專利名稱：一組由阿司匹林與雌激素組成的防治骨質(zhì)疏松癥的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用阿司匹林與雌激素組成的藥物組合物，該藥物組合物制備的復(fù)方制劑，對(duì)婦女絕經(jīng)期后骨質(zhì)疏松具有較好的預(yù)防及治療作用。
背景技術(shù)：
絕經(jīng)期后骨質(zhì)疏松屬原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥的其中一種。原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥是一種以低骨量和骨組織微結(jié)構(gòu)破壞為特征，導(dǎo)致骨骼脆性增加和易發(fā)生骨折的全身性疾病，可分為絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松和老年性骨質(zhì)疏松兩型。絕經(jīng)期后骨質(zhì)疏松是60歲以上婦女的常見(jiàn)病，多發(fā)病，主要是由于雌激素缺乏所致，常發(fā)生于絕經(jīng)后數(shù)年內(nèi)的女性，其中多數(shù)患者的骨轉(zhuǎn)換率增高，舊骨大量迅速丟失，新骨形成加快，骨的新舊轉(zhuǎn)換速率加速，但由于骨丟失超過(guò)了骨形成，骨量以丟失為主，形成了骨質(zhì)疏松，故該型的骨質(zhì)疏松也稱為高轉(zhuǎn)換型骨質(zhì)疏松。婦女在妊娠和哺乳期，對(duì)鈣磷的需要量較正常婦女增加一倍，如得不到合理的補(bǔ)充，就容易骨量減少或骨質(zhì)疏松，一般婦女到35歲時(shí)骨骼的質(zhì)量通常達(dá)到頂點(diǎn)，從這時(shí)起， 骨的重建過(guò)程仍繼續(xù)進(jìn)行，但質(zhì)量開(kāi)始減少。到圍絕經(jīng)期頭3 5年間最迅速，以后丟失速度逐漸減慢，但持續(xù)進(jìn)行，流行病學(xué)研究表明，50 69歲女性的骨質(zhì)疏松癥的發(fā)病率高于 50%，這段期間剛好是絕經(jīng)后的5 10年，婦女的雌激素水平明顯降低，這與骨質(zhì)疏松的發(fā)生率密切相關(guān)；80歲以上的老年婦女骨密度更低，有隨時(shí)發(fā)生骨折的危險(xiǎn)。老齡是骨折的重要危險(xiǎn)因子，85歲組發(fā)生前臂、肱骨、椎體和髖部骨折的可能性為45歲組婦女的8倍，在男性為5倍。絕經(jīng)期后老年婦女骨代謝的機(jī)制主要是由于骨髓基質(zhì)細(xì)胞向成骨細(xì)胞方向分化受抑，成骨細(xì)胞分裂增殖緩慢及骨形成因子合成代謝受阻，由破骨細(xì)胞介導(dǎo)的成骨過(guò)程受到抑制、成骨細(xì)胞活性衰退致骨形成期延長(zhǎng)，骨形成率降低；同時(shí)破骨細(xì)胞分化、成熟和骨吸收活性卻仍相對(duì)處活躍狀態(tài)，骨吸收能力超過(guò)了骨形成，骨轉(zhuǎn)換率增加但骨丟失也增加，所以導(dǎo)致骨質(zhì)疏松的發(fā)生。此外，隨著年齡的增加活性氧簇水平增加，抗氧化能力減低， 谷胱甘肽還原酶的水平下降，使成骨細(xì)胞及骨細(xì)胞的凋亡增加，加速了骨丟失，因此氧化應(yīng)激可能是老年性骨質(zhì)疏松發(fā)生的重要原因。自然絕經(jīng)或卵巢切除后絕經(jīng)均可導(dǎo)致骨量丟失，后者發(fā)展更快，小梁骨丟失更為明顯，說(shuō)明了雌激素與骨質(zhì)疏松癥有密切的關(guān)系，絕經(jīng)期由于卵巢功能衰退，雌激素分泌減少。雌激素具有抗骨吸收作用，是維持骨礦含量的關(guān)鍵激素，其機(jī)制主要與雌激素對(duì)骨生成的直接作用及對(duì)抗甲狀旁腺的骨吸收作用有關(guān)；目前認(rèn)為，雌激素抗骨吸收可能與其抑制成骨細(xì)胞凋亡和促進(jìn)破骨細(xì)胞凋亡的作用有關(guān)。雌激素減少一直被認(rèn)為是絕經(jīng)期后骨質(zhì)疏松癥發(fā)生的重要原因，雌激素能增強(qiáng)成骨型細(xì)胞的表達(dá)并減少誘導(dǎo)骨吸收的環(huán)磷酸腺苷形成，還能與特異的DNA結(jié)合，促進(jìn)特異mRNA合成。通過(guò)對(duì)絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥婦女應(yīng)用大劑量雌二醇治療進(jìn)行的臨床觀察，證明了較大劑量的雌激素可有效的增加骨密度，促進(jìn)骨的再礦化，有利于骨質(zhì)疏松癥的治療。雌激素影響骨代謝的作用機(jī)制主要是通過(guò)鈣調(diào)節(jié)激素(甲狀旁腺激素、1，25雙羥維生素D3、降鈣素)而實(shí)現(xiàn)的。采用放射配基分析等方法在人和大鼠的成骨細(xì)胞、人初級(jí)成骨細(xì)胞、兒童骨膜分離的破骨細(xì)胞上發(fā)現(xiàn)雌激素受體，提示雌激素可能直接作用于骨細(xì)胞上的雌激素直接作用于成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞，通過(guò)各種細(xì)胞因子(白細(xì)胞介素-6等)抑制破骨細(xì)胞骨吸收作用。絕經(jīng)后婦女血胰島素、IGF-I和瘦素水平與骨密度均無(wú)直接關(guān)系。雌激素替代療法是指給絕經(jīng)后婦女補(bǔ)充適量雌激素，以緩解雌激素缺乏造成的絕經(jīng)后癥狀的一種療法。雌激素與孕激素合用稱為激素替代療法，加用孕激素的目的是為防止子宮內(nèi)膜增生。雌激素替代療法和激素替代療法是目前已知療效最為確切的抗骨吸收療法。雌激素及雌激素類似物刺激成骨細(xì)胞的增殖和膠原合成，抑制成骨細(xì)胞分泌骨吸收刺激因子，從而降低骨轉(zhuǎn)換，抑制骨吸收。并可促進(jìn)活性維生素D3生成；降低破骨細(xì)胞對(duì)甲狀旁腺素的敏感性，減少骨吸收；促進(jìn)降鈣素的合成。研究結(jié)果表明雌激素可防止80% 90 %的絕經(jīng)后婦女的骨丟失，保持骨量，預(yù)防骨質(zhì)疏松。然而隨著應(yīng)用病例的增多，雌激素替代療法的副作用逐漸暴露，長(zhǎng)期單獨(dú)服用雌激素可使乳腺癌、子宮內(nèi)膜癌發(fā)生率增加5 至7倍，使腦卒中和心臟病的發(fā)病率提高了 40%和四％，并使下肢和肺部發(fā)生血管栓塞的概率增加了 1倍。阿司匹林是常用的解熱鎮(zhèn)痛藥，具有抗血小板和抗炎的雙重效應(yīng)，其通過(guò)抗血小板能顯著降低冠心病患者心血管事件發(fā)生率己得到大量大規(guī)模臨床試驗(yàn)的證實(shí)，本項(xiàng)目組近年的研究已證實(shí)該藥還有預(yù)防骨質(zhì)疏松的作用，并據(jù)此設(shè)計(jì)了小劑量阿司匹林和小劑量己烯雌酚組成復(fù)方制劑(簡(jiǎn)稱A-D合劑)，希望通過(guò)添加阿司匹林以減少雌激素的用量，在增加抗骨質(zhì)疏松的同時(shí)，也能減少雌激素的血栓形成等心血管意外。發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提出用具有抗血小板和抗炎的雙重效應(yīng)的阿司匹林與雌激素聯(lián)合應(yīng)用防治“骨質(zhì)疏松癥”研究的理論和思路，我們發(fā)現(xiàn)阿司匹林與雌激素組成的方制劑，可以減少雌激素的臨床用量，在抗骨質(zhì)疏松療效方面有協(xié)同作用，己烯雌酚與阿司匹林組方時(shí)，阿司匹林片用臨床預(yù)防心血管意外的劑量IOOmg即可，己烯雌酚可用臨床劑量的三分之一到十分之一的劑量即可，由于阿司匹林IOOmg劑量在臨床通過(guò)抗血小板能顯著降低冠心病患者心血管事件發(fā)生率己得到大量大規(guī)模臨床試驗(yàn)的證實(shí)，其減少雌激素替代療法導(dǎo)致的腦卒中，心臟病的發(fā)病率，下肢和肺部發(fā)生血管栓塞的概率必有明顯的作用，該復(fù)方與單用雌激素相比，還具有不抑制骨形成的優(yōu)點(diǎn)，是理想的抗骨質(zhì)疏松藥物。本發(fā)明提出用雌激素是指己烯雌酚，雌酮，戊酸雌二醇，尼爾雌醇，替勃龍，普瑞馬林等，這些藥物與阿司匹林組成復(fù)方制劑可用其臨床常用劑量的二分之一到十分之一，其最佳的劑量是三分之一到五分之一，阿司匹林組成該復(fù)方的劑量為50mg到200mg，其最佳配方是lOOmg。本發(fā)明提出阿司匹林與雌激素組成的防治骨質(zhì)疏松癥的藥物組合物，主要是指阿司匹林片和己烯雌酚組成的組合物，阿司匹林與己烯雌酚的組成比例為1000 1 2，即阿司匹林在該復(fù)合物中按重量計(jì)算為100毫克時(shí)，己烯雌酚在該復(fù)合物中按重量計(jì)算為 0. 1 0. 2毫克。這種藥物組合物可按藥劑學(xué)的工藝添加片劑生產(chǎn)的必要的輔料，壓制成片劑，供臨床應(yīng)用，也可按現(xiàn)代工藝制備成丸劑、顆粒劑、膠囊劑、注射劑和任何一種臨床可接受的藥物制劑，供臨床應(yīng)。本發(fā)明提出用阿司匹林與己烯雌酚組成的組合物，制備成片劑時(shí)，每片含阿司匹林100毫克，己烯雌酚0. 1 0. 2毫克。臨床應(yīng)用時(shí)每天1 2片。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例一為證實(shí)小劑量阿司匹林和小劑量己烯雌酚組成復(fù)方制劑(簡(jiǎn)稱A-D合劑)，具有抗骨質(zhì)疏松作用，本實(shí)驗(yàn)以大鼠去卵巢建立骨質(zhì)疏松模型，通過(guò)血液生化、骨形態(tài)計(jì)量學(xué)、骨密度等研究方法，觀察該復(fù)方制劑是否可對(duì)去卵巢大鼠骨質(zhì)疏松有增效作用并減少不良反應(yīng)，現(xiàn)報(bào)告如下1材料和方法1.1 材料1. 1. 1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組選用4月齡SPF級(jí)雌性SD大鼠42只(廣東醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供)，體重OM±20)g。適應(yīng)性喂養(yǎng)10d。于實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前隨機(jī)挑選出6只作為基礎(chǔ)組(BAS)，于實(shí)驗(yàn)前進(jìn)行取材。其余36只大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組(SHAM)，去卵巢組(OVX)、 己烯雌酚組(0VX+D)、阿司匹林己烯雌酚復(fù)方組(0VX+A-D)，每組9只。所有動(dòng)物自由攝水及攝食(標(biāo)準(zhǔn)飼料，含鈣1.33%，磷0. 95% )，在室溫25 ^°C，濕度75 80%清潔級(jí)環(huán)境中喂養(yǎng)。1. 1. 2藥物己烯雌酚片，合肥久聯(lián)制藥有限公司，每片0. 5mg ；阿司匹林己烯雌酚復(fù)方制劑(A-D合劑)每片含阿司匹林lOOmg，己烯雌酚0. Img0 (由廣東醫(yī)學(xué)院醫(yī)藥科技開(kāi)發(fā)中心配制)；鹽酸四環(huán)素，美國(guó)Sigma Chemical Co ;Calcein，美國(guó)Sigma Chemical Co。1.1. 3儀器美國(guó)Buehler LTD慢速鋸；德國(guó)Leica2155硬組織切片機(jī)；德國(guó) Leica碳化鎢鋼刀；日本Nikon自動(dòng)化圖像數(shù)字分析儀；美國(guó)OsteoMetrics骨組織形態(tài)計(jì)量學(xué)軟件；美國(guó) Norland 公司 p-DEXA Sabre scanner。1· 2 方法1. 2. 1動(dòng)物處理在動(dòng)物全身麻醉?xiàng)l件下，參照文獻(xiàn)方法[5]對(duì)各實(shí)驗(yàn)組大鼠作雙側(cè)去卵巢手術(shù)，假手術(shù)組做同樣手術(shù)，但不去除卵巢。術(shù)后三天開(kāi)始隨機(jī)分組，每組9只。正式實(shí)驗(yàn)假手術(shù)組以生理鹽水5ml · kg—1 · Cf1灌胃，己烯雌酚組以己烯雌酚30 μ g · kg—1 · Cf1 灌胃，A-D合劑按阿司匹林IOmg · kg-1 · Cf1和己烯雌酚IOyg. kg-1 · 1灌胃，各組大鼠均連續(xù)灌胃給藥90d。動(dòng)物每周稱重一次，按照體重變化調(diào)整給藥劑量。所有動(dòng)物在處死前14、 13天和4、3天分別皮下注射四環(huán)素30mg · kg—1 ·和鈣黃綠素IOmg · kg—1 ·進(jìn)行體內(nèi)熒光標(biāo)記。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，大鼠麻醉后心臟抽血處死，取血液做生化指標(biāo)測(cè)定，并取左脛骨做骨組織形態(tài)計(jì)量學(xué)研究，取左股骨做骨密度掃描。。1.2.3血液生化檢測(cè)血液生化指標(biāo)如總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白膽固醇 (HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)和堿性磷酸酶(ALP)均通過(guò)試劑盒進(jìn)行檢測(cè)，試劑盒均購(gòu)自南京建成生物工程研究所。上述所有操作均按照試劑盒說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行。1. 2. 2骨組織形態(tài)計(jì)量取左側(cè)脛骨，以慢速鋸暴露骨髓腔，取其上段以10%福爾馬林緩沖液固定Mh、隨后進(jìn)行梯度酒精脫水，二甲苯透明以甲基丙烯酸甲酯進(jìn)行不脫鈣骨包埋。包埋劑硬化后以石膏打磨機(jī)打磨成合適的形狀，隨后用Leica 2155型硬組織切片機(jī)切成9 μ m厚片和5 μ m薄片。9 μ m厚片直接封片測(cè)量動(dòng)態(tài)參數(shù)；5 μ m薄片行硝酸銀染色，封片后測(cè)量靜態(tài)參數(shù)，運(yùn)用公式te’7]計(jì)算有關(guān)參數(shù)。為避開(kāi)初級(jí)海綿體，脛骨上段測(cè)量范圍為生長(zhǎng)板遠(yuǎn)端Imm 4mm之間的松質(zhì)骨區(qū)域。靜態(tài)測(cè)量參數(shù)包括骨組織總面積(T. Ar)、骨小梁面積(Tb. Ar)、骨小梁周長(zhǎng)(Tb. Pm)、破骨細(xì)胞個(gè)數(shù)(N. Oc)、破骨細(xì)胞貼壁長(zhǎng)度(Oc.S)。動(dòng)態(tài)測(cè)量參數(shù)包括單熒光周長(zhǎng)(sL.Pm)、 雙熒光周長(zhǎng)(dL. Pm)、雙標(biāo)記間隙(Ir. L. Wi)。參照相關(guān)公式，可以計(jì)算出計(jì)算參數(shù)骨小梁面積百分?jǐn)?shù)(％Tb.Ar)降低、骨小梁厚度(Tb. Th)、骨小梁數(shù)目(Tb. N)、骨小梁分離度(Tb. Sp)、每毫米破骨細(xì)胞數(shù)目(0c. N)、破骨細(xì)胞周長(zhǎng)百分?jǐn)?shù)(％ Oc. Pm)、標(biāo)記周長(zhǎng)百分?jǐn)?shù)(％ L. Pm)、骨礦化形成率(MAR)、骨形成率(BFR/BV)、骨形成率(BFR/BS)、骨形成率(BFR/TV)。1. 2. 4骨密度檢測(cè)采用美國(guó)Norland公司p_DEXA Sabre掃描儀對(duì)左股骨整體進(jìn)行骨密度掃描，掃描參數(shù)包括骨組織面積(Bone Area)、骨礦含量(BMC)，骨密度BMD按照以下公式計(jì)算BMD = BMC/Bone Area。1. 3統(tǒng)計(jì)計(jì)量資料用均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差(S ± S )表示，采用SPSS16. 0軟件行ANOVA 方差分析并以LSD-t檢驗(yàn)進(jìn)行組間比較，P < 0. 05可認(rèn)為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2 結(jié)果2. 1己烯雌酚與A-D合劑對(duì)去卵巢大鼠體重和子宮重量變化的影響己烯雌酚與A-D合劑對(duì)去卵巢大鼠體重和子宮重量變化的影響見(jiàn)表1 表1 己烯雌酚與A-D合劑對(duì)去卵巢大鼠體重和子宮重量變化的影響(^±>0
權(quán)利要求
1.一組防治骨質(zhì)疏松癥的藥物組合物，其特征是阿司匹林與雌激素兩種藥物配伍，加上藥劑學(xué)方面的輔料，可制成供臨床應(yīng)用片劑，膠囊劑，顆粒劑，沖劑，口服液，外用制劑，注射劑。
2.如權(quán)利要求1所述的防治骨質(zhì)疏松癥的藥物組合物，其特征是雌激素是指己烯雌酚，雌酮，戊酸雌二醇，尼爾雌醇，替勃龍，普瑞馬林。
3.如權(quán)力要求2所述的防治骨質(zhì)疏松癥的藥物組合物，其特征是這些雌激素是以其臨床應(yīng)用劑量的二分之一到十分之一與阿司匹林組合。
4.如權(quán)利要求1所述的防治骨質(zhì)疏松癥的藥物組合物，其特征是該藥物組合物是由阿司匹林與己烯雌酚組成。
5.如權(quán)利要求1和4所述的防治骨質(zhì)疏松癥的藥物組合物，其特征是阿司匹林與己烯雌酚的組成比例為1000 2000 1，即阿司匹林在該復(fù)合物中按重量計(jì)算為100 200毫克時(shí)，己烯雌酚在該復(fù)合物中按重量計(jì)算為0. 1 0. 2毫克。
6.如權(quán)利要求1和4所述的防治骨質(zhì)疏松癥的藥物組合物，其特征是阿司匹林與己烯雌酚的組成比例為1000 1 2，即阿司匹林在該復(fù)合物中按重量計(jì)算為100毫克時(shí)，己烯雌酚在該復(fù)合物中按重量計(jì)算為0. 1 0. 2毫克。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種由阿司匹林與雌激素組成的用于預(yù)防及治療骨質(zhì)疏松的藥物組合物及其配方，設(shè)計(jì)了用具有抗血小板和抗炎的雙重效應(yīng)的阿司匹林與臨床劑量的三分之一到十分之一的劑量雌激素的藥物組合物，并證明了該組合物有明顯的抗骨質(zhì)疏松作用。由于阿司匹林100mg劑量在臨床通過(guò)抗血小板能顯著降低冠心病患者心血管事件發(fā)生率己得到臨床證實(shí)，其減少在骨質(zhì)疏松患者中應(yīng)用雌激素替代療法導(dǎo)致的腦卒中，心臟病的發(fā)病率，下肢和肺部發(fā)生血管栓塞的概率將有明顯的作用，該復(fù)方與單用雌激素相比，還具有不抑制骨形成的優(yōu)點(diǎn)，是理想的抗骨質(zhì)疏松的新藥物。
文檔編號(hào)A61P19/10GK102397550SQ20111026982
公開(kāi)日2012年4月4日 申請(qǐng)日期2011年8月30日 優(yōu)先權(quán)日2011年8月30日
發(fā)明者吳玲芝, 吳鐵, 崔燎, 林思恩, 黃健萍 申請(qǐng)人:廣東醫(yī)學(xué)院, 湛江廣醫(yī)醫(yī)藥科技開(kāi)發(fā)有限公司