205℃(分解)。
1H-NMR d 10.26(s,1H),8.13(s,1H),8.05-7.75(m,6H),7.63(m,3H),5.40(s,2H),4.32(s,2H),2.98(q,4H),1.24(t,6H)。
D．將4-[6-(二乙基氨基甲基)萘-2-基甲氧基氨基甲?；鵠苯甲酸(13.1g,32毫摩爾)和亞硫酰氯(7ml,96毫摩爾)的氯仿(100ml)溶液回流4小時，然后蒸出溶劑和亞硫酰氯。將粗品溶解在氯仿(100ml)中，蒸干反復(fù)三次。粗品作為固體加入鹽酸羥胺(2.7g,39毫摩爾)和碳酸氫鈉(5.4g,64mmol)和1N氫氧化鈉(39ml,39mmol)的水(150ml)和THF(50ml)溶液中。混合物在室溫下攪拌一夜，然后減壓蒸去THF，將水相用乙酸乙酯(3×100ml)萃取。得到的有機相用無水硫酸鈉干燥后減壓蒸去溶劑。粗品溶解在THF中并用1.5N HCl的醚溶液處理。過濾和干燥固體產(chǎn)物，得到6g純的白色固體4-[6-(二乙基氨基甲基)萘-2-基甲氧基氨基甲酰基]-苯基異羥肟酸氫氯化物；m.p.=162-165℃(分解)。
1H-NMR d 11.24(s,1H，與D2O交換)，10.88(s,1H，與D2O交換)，10.16(s,1H),8.98(bs,1H,與D2O交換),8.21(s,1H),8.10-7.97(m,3H),7.89(d,1H),7.80-7.55(m,5H),5.39(s,2H),4.48(d,2H),3.09(m,4H),1.30(t,6H)。
實施例13
4-[6-(二丙基氨基甲基)萘-2-基甲氧基氨基甲酰基]苯基異羥肟酸氫氯化物以2,6-萘二羧酸(5g)和二丙胺(9.6ml)開始反應(yīng)，接下來的步驟與實施例12相同，得到1g純的4-[6-(二丙基氨基甲基)萘-2-基甲氧基氨基甲酰基]苯基異羥肟酸氫氯化物的白色固體；m.p.=140-142℃(分解)。
1H-NMR d 11.15(s,1H，與D2O交換)，10.g5(s,1H,與D2O交換),10.16(s,1H),8.20(s,1H),8.10-7.97(m,3H),7.89(d,1H),7.80-7.55(m,5H),5.40(s,2H),4.50(d,2H),2.98(m,4H),1.79(m,4H),0.88(t,6H)。
實施例144-[6-(二丁基氨基甲基)萘-2-基甲氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸氫氯化物以2,6-萘二羧酸(5g)和二丁基胺(11.8ml)開始反應(yīng)，接下來的步驟與實施例12所述相同，得到1.2g純的4-[6-(二丁基氨基甲基)萘-2-基甲氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸氫氯化物的白色固體；m.p.=137-141℃(分解)。
1H-NMR d 11.19(s,1H，與D2O交換)，10.91(s,1H,與D2O交換)，10.16(s,1H),8.96(bs,1H,與D2O交換)，8.21(s,1H),8.10-7.98(m,3H),7.87(d,1H),7.80-7.55(m,5H),5.38(s,2H),4.52(d,2H),3.02(m,4H),1.77(m,4H),1.30(m,4H),1.77(m,4H),1.30(m,4H),0.89(t,6H)。
實施例154-[4-(二乙基氨基甲基)萘-1-基甲氧基氨基甲酰基]苯基異羥肟酸氫氯化物以1,4-萘二羧酸(5g)和二乙胺(7.3ml)開始反應(yīng)，接下來的步驟與實施例12所述相同，得到1.1g純的4-[4-(二乙基氨基甲基)萘-1-基甲氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸氫氯化物的白色固體；m.p.=162-165℃(分解)。
1H-NMR d 11.24(s,1H,與D2O交換),10.48(s,1H,與D2O交換),10.13(s,1H),8.43(m,1H),8.26(m,1H),8.04(d,1H),7.82-7.70(m,5H),7.58(d,2H),5.73(s,2H),4.84(d,2H),3.17(m,4H),1.32(t,6H)。
實施例164-[6-(二乙基氨基甲基)萘-2-基甲氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸氫氯化物A．6-(二乙基氨基羰基)-2-萘羧酸(按照實施例12A制備)(14g,52毫摩爾)和亞硫酰氯(3.8ml,52毫摩爾)的氯仿溶液(200ml)回流3小時，然后蒸去溶劑和亞硫酰氯。粗品溶解在氯仿(100ml)中并蒸干反復(fù)三次。粗品溶解在THF(50ml)中，在0℃時加入32％的氫氧化銨(10ml)的水(50ml)和THF(50ml)溶液中?；旌衔镌谑覝叵聰嚢枰灰?。然后減壓蒸出THF并過濾固體干燥得到11.6g(產(chǎn)率81％)的6-(二乙基氨基羰基)-2-萘酰胺。其沒有進一步純化將用于下一步。
B．將6-(二乙基氨基羰基)-2-萘羧酰胺(11.6g,42毫摩爾)的THF(100ml)溶液緩慢地加入在THF(100ml)中回流氫化鋁鋰的懸浮液(4.9g,128毫摩爾)中?；旌衔锘亓?小時，然后冷卻至室溫并用THF(16ml)和用水(2.2ml)的混合物，20％的氫氧化鈉(5.5ml)和用水(22ml)處理。過濾出白色固體并減壓除去溶劑。粗品用硅膠色譜柱純化(洗脫劑氯仿-甲醇-氫氧化銨15∶1∶0.1)得到8.1g(產(chǎn)率80％)純的6-(二乙基氨基甲基)-2-萘甲基胺的蠟狀固體。
1H-NMR d 7.78(m,4H),7.49(m,2H),3.89(s,2H),3.67(s,2H),2.50(q,4H),1.00(t,6H)。
C．6-(二乙基氨基甲基)-2-萘-甲基胺(6g,24毫摩爾)和N,N＇-二琥珀酰亞胺碳酸酯(6.3g,24毫摩爾)的乙腈(200ml)溶液在室溫下攪拌3小時，然后向溶液中加入4-氨基苯甲酸(3.4g,24毫摩爾)和碳酸鈉(2.6g,24毫摩爾)的水(100ml)和THF(100ml)的溶液?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?8小時，然后加入1N HCl(48ml,48毫摩爾)再減壓蒸去溶劑。粗品用硅膠色譜柱純化(洗脫劑氯仿-甲醇-氫氧化銨7∶3∶0.5)得到3.5g(產(chǎn)率36％)純的4-[6-(二乙基氨基甲基)萘-2-基甲基氨基氨基甲?；鵠苯甲酸；m.p.=179-183℃(分解)。
1H-NMR d 9.58(s,1H),7.95-7.78(m,6H),7.65-7.45(m,4H),7.29(t,1H),4.51(d,2H),3.81(s,2H),2.62(q,4H),1.07(t,6H)。
D．4-[6-(二乙基氨基甲基)萘-2-基-甲基氨基氨基甲?；鵠苯甲酸(3.1g,7.6毫摩爾)和亞硫酰氯(1.1ml,15.2毫摩爾)在二甲基甲酰胺(30ml)的溶液在室溫下攪拌一夜，然后用乙醚稀釋懸浮液并且過濾和干燥固體，得到3.2g4-[6-(二乙基氨基甲基)萘-2-基甲基氨基甲?；鵠苯甲酰氯粗品。將此固體化合物加入鹽酸羥胺(0.6g,8.5毫摩爾)和碳酸氫鈉(1.2g,14毫摩爾)和1N氫氧化鈉(8.5ml,8.5毫摩爾)的水(30ml)和THF(40ml)溶液中。混合物在室溫下攪拌2小時，然后將混合物用氯化鈉飽和并分離有機相，水相用THF萃取。合并的有機相用無水硫酸鈉干燥后減壓蒸去溶劑。粗品溶于熱的THF(150ml)中且過濾不溶的物質(zhì)。溶液冷卻至室溫并用1.5N HCl的醚溶液處理。過濾和干燥固體產(chǎn)物，得到純的4-[6-(二乙基氨基甲基)萘-2-基甲基氨基氨基甲?；鵠-苯基異羥肟酸氫氯化物白色固體1.2g(產(chǎn)率38％)；m.p.=167-168℃(分解)。
1H-NMR d 11.07(s,1H,與D2O交換)，10.49(bs,1H，與D2O交換)，9.49(s,1H),8.93(s,1H，與D2O交換)，8.15(s,1H),8.05-7.87(m,3H),7.81(d,1H),7.72(d,2H),7.65-7.50(m,3H),7.27(t,1H),4.54(d,2H),4.48(s,2H),3.11(m,4H),1.30(t,6H)。
實施例174-[N-異丙基-1,2,3,4-四氫(異喹啉-3-基)甲氧基氨基甲酰基甲基]苯基異羥肟酸氫氯化物A．1,2,3,4-四氫-3-異喹啉羧酸(9g,42毫摩爾)，2-溴戊烷(8ml,84毫摩爾)和1N NaOH(168毫摩爾)的乙醇(170ml)溶液回流5小時，然后加入2-溴戊烷(8ml,84毫摩爾)和1N NaOH(168ml,168毫摩爾)且將混合物回流5小時。除去乙醇并將水溶液用6N鹽酸處理至pH=7。過濾回收未反應(yīng)的起始原料再減壓蒸去溶劑。粗品溶解在乙醇中，濾去無機鹽類再減壓蒸出有機溶液，此步驟重復(fù)三次產(chǎn)出8.1g(產(chǎn)率87％)純的N-(異丙基-1,2,3,4-四氫-3-異喹啉羧酸，其未進一步純化而用于下一步。
1H-NMRδ7.13(m,4H),4.16(d,1H),3.89(d,1H),3.58(t,1H),3.43(m,1H),3.13(dd,1H),2.94(dd,1H),1.19(d,,3H),1.11(d,3H)。
B．將N-(異丙基-1,2,3,4-四氫-3-異喹啉羧酸(8.0g,36毫摩爾)的四氫呋喃(100ml)懸浮液緩慢地加入氫化鋁鋰(2.1g,54毫摩爾)在四氫呋喃(100ml)中的回流懸浮液中?；旌衔锘亓?小時，然后冷卻至室溫并用四氫呋喃(7ml)和水(0.9ml),20％氫氧化鈉(2.3ml)最后用水(9.2ml)處理。過濾去白色固體并減壓除去溶劑產(chǎn)出5.0g(產(chǎn)率68％)的純的粘稠油狀物N-異丙基-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-基甲醇。
1H-NMRδ7.12(m,4H),4.54(bs,1H，與D2O交換)，3.68(S,2H),3.55-3.35(m,2H),3.20-2.90(m,2H),2.79(d,2H),1.10(d,3H),1.01(d,3H)。
C．將N-異丙基-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-基甲醇(4.6g,22.4毫摩爾)和1,1＇-羰基二咪唑(3.63g,22.4毫摩爾)的四氫呋喃(50ml)溶液室溫下攪拌3小時。然后將此溶液加入4-氨基甲基苯甲酸(3.38g,22.4毫摩爾)和1N氫氧化鈉(22.4ml,22.4毫摩爾)的水(20ml)的溶液中。溶液在室溫下攪拌一夜，然后加入1N HCl(22.4ml,22.4毫摩爾)并將溶劑減壓除去。粗產(chǎn)品用硅膠色譜柱純化(洗脫劑氯仿-甲醇-氫氧化銨8∶2∶0.5)得到3.1g(產(chǎn)率35％)的純的4-[(N-異丙基-1,2,3,4-四氫-異喹啉-3-基)-甲氧基氨基甲?；鵠苯甲酸白色固體；m.p.=93-95℃(分解)。
1H-NMRδ7.92(d,2H),7.86(t,1H),7.36(t,2H),7.14(m,4H),4.26(d,2H),4.07(dd,1H),3.73(s,2H),3.68(dd,1H),3.25(m,1H),3.02(m,1H),2.89(dd,1H),2.72(dd,1H),1.10(d,3H),1.04(d,3H)。
D．4-[(N-異丙基-1,2,3,4-四氫-異喹啉-3-基)甲氧基氨基甲?；鵠苯甲酸(3.0g,7.8毫摩爾)和亞硫酰氯(1.7ml,23毫摩爾)的氯仿(100ml)溶液回流3小時，然后蒸出溶劑和亞硫酰氯。粗品溶解在氯仿(100ml)中并蒸干反復(fù)三次。將粗品溶于四氫呋喃(50ml)中且加入鹽酸羥胺(0.65g,9.4毫摩爾)和碳酸氫鈉(1.3g,15.7毫摩爾)和1N氫氧化鈉(9.4ml,9.4毫摩爾)的水(30ml)和四氫呋喃(20ml)溶液中?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?小時，然后減壓除去四氫呋喃并水相用乙酸乙酯萃取(3×100ml)。合并的有機相用無水硫酸鈉干燥后減壓蒸去溶劑。粗品溶解在四氫呋喃中并用1.5N HCl的醚溶液處理。過濾固體產(chǎn)物并干燥產(chǎn)出2.1g(產(chǎn)率62％)的純的4-[(N-異丙基-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-基)甲氧基氨基甲酰基]苯基異羥肟酸氫氯化物的白色固體；m.p.=154-157℃(分解)。
1H-NMRδ11.24(s,1H),10.75(s,1H),9.07(bs,1H),8.01(t,1H),7.70(d,2H),7.34(d,2H),7.32(m,4H),4.38(d,2H),4.26(m,4H),4.02(m,1H),3.78(m,1H),3.15(d,2H),1.42(d,3H),1.30(d,3H)。
下面的化合物可由上面報道的相似方法制備-4-[(4-二甲基氨基甲基-萘-2-基)甲氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸-4-[(4-二乙基氨基乙基-萘-2-基)甲氧基氨基甲酰基]苯基異羥肟酸-4-[(4-二甲基氨基乙基-萘-2-基)甲氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸-4-[(6-二甲基氨基甲基-萘-2-基)甲氧基氨基甲酰基]苯基異羥肟酸-4-[(6-二-異-丙基氨基甲基-萘-2-基)甲氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸-4-[(4-二甲基氨基甲基-萘-2-基)甲氧基氨基甲?；鵠甲基苯基異羥肟酸-4-[(4-二甲基氨基甲基-萘-2-基)乙氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸-4-[(5,6,7,8-四氫化萘-2-基)甲氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸-4-[N-(1,2,3,4-四氫化萘-2-基)甘氨酰胺基]苯基異羥肟酸-4-[(4-二乙基氨甲基-萘-2-基)乙氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸-4-[(6-二甲基氨甲基-萘-2-基)乙氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸-4-[(6-二乙基氨甲基-萘-2-基)乙氧基氨基甲酰基]苯基異羥肟酸-4-[(1,2,3,4-四氫化萘-2-基)甲氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸-4-[(4-二甲基氨基甲基-萘-1-基)甲氧基氨基甲酰基]苯基異羥肟酸-4-[(4-二甲基氨基乙基-萘-1-基)甲氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸-4-[(5-二甲基氨基甲基-萘-1-基)甲氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸-4-[(5-二乙基氨基甲基-萘-1-基)甲氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸-4-[(5-二-正-丙基氨基甲基-萘-1-基)甲氧基氨基甲酰基]苯基異羥肟酸-4-[(5-二-異-丙基氨基甲基-萘-1-基)甲氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸-4-[(5-二-正-丁基氨基甲基-萘-1-基)甲氧基氨基甲酰基]苯基異羥肟酸-4-[(6-二甲基氨基甲基-萘-1-基)甲氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸-4-[(6-二乙基氨基甲基-萘-1-基)甲氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸-4-[(6-二-正-丙基氨基甲基-萘-1-基)甲氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸-4-[(6-二-異-丙基氨基甲基-萘-1-基)甲氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸-4-[(6-二-正-丁基氨基甲基-萘-1-基)甲氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸-4-[(4-二甲基氨基甲基-萘-1-基)甲氧基氨基甲?；鵠甲基苯基異羥肟酸-4-[(4-二甲基氨基甲基-萘1-基)乙氧基氨基甲酰基]苯基異羥肟酸-4-[(4-二乙基氨基甲基-萘-1-基)乙氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸-4-[(5-二甲基氨基甲基-萘-1-基)乙氧基氨基甲酰基]苯基異羥肟酸-4-[(5-二乙基氨基甲基-萘-1-基)乙氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸-4-[(6-二甲基氨基甲基-萘-1-基)乙氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸-4-[(6-二乙基氨基甲基-萘-1-基)乙氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸-4-[N-(萘-1-基-甲基)甘氨酰胺基]苯基異羥肟酸-4-[N-(萘-2-基-甲基)甘氨酰胺基]苯基異羥肟酸-4-[N-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)甲氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸-4-[N-乙基-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基)甲氧基氨基甲酰基]苯基異羥肟酸-4-[(異喹啉-5-基)甲氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸-4-[N-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)甲氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸-4-[N-乙基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)甲氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸-4-[(異喹啉-6-基)甲氧基氨基甲酰基]苯基異羥肟酸-4-[N-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-1-基)甲氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸-4-[N-乙基-1,2,3,4-四氫異喹啉-1-基)甲氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸-4-[(異喹啉-1-基)甲氧基氨基甲酰基]苯基異羥肟酸-4-[N-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-基)甲氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸-4-[N-乙基-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-基)甲氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸-4-[(異喹啉-3-基)甲氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸-4-[(N-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-基)甲氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸-4-[(N-乙基-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-基)甲氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸-4-[(異喹啉-4-基)甲氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸-4-[3-(1,2,3,4-四氫異喹啉-2-基)丙酰氨基]苯基異羥肟酸-4-[(苯并噻吩-4-基)甲氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸-4-[(苯并噻吩-5-基)甲氧基氨基甲酰基]苯基異羥肟酸-4-[(苯并呋喃-4-基)甲氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸-4-[(苯并呋喃-5-基)甲氧基氨基甲酰基]苯基異羥肟酸-4-[4-(二乙基氨基丙基)萘-1-基甲氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸氫氯化物-4-[3-(二乙基氨基甲基)萘-1-基甲氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸氫氯化物-4-[3-(二乙基氨基乙基)萘-1-基甲氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸氫氯化物-4-[3-(二乙基氨基丙基)萘-1-基甲氧基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸氫氯化物-4-[4-(二乙基氨基丙基)萘-1-基甲基氨基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸氫氯化物-4-[3-(二乙基氨基甲基)萘-1-基甲基氨基氨基甲酰基]苯基異羥肟酸氫氯化物-4-[3-(二乙基氨基乙基)萘-1-基甲基氨基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸氫氯化物-4-[3-(二乙基氨基丙基)萘-1-基甲基氨基氨基甲酰基]苯基異羥肟酸氫氯化物-4-[6-(二丙基氨基甲基)萘-2-基甲基氨基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸氫氯化物-4-[6-(二丁基氨基甲基)萘-2-基甲基氨基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸氫氯化物-4-[4-(二乙基氨基甲基)萘-1-基甲基氨基氨基甲酰基]苯基異羥肟酸氫氯化物-4-[4-(二丙基氨基甲基)萘-1-基甲基氨基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸氫氯化物-4-[4-(二乙基氨基乙基)萘-1-基甲基氨基氨基甲?；鵠苯基異羥肟酸氫氯化物藥理學(xué)活性在體內(nèi)和體外測試了本發(fā)明化合物的消炎及免疫抑制性能。
1．體外細胞因子的產(chǎn)生試驗將本發(fā)明的化合物在特定的人IL-1β的產(chǎn)生中進行測試，單核細胞(PBMC)從健康的捐贈者的外周血液(血塊黃層)經(jīng)過密度梯度離心Ficoll-Hypaque(Biochrom KG，柏林，德國)得到。細胞(2.5×106/毫升)在37℃含5％二氧化碳的濕空氣最終體積為200微升的96孔板中培養(yǎng)。培養(yǎng)介質(zhì)為含低內(nèi)毒素的RPMI 1640 N-乙?；?L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(低內(nèi)毒素，Biochrom KG)并加入1％的牛胚胎血清(Hyclone實驗公司，Logan,猶他州)，100UI/毫升的青霉素及100微克/毫升的鏈霉素。通過用10ng/毫升的LPS(脂多糖)(得自大腸桿菌血清型055:B5(Sigma化學(xué)品公司，圣路易斯，密蘇里州))刺激細胞的方法引起細胞因子產(chǎn)生。細胞用溶于二甲基亞砜的本發(fā)明化合物(最終濃度0.05％)預(yù)處理60分鐘。在20小時的培養(yǎng)中存在化合物和脂多糖。并使用未被刺激的細胞進行陰性對照。在測試的最后，收集上層液并用特定的酶聯(lián)免疫吸附測定法(三明治型的抗原捕集，R & D System，Minneapolis,MN。所有實驗均一式二份，測定IL-1β的產(chǎn)生。用對人IL-1β特異的，親合純化的山羊多克隆血清覆蓋96孔的微量滴定板(Nunc)。洗滌后，孔在含3％的牛血清白蛋白(BSA)的緩沖鹽水中恒溫2小時。每次測試的標(biāo)準(zhǔn)曲線由重組的人IL-1β得到，上層樣品用PBS+0.1％ BSA稀釋到1/20及1/80。然后該板在4℃下恒溫一夜。經(jīng)過洗滌，加入第二種抗體-即抗人IL-1β的鼠的單克隆抗體。恒溫、洗滌后，加入山羊的抗鼠Ig-G多克隆抗體綴合的過氧化物酶(Zymed)及顯色劑二氯-N-四甲基聯(lián)苯胺。反應(yīng)被4N的硫酸終止，用自動的分光光度計(Perkin-Elmer)測量450納米處的吸收。本發(fā)明化合物的抑制活性用IC50(即與對照培養(yǎng)物相比抑制50％IL-1β產(chǎn)生的產(chǎn)品濃度)來表示。
表1化合物 IC50(nM)樣品1 305樣品2 163樣品3 531
樣品428樣品5137樣品643樣品712樣品829樣品972樣品10 101樣品11 96樣品12 166樣品13 382樣品14 14樣品15 10樣品16 21樣品17 5752．體內(nèi)LPS-誘導(dǎo)的TNFα的產(chǎn)生雄性的BALB/c鼠(18-20克)從Harlan-Nossan(Correzzana，意大利)得到。來自腸炎鏈球菌(S.enteritidis)(編碼L-6011)的脂多糖(LPS)從Sigma公司(圣路易斯，密蘇里州)得到。地塞米松(Soldesam)來源于Laboratorio Farmacologico Milanese(Caronno P.，意大利)。
老鼠用脂多糖(S.enteritidis,7.5毫克/千克)進行處理。在腹膜內(nèi)給藥LPS30分鐘以前，使用地塞米松，LPS給藥90分鐘前口服給予化合物。LPS給藥兩小時后，處死已麻醉的動物，對其心臟穿刺收集血液并使之凝固。根據(jù)制造商的指導(dǎo)，血清TNF由ELISA用“小鼠試劑盒”(Genzyme,Cambridge,MA)測量。用小鼠重組TNFα作為標(biāo)準(zhǔn)。
表2實施例12化合物對LPS誘導(dǎo)的血清TNFα的產(chǎn)生的影響處理 TNF(pg/ml) 抑制率(％)鹽水(對照) ＜0.1LPSLPS 1140
化合物12(0.5毫克/千克) 51455.0化合物12(5.0毫克/千克) 40764.3地塞米松(30毫克/千克) 11290.2結(jié)果表明被測試的化合物對抑制IL-1β和TNFα的產(chǎn)生都是有效的。達到或超過了地塞米松(一種對照化合物，非常著名的消炎劑)的活性。
此外，本發(fā)明涉及分子式(1)的化合物作為消炎和免疫抑制劑的用途以及所有與其相關(guān)的工業(yè)應(yīng)用，包括藥物組合物。這種藥物組合物可以是片劑、糖衣藥丸、乳膏、軟膏及針劑，后者適合于口服，肌肉注射或靜脈注射。它們可以只包括活性組分也可以與傳統(tǒng)的藥學(xué)中可接受的載體和賦形劑相混合。
根據(jù)治療的需要，取決于不同類型的化合物，每日一次或多次給藥，活性組分的劑量可以在比較寬的范圍內(nèi)變化。
權(quán)利要求
1．分子式(Ⅰ)的化合物
其中R＇為氫或(C1-4)烷基；A為金剛烷基或單-，雙-或三-環(huán)殘基，其可選擇性地部分或全部為不飽和的，其可以含有一個或多個選自N,S或O的雜原子，并且可選擇地被羥基，烷酰氧基，伯，仲或叔氨基，氨基(C1-4)烷基，單-或雙(C1-4)烷基-氨基(C1-4)烷基，鹵素，(C1-4)烷基，三(C1-4)烷基銨(C1-4)烷基取代；
為1到5個碳原子的鏈，其可選擇地含有雙鍵或NR＇基團，其中R＇如上所定義；R為氫或苯基；X為氧原子或NR′基團，其中R′如上所定義或不存在；r和m獨立地為0,1，或2；B為亞苯基或亞環(huán)己基環(huán)；Y為羥基或氨基(C1-4)烷基鏈，可選擇地被氧原子間隔；其條件為僅當(dāng)X不為O且同時Y不為羥基時作為A所定義的三環(huán)基團是芴基，除非所說的芴基是被三(C1-4)烷基銨(C1-4)烷基基團取代的。
2．權(quán)利要求1的化合物，其中R′為氫；A選自苯基，1-或2-萘基，環(huán)己基，1-或2-,1,2,3,4-四氫化萘基，金剛烷基，喹啉基，異喹啉基，1-或2-茚基，四氫喹啉基，四氫異喹啉基，它們可選擇地被如權(quán)利要求1的方式取代；
為C1-5的鏈；Y為羥基，R,B,m和r為權(quán)利要求1定義的。
3．權(quán)利要求1的化合物，其中R′為氫；A可選擇地為被取代的苯基或1-,2-萘基；當(dāng)A為苯基時，R為苯基，或當(dāng)A為1-或2-萘基時R為氫；R,B,m,r如權(quán)利要求1所定義的；Y為羥基且C1-5烷基鏈如權(quán)利要求2所定義。
4．權(quán)利要求1中的化合物用于制備適于作為消炎劑的藥物的用途。
5．權(quán)利要求1中的化合物用于制備適于作為免疫抑制劑的藥物的用途。
6．藥物組合物，其中包含至少一種權(quán)利要求1中的化合物作為活性組分及藥學(xué)上可接受的賦形劑。
全文摘要
具有消炎和免疫抑制活性的分子式(Ⅰ)的化合物,其中R′為氫原子或烷基,A為金剛烷基或可選擇地不飽和的單－,雙－或三環(huán)基團,一個雜環(huán)基團和/或可被羥基,烷酰氧基,氨基,氨基烷基,鹵原子,烷基,三烷基銨烷基取代的基團;(a)為含1到5個碳原子的鏈基,可選擇地含有雙鍵或NR′;R為氫或苯基;X為O或NR′或不存在;r和m獨立地為0,1或2;B為亞苯基或亞環(huán)己基;Y為羥基或氨基烷基,可選擇地被O間隔。
文檔編號A61K31/16GK1221403SQ97195410
公開日1999年6月30日 申請日期1997年5月12日 優(yōu)先權(quán)日1996年5月14日
發(fā)明者G·伯托里尼, M·比菲, F·萊奧尼, J·米茨哈伊, G·帕維赫, P·瑪斯卡格尼 申請人:伊塔爾法馬科聯(lián)合股份公司