專利名稱：：具有益氣健脾、安神定志作用的中藥膠囊及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明提供一種中藥口服膠囊制劑及其制備方法，每個制劑單位含甘草酸不得低于O.15mg。技術(shù)背景目前臨床應(yīng)用的健腦補(bǔ)腎中成藥的劑型主要以口服液或者傳統(tǒng)丸劑的形式來提供藥用。但是，多年的生產(chǎn)和臨床實踐證明，己有的健腦補(bǔ)腎口服液(健腦補(bǔ)腎口服液為中藥成方制劑第16冊收載)和傳統(tǒng)丸劑存在著很多顯而易見的缺陷?？诜嘿|(zhì)量不穩(wěn)定，例如極易發(fā)生沉淀和變色；為了調(diào)節(jié)口服需要加入大量的糖份，不但不方便糖尿病人服藥，大量糖份的加入又為儲存帶來麻煩，溫度過低會析出影響外觀，溫度過高會大大增加制劑染菌的幾率，所以又要加入大量的抑菌劑來控制微生物；口服液的生產(chǎn)、儲存、攜帶均不方便；使用期限短等等。而傳統(tǒng)丸劑的缺陷更是眾所周知，丸劑是我國中藥制劑的傳統(tǒng)劑型，其在胃腸道內(nèi)崩解緩慢，吸收遲緩；服用量大且味道不佳，通常很苦，使用很不方便；劑量無法準(zhǔn)確控制；生產(chǎn)不規(guī)范且流程長，生產(chǎn)過程中如果操作不當(dāng)易影響溶散，操作過程中微生物不容易控制，容易染菌，而通常為了增加丸劑的粘附里，改善口感，在制劑中需要加入大量的蜂蜜和糖份，這更加加大了染菌的可能性。在此僅以引用上述劑型的方式將現(xiàn)有技術(shù)的內(nèi)容全部合并于此。在眾多口服劑型之中，膠囊劑具有生物利用度高、密封性好、含量準(zhǔn)確、外形美觀、遮蔽不良?xì)馕兜忍攸c。眾所周知，健腦補(bǔ)腎提取物的理化特性使之很不容易制成膠囊劑，雖然有相關(guān)的專利技術(shù)中有相關(guān)的教導(dǎo)。但本發(fā)明人經(jīng)研究后發(fā)現(xiàn)，將其制成軟膠囊劑，劑型雖然改良了，但需要克服很多困難，例如現(xiàn)有技術(shù)的膠囊貯存期內(nèi)崩解變得不合格、吸潮和內(nèi)容物結(jié)塊等穩(wěn)定性問題。而且在實際使用中受環(huán)境影響大，經(jīng)常在有效期內(nèi)即失效或性狀不合格等等諸多問題。對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，這些問題是難于預(yù)料的。迄今為止，鑒于健腦補(bǔ)腎理化性質(zhì)的復(fù)雜性及其臨床應(yīng)用中出現(xiàn)的問題，也沒有人對包含健腦補(bǔ)腎的膠囊劑的有益效果提供科學(xué)的預(yù)測。因此，本領(lǐng)域迫切需要開發(fā)出新的健腦補(bǔ)腎口服藥物劑型，該制劑應(yīng)在有效改善產(chǎn)品穩(wěn)定性的同時，將其負(fù)面作用降低到最低限度。這種藥物劑型可提高了患者的治療依從性，而且必須是安全的。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種以人參、鹿茸、狗腎等25味中藥的提取物為原料的具有益氣健脾、安神定志作用的膠囊膠囊制劑，該制劑在能夠改善產(chǎn)品穩(wěn)定性的同時，將其負(fù)面作用降低到最低限度。本發(fā)明的目的還在于提供一種具有益氣健脾、安神定志作用的膠囊，該膠囊的每個制劑單位含甘草酸不得低于0.15mg。本發(fā)明的目的還在于提供一種具有益氣健脾、安神定志作用的膠囊的制備方法。為達(dá)到上述目的，本發(fā)明提供的技術(shù)方案如下-一種具有益氣健脾、安神定志作用的膠囊，包括以下重量配比的組分人參4565份、鹿茸718份、狗腎1824份、肉桂4565份、砂仁6585份、金牛草1530份、牛蒡子5240份、金櫻子1530份、杜仲5578份、川牛膝5578份、金銀花4055份、連翹3553份、蟬蛻3553份、山藥75100份、遠(yuǎn)志6585份、酸棗仁6585份、當(dāng)歸5578份g、龍骨5578份、牡蠣6585份、茯茶120180份、白術(shù)6585份、桂枝5578份、甘草4560份、白芍5578份、豆蔻5578份；其中，該膠囊經(jīng)由下述方法制得取人參、鹿茸、狗腎、肉桂、砂仁，用10%80%的乙醇回流提取，提取液過濾，得到乙醇提取液；金牛草、牛蒡子、金櫻子、杜仲、川牛膝、金銀花、連翹、蟬蛻、山藥、遠(yuǎn)志、酸棗仁、當(dāng)歸、龍骨、牡蠣、茯苓、白術(shù)、桂枝、甘草、白芍、豆蔻加水煎煮，煎液過濾，濾液濃縮，與上述乙醇提取液合并，得到合并液；在合并液中加乙醇使含醇量為60%80%，取上清液，回收乙醇，加水至3500份，攪勻，靜置，取上清液濾過，濾液濃縮成稠膏，干燥后粉碎，加輔料混勻，制粒，干燥，裝入膠囊，即得。上述的具有益氣健脾、安神定志作用的膠囊，其中，每個制劑單位含甘草酸不低于0.15mg0.6mg。在本發(fā)明的優(yōu)選實施例中，本發(fā)明提供的具有益氣健脾、安神定志作用的膠囊，其中優(yōu)選包括以下重量配比的組分人參55份、鹿茸13份、狗腎26份、肉桂55.5份、砂仁77份、金牛草22份、牛蒡子33.0份、金櫻子22.5份、杜仲66.5份、川牛膝66.5份、金銀花48.0份、連翹44.0份、蟬蛻44.0份、山藥88.0份、遠(yuǎn)志77.0份、酸棗仁77.5份、當(dāng)歸66.0份g、龍骨64.5份、牡頓77.5份、茯苓154.5份、白術(shù)77.5份、桂枝64.5份、甘草51.5份、白芍64.E份、豆蔻64.0份。在本發(fā)明的上述組合物制劑(膠囊)中，有些組分的中藥材需要經(jīng)過炮制，炮制的方法用簡稱列于藥材名稱后面用括號予以標(biāo)注，即，所述的"牛蒡子"為"牛蒡子(炒)"，為取干凈牛蒡子，置熱鍋中，用文火炒至略鼓起、微有香氣時，取出放涼，即得牛蒡子(炒)；所述的"杜仲"為"杜仲(炭)"，為取干凈杜仲，置熱鍋內(nèi)，用武火炒至表面焦黑色、內(nèi)部焦黃色時，噴淋清水少許，熄滅火星，取出，晾干，即得杜仲(炭)；所述的"遠(yuǎn)志"為"遠(yuǎn)志(甘草水制)"，為取甘草，加適量水煎湯，去渣，加入干凈遠(yuǎn)志，用文火煮至湯吸盡，取出，干燥，即得遠(yuǎn)志(甘草水制)；所述的"酸棗仁"為"酸棗仁(炒)"，為取干凈酸棗仁，置熱鍋中，用文火炒至略鼓起、色微變深時，取出放涼，即得酸棗仁(炒)；所述的"龍骨"為"龍骨(煅)"，為取干凈龍骨，砸成小塊，置無煙的爐火上或置適宜的容器內(nèi)，煅至紅透時，放涼，取出碾碎，即得龍骨(煅)；所述的"白術(shù)"為"白術(shù)(麩炒)"，為取麩，撤在熱鍋中，加熱至冒煙時，加入干凈的白術(shù)，迅速翻動，炒至藥材表面呈黃色或色變深時，取出，篩去麩皮，放涼，即得白術(shù)(麩炒)。綜上所述，在本發(fā)明的另一優(yōu)選實施例中，所述的具有益氣健脾、安神定志作用的膠囊，其中包括以下重量配比的組分人參55份、鹿茸13份、狗腎26份、肉桂55.5份、砂仁77份、金牛草22份、牛蒡子(炒)33.0份、金櫻子22.5份、杜仲(炭)66.5份、川牛膝66.5份、金銀花48.0份、連翹44.0份、蟬蛻44.0份、山藥88.0份、遠(yuǎn)志(甘草水制)77.0份、酸棗仁(炒)77.5份、當(dāng)歸66.0份g、龍骨(煅)64.5份、牡蠣77.5份、茯苓154.5份、白術(shù)(麩炒)77.5份、桂枝64.5份、甘草51.5份、白芍64.5份、豆蔻64.0份。本發(fā)明還提供了上述的具有益氣健脾、安神定志作用的膠囊的制備方法，其中，該方法包括取人參、鹿茸、狗腎、肉桂、砂仁，用10%80%的乙醇回流提取，提取液過濾，得到乙醇提取液；金牛草、牛蒡子、金櫻子、杜仲、川牛膝、金銀花、連翹、蟬蛻、山藥、遠(yuǎn)志、酸棗仁、當(dāng)歸、龍骨、牡蠣、茯苓、白術(shù)、桂枝、甘草、白芍、豆蔻加水煎煮，煎液過濾，濾液濃縮，與上述乙醇提取液合并，得到合并液；在合并液中加乙醇使含醇量為60%80%，取上清液，回收乙醇，加水至3500份，攪勻，靜置，取上清液濾過，濾液濃縮成稠膏，干燥后粉碎，加輔料混勻，制粒，干燥，裝入膠囊。在研制開發(fā)本發(fā)明的膠囊的過程中，發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，提取參數(shù)的確定十分重要，其關(guān)系著產(chǎn)品劑型(膠囊)是否合乎相關(guān)定性和定量以及膠囊的物化參數(shù)的要求。本發(fā)明對于提取工藝的參數(shù)的篩選實驗如下1、乙醇提取方法考察1.1、乙醇提取吸水率的考察稱取人參55g、鹿茸13g、狗腎26g、肉桂55.5g、砂仁77g,分別稱取2份，分別加10倍量的50%乙醇浸泡，同時觀察藥材潤透現(xiàn)象，結(jié)果1小時后藥材完全潤透；浸泡過夜(約15個小時)后，計算吸水倍數(shù)約為l倍。結(jié)果見表l。表l、乙醇提取工藝的藥材吸水率實驗結(jié)果實驗標(biāo)號稱取藥材重量(g)浸泡15小時后藥材重量(g)吸收率(％)1227476109.7%2227464104.4%上述2份實驗數(shù)據(jù)的平均值為107%，吸水率約為l倍。由于提取溶液含有大量的乙醇，且藥材均為根莖，不含草類，所以藥材吸水率不高1.2、最佳提取回流條件的確定提取條件對提取液的質(zhì)量影響至關(guān)重要，包括使用的溶劑、溶劑每次加入的量、每次對藥材的浸泡時間、提取次數(shù)、每次提取時間等等各方面的因素對制劑質(zhì)量和藥物效果都會產(chǎn)生意想不到的甚至是截然相反的效果。例如選擇水和乙醇提取出來的成分完全不同；不同的乙醇濃度不但影響提取液的質(zhì)量，也會大大方便生產(chǎn)，如果采用50%以上的乙醇，每個設(shè)備和車間都要單獨進(jìn)行防爆處理，大大增加生產(chǎn)成本和危險性。乙醇用量的多少對有效成份的提取有重大影響乙醇加少了，則有效成份提取的量就相對減少，這影響產(chǎn)品的質(zhì)量，并最終影響到產(chǎn)品的最終療效；而乙醇加多了，一方面造成生產(chǎn)成本的加大，另一方面得到的產(chǎn)品含有雜質(zhì)也多，導(dǎo)致最終產(chǎn)品的毒副作用加大，給患者造成無法估量的治療后果；再者，加入乙醇量過多使得最終得到的提取液量也多，不但延長了濃縮時間加大生產(chǎn)成本，而且長時間的濃縮加熱使藥液出于高溫狀態(tài)，不但會造成一些揮發(fā)性的有效治療成分的損失，而且對熱不穩(wěn)定的化學(xué)成分影響較大，最終直接影響制劑的質(zhì)量。9健腦補(bǔ)腎膠囊的乙醇提取物中含有大量可以測定的有效成分，例如人參中的人參皂苷，肉桂中的桂皮醛。在本發(fā)明的實驗研究中，經(jīng)過大量的富有創(chuàng)造性的實驗摸索和實驗條件的篩選，最終以醇提提取物中的桂皮醛的含量作為提取條件考察的指標(biāo)，一方面由于桂皮醛為揮發(fā)油性物質(zhì)，有特殊的肉桂芳?xì)馕叮且掖继崛〉挠行С煞?；另一方面桂皮醛在持續(xù)高溫狀態(tài)下會部分分解，這更有利于檢驗試驗選定的提取條件是否理想。桂皮醛測定方法色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八垸基或者辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-0.1%磷酸(48:52)為流動相；檢測波長為288nm。理論板數(shù)按桂皮醛峰計應(yīng)不低于2000。對照品溶液的制備精密稱取桂皮醛對照品適量置棕色容量瓶中，加甲醇制成每lml中含桂皮醛約10Pg的溶液。供試品溶液的制備精密稱取提取液約0.5g，置100ml量瓶中，加70%甲醇適量，超聲30分鐘，放冷，用70%甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各icmi，注入高效液相色譜儀測定，按照中國藥典2005版中規(guī)定的外標(biāo)方法進(jìn)行計算即得桂皮醛的含量。1.2.1、乙醇提取工藝的選擇稱取人參110g、鹿茸26g、狗腎52g、肉桂lllg、砂仁154g，分別稱取2份，分別加10倍量50%乙醇，一份直接加熱提取，另一份釆用回流提??；將獲得的提取液分別過濾后，然后分別測定桂皮醛的含量。結(jié)果見表2表2、乙醇提取工藝的選擇實驗標(biāo)號投料量fe)桂皮醛含量(mg)1455985.62455897.1結(jié)論回流提取可以保證揮發(fā)性成分桂皮醛的最大含量，所以選擇回流提取工藝。101.2.2、乙醇濃度的選擇考察稱取人參55g、鹿茸13g、狗腎26g、肉桂55.5g、砂仁77g，分別稱取6份，加入不同濃度的IO倍量的乙醇溶液，分別進(jìn)行回流提取實驗，將獲得的提取液分別過濾后，減壓濃縮、真空干燥，得浸膏粉，然后分別測定桂皮醛的含量。結(jié)果見表3。表3、乙醇濃度選擇實驗實驗標(biāo)號乙醇濃度(％)浸膏粉(g)桂皮醛含量(mg/g)175%87.66.09260%83.16.25350%76.26.46440%75.16.51530%69.66.11620%57.74.39結(jié)論從桂皮醛提取的絕對量來說，濃度為75%的乙醇所獲得的浸膏粉最多，但同時提取的雜質(zhì)也多，因此其桂皮醛的百分含量反而降低，結(jié)合兩部分?jǐn)?shù)據(jù)分析，乙醇濃度從50%到40%，桂皮醛含量幾乎無顯著差異，從節(jié)約生產(chǎn)成本考慮選擇40%濃度的乙醇。1.2.3、回流提取次數(shù)對提取液影響稱取人參55g、鹿茸13g、狗腎26g、肉桂55.5g、砂仁77g，分別稱取6份，加入10倍量40%乙醇溶液，分別進(jìn)行回流提取實驗，回流次數(shù)分別為l次、2次、3次，將獲得的提取液分別過濾后，然后測定桂皮醛的含量，結(jié)果見表4。表4、乙醇提取液回流次數(shù)選擇實驗實驗標(biāo)號回流提取次數(shù)桂皮醛含量(mg)11311.422491.233496.3結(jié)論回流提取2次和3次，桂皮醛含量幾乎無顯著差異，從節(jié)約生產(chǎn)成本11考慮選擇40%乙醇回流提取2次。1.2.4、提取回流時間的考察稱取人參55g、鹿茸13g、狗腎26g、肉桂55.5g、砂仁77g，分別稱取7份，加入10倍量40%的乙醇溶液，分別進(jìn)行回流提取2次，回流時間如下，將獲得的提取液分別過濾后，然后分別測定桂皮醛的含量。結(jié)果見表5。表5、提取回流時間考察實驗實驗標(biāo)號第一,細(xì)司(柳第二^M司(柳，桂皮醛含量(mg)131451.3232490.5333487.9421398.2522423.1611365.2712387.1結(jié)論回流提取第一次3小時和第二次2小時，桂皮醛的含量最好。1.2.5、加入乙醇的量對提取液的影響稱取人參55g、鹿茸13g、狗腎26g、肉桂55.5g、砂仁77g，分別稱取6份，每次加入不同倍量的40%的乙醇溶液，分別進(jìn)行回流提取2次，第一次3小時，第二次2小時，將獲得的提取液分別過濾后，減壓濃縮、真空干燥，得浸膏粉，然后分別測定桂皮醛的含量。結(jié)果見表6。表6、加入乙醇量的考察實驗實驗標(biāo)號第一次加入40%乙醇量第二次加入40%乙醇量浸膏粉(g)桂皮醛含量(mg/g)1101076.56.4628875.86.4436670.46.8544453.14.8858671.96.7866467.86.6312結(jié)論加4倍量乙醇，由于提取溶劑少，因此所得提取液中桂皮醛的量也低。而加10和8倍量的乙醇，第一，由于提取溶劑量的增加，雜質(zhì)量也提取的多，因此提取液的量也多，所以桂皮醛含量相對減少；另一方面，由于提取溶劑量的增加，延長了濃縮時間，桂皮醛在持續(xù)高溫下，也有些分解。以上實驗結(jié)果表明，本品醇提取的最佳工藝為取處方量人參、鹿茸、狗腎、肉桂、砂仁，用40%乙醇回流提取二次，每次加6倍量，第一次3小時，第二次2小時。2、水提取方法考察2.1、水提取吸水率的考察按1/3處方量稱取金牛草、牛蒡子(炒)、金櫻子、杜仲(炭)、川牛膝、金銀花、連翹、蟬蛻、山藥等二十味藥材，分別稱取2份，加水5kg浸泡,同時觀察藥材潤透現(xiàn)象，結(jié)果2小時后藥材完全潤透，浸泡過夜后，計算吸水倍數(shù)約為2倍。結(jié)果見表7。表7、水提取工藝的藥材吸水率實驗結(jié)果實驗標(biāo)號稱取藥材重量(g)浸泡13小時后藥材重量(g)吸收率(％)14251263197.2%24251307207.5%上述2份實驗數(shù)據(jù)的平均值為202.35%，吸水率約為2倍。2.2、最佳提取條件的確定提取條件對提取液的質(zhì)量影響至關(guān)重要，包括使用的溶劑、溶劑每次加入的量、每次對藥材的浸泡時間、提取次數(shù)、每次提取時間等等各方面的因素對制劑質(zhì)量和藥物效果都會產(chǎn)生意想不到的甚至是截然相反的效果。例如水用量的多少對有效成份的提取有重大影響水加少了，則有效成份提取的量就相對減少，這影響產(chǎn)品的質(zhì)量，并最終影響到產(chǎn)品的最終療效；而水加多了，一方面造成生產(chǎn)成本的加大，另一方面得到的產(chǎn)品含有雜質(zhì)也多，導(dǎo)致最終產(chǎn)品的毒副作用加大，給患者造成無法估量的治療后果；再者，加入水量過多使得最13終得到的提取液量也多，不但延長了濃縮時間加大生產(chǎn)成本，而且長時間的濃縮加熱使藥液出于高溫狀態(tài)，會對熱不穩(wěn)定的化學(xué)成分影響較大，最終直接影響制劑的質(zhì)量。健腦補(bǔ)腎膠囊的水提取物中含有大量可以測定的有效成分，例如金銀花中的綠原酸，白芍中的芍藥苷，連翹中的連翹苷等，但是由于各種測定成分或者含量太少無法檢測，或者轉(zhuǎn)移率過低無法達(dá)到檢測靈敏度的要求；經(jīng)過大量的實驗摸索和實驗條件的篩選，最終選擇了正丁醇提取物的含量及甘草酸的含量作為水提工藝的考察指標(biāo)；使用正丁醇提取物含量來控制整體提取情況，而甘草酸一方面可以達(dá)到檢測的各項要求，另一方面甘草酸在持續(xù)高溫下容易水解，這樣可以更有效的考察最終提取條件的合理性、科學(xué)性，從而篩選出最佳的水提取條件。測定方法a、正丁醇提取物取樣品約3g，精密稱定，置250ml錐形瓶中，精密加正丁50ml，密塞，稱重，靜置1小時后，連接回流冷凝管，加熱至沸騰，并保持微沸1小時。放冷后，稱得，用正丁醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用干燥濾器濾過，精密量取續(xù)濾液25ml，置已千燥至恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸千后，于105'C干燥3小時，移置干燥器中，冷卻30分鐘，迅速精密稱定重量。b、甘草酸色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-0.2mol/L醋酸銨溶液-冰醋酸(63:37:2)為流動相；檢測波長為250nm。理論板數(shù)按甘草酸峰計算應(yīng)不低于1500。對照品溶液的制備精密稱取甘草酸銨對照品適量(約相當(dāng)于甘草酸12.5mg)，置25ml量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密移取5ml置50ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得。供試品溶液的制備取樣品，研細(xì)，精密稱取約0.5g，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇-36%乙酸(25:5)溶液25ml，稱重，超聲處理40分鐘，放冷，再稱重，用甲醇-36%乙酸(25:5)溶液補(bǔ)足損失的量，搖勻，濾過，即得。14測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各lOpl,注入高效液相色譜儀測定，按照中國藥典2005版中規(guī)定的外標(biāo)方法進(jìn)行計算即得甘草酸的含量。2.2.1、水提取次數(shù)對提取液影響按處方量稱取金牛草、牛蒡子(炒)、金櫻子、杜仲(炭)、川牛膝、金銀花、連翹、蟬蛻、山藥等二十味藥材，分別稱取3份，加入10倍量的水溶液，分別進(jìn)行提取實驗，提取次數(shù)分別為1次、2次、3次，將獲得的提取液合并，濾過,濾液濃縮至相對密度為L21.4的稠膏，干燥后粉碎，得浸膏粉。然后分別測定正丁醇提取物和甘草酸的含量。結(jié)果見表8。表8、水提取次數(shù)選擇實驗實驗標(biāo)號提取次數(shù)浸膏粉(g)甘草酸含量(mg/g)正丁醇提取物(％)113450.4136.1225980.7336.7336090.7356.4結(jié)論水提取2次和3次，甘草酸含量幾乎無顯著差異，從節(jié)約生產(chǎn)成本考慮選擇水提取2次。2.2.2、提取時間的考察-按處方量稱取金牛草、牛蒡子(炒)、金櫻子、杜仲(炭)、川牛膝、金銀花、連翹、蟬蛻、山藥等二十味藥材，分別稱取6份，加入10倍量的水溶液，分別進(jìn)行提取實驗，提取2次，每次煎煮時間如下，將獲得的提取液合并，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.21.4的稠膏，干燥后粉碎，得浸膏粉。然后分別測定正丁醇提取物和甘草酸的含量，結(jié)果見表9。表9、提取時間考察實驗實驗標(biāo)號第一次煎煮時間(小時)第二次煎煮時間(小時)浸膏粉(g)甘草酸含量(mg/g)正丁醇提取物(％:1326237.176.02215597.406.4321.55687.396.7154225847.296.56113095.956.2結(jié)論水提取2次，第一次2小時和第二次1.5小時，正丁醇提取物最多，甘草酸的含量最好。2.2.3、加水量對提取液的影響按處方量稱取金牛草、牛蒡子(炒)、金櫻子、杜仲(炭)、川牛膝、金銀花、連翹、蟬蛻、山藥等二十味藥材，分別稱取6份，加水量如下(圖表中的數(shù)字為藥材重量的倍數(shù)重量)，分別進(jìn)行提取實驗，煎煮提取2次，第一次煎煮時間2小時，第二次1.5小時，將獲得的提取液合并，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.21.4的稠膏，干燥后粉碎，得浸膏粉。然后分別測定正丁醇提取物和甘草酸的含量。結(jié)果見表IO。表10、加水量的考察實驗<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>結(jié)論加6倍量水，由于提取溶劑少，因此所得提取物甘草酸的量也低。而實驗1和2所獲得的提取物含量無顯著差異，所以選擇第一次加10倍量水，煎煮2小時，第二次加8倍量水，煎煮1.5小時。以上實驗結(jié)果表明，本品水提取最佳工藝為取處方量金牛草等二十味加水煎煮二次，第一次加10倍量水，煎煮2小時，第二次加8倍量水，煎煮1.5小時。3、除雜工藝考察將金牛草、牛蒡子(炒)、金櫻子、杜仲(炭)、川牛膝、金銀花、連翹、蟬蛻、山藥等20味藥材的水提浸膏的濃縮稠膏與人參等5味藥材的乙醇回流提取液合并，加乙醇進(jìn)行除雜。選擇甘草酸作為測定指標(biāo)。3.1、乙醇濃度的篩選取上述合并提取物溶液，分別加入不同量的乙醇溶液，進(jìn)行去除雜質(zhì)實驗篩選，靜置24小時，將獲得的靜置液分別過濾后，減壓濃縮、真空干燥，得浸膏粉，測定甘草酸的含量。測定結(jié)果見表ll。表ll、除雜實驗乙醇濃度的篩選實驗標(biāo)號合并提取液量(ml)含乙醇濃度(％)乙醇加入量(ml)浸膏粉(g)甘草酸總含量(mg)150085425026798.62500802667289100.23500701400345135.5450060860375136.9550050556411136.1結(jié)論80%以上的上清液量過多，但是甘草酸含量卻相對少，由于乙醇濃度過高，除去大量的蛋白質(zhì)、鞣質(zhì)，且吸附了溶液中部分甘草酸，以至甘草酸總量大大降低，說明高濃度的乙醇中含有很多雜質(zhì)，去除雜質(zhì)效果差；而60%、50%的含醇量，由于乙醇濃度過低，無法有效保留甘草酸等成分，達(dá)不到除雜的效果；綜合篩選70%濃度的乙醇作為去除雜質(zhì)的溶劑。3.2、靜置時間的篩選取上述合并提取物溶液，加入乙醇適量使溶液含醇量達(dá)到70%，進(jìn)行去除雜質(zhì)實驗篩選，靜置不同時間，取上清液測定甘草酸的含量。測定結(jié)果見表12。表12、除雜實驗中靜置時間的篩選實驗標(biāo)號合并提取液量(ml)乙醇加入量(ml)靜置時間(小時)浸膏粉(g)甘草酸總含量(mg)150014006359134.12500140012339135.23500140024337133.94500140036329134.717結(jié)論靜置6小時甘草酸的含量明顯偏少，，由于時間短，溶液中飄有絮狀沉淀，造成過濾困難，從最終測定結(jié)果看，除雜不完全；而12、24和36小時基本一致。最終選擇12小時，也就是通常意義上說的過夜即可。3.3、獲得上清液方法的篩選取上述合并提取物溶液，加入乙醇適量，使含醇量的達(dá)到70%，進(jìn)行去除雜質(zhì)實驗篩選，靜置過夜后，采用不同方法獲取上清液，測定甘草酸的含量。測定結(jié)果見表13。表13、除雜實驗中獲得上清液方法的篩選實驗標(biāo)號合并提取液量(ml)(ml)過的上清液的方法浸膏粉(g)甘草酸總含量(mg)15001400直接取上清液311127.125001400取上清液和部分混合液后過濾335133.535001400取上清液和部分混合液后離心341134.2結(jié)論直接取上清液，由于部分溶液的損失導(dǎo)致甘草酸含量偏低，而離心雖然含量不變，但是卻造成部分雜質(zhì)進(jìn)入溶液中導(dǎo)致最終浸膏粉偏多。所以最終選擇取上清液后過濾的方法。4、制劑穩(wěn)定性工藝篩選考察4.1、粘合劑的選擇通過試驗我們發(fā)現(xiàn)本品浸膏粉具有很強(qiáng)的吸濕性，且吸濕后變粘，不易制粒，因此選用非水溶液乙醇制備軟材，乙醇濃度篩選實驗以及結(jié)果如表14，選擇常用的抗吸濕性較好淀粉作填充劑。表14、制備軟材的粘合劑乙醇濃度的篩選序號123浸膏粉量(g)58.458.458.418淀粉(g)41.641.641.675%乙醇適量——_85%乙醇—適量—95%乙醇——適量制粒情況難易易灌裝情況易易易合格膠囊(粒)154318319預(yù)產(chǎn)量(粒)333333333成品率(％)-46.295.595.8結(jié)論由上表可知，1號工藝制粒較難，產(chǎn)生頭子較多，成品率太低，由于其操作不易控制，故85%以下乙醇制備軟材工藝不可行；95%與85%所產(chǎn)生的效果相當(dāng)，最終選擇85%乙醇溶液作為制備軟材的粘合劑。4.2、輔料種類篩選以及制劑吸濕性實驗通過試驗我們發(fā)現(xiàn)本品浸膏粉具有很強(qiáng)的吸濕性，且吸濕后變粘，不易制粒，盡管選用非水溶液的高濃度乙醇作為粘合劑制備軟材，但是填充劑對于保持制劑的千燥狀態(tài)至關(guān)重要，可以保證處于儲藏、運輸和銷售的各個環(huán)節(jié)上的產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定合格，因此，對抗吸濕性的輔料進(jìn)行篩選，同時針對水分進(jìn)行了吸濕性加速影響因素實驗，結(jié)果見表15。表15、輔料種類篩選以及制劑吸濕性實驗單位(g)12345678浸膏粉量175175175175175175175175淀粉125———----————預(yù)交化淀粉----125——----———糊精--------125—_———微晶纖維素------------125----———乳糖------------—125———碳酸鈣------------——125———磷酸氫鈣—————————125—19氧化鎂-------------------------—12585%乙醇適量適量適量適量適量適量適量適量高濕75%、10天增重2.1%3.7%7.6%2.4%4.3%1.9%5.2%1.1%高濕75%、30天增重9.4%11.5%22.9%10.3%10.7%6.2%17.8%4.6%防潮包裝后高濕92.5%、30天增重1.8%2.2%4.0%2.4%2.3%1.4%3.6%0.7%結(jié)論從上述表中可以篩選出適合本品的填充劑，包括淀粉、預(yù)交化淀粉、微晶纖維素、碳酸鈣和氧化鎂，其中碳酸鈣和氧化鎂效果最好；綜合生產(chǎn)成本等因素，優(yōu)選淀粉、碳酸鈣和氧化鎂。5、健腦補(bǔ)腎膠囊放大工藝驗證實驗取10倍處方量藥材，按照上述提取工藝進(jìn)行操作，獲得的浸膏粉與適量淀粉混勻，用85%乙醇制軟材后過16目篩制粒，干燥后整粒裝囊，結(jié)果見表16表16、三批中試工藝驗證放大實驗批次浸膏粉量(kg)淀粉(kg)85%乙醇(L)成品數(shù)(粒)每粒甘草酸含量(mg)11.711.291.1791630.3921.861.141.0594220.3331.641.361.2395160.36綜上所述，在本發(fā)明的優(yōu)選實施例中，本發(fā)明的膠囊的制備方法優(yōu)選包括:取人參、鹿茸、狗腎、肉桂、砂仁，用40%的的乙醇回流提取至少2次，每次加6倍量，每次23小時，合并提取液過濾，得到乙醇提取液；金牛草、牛蒡子、金櫻子、杜仲、川牛膝、金銀花、連翹、蟬蛻、山藥、遠(yuǎn)志、酸棗仁、當(dāng)歸、龍骨、牡蠣、茯苓、白術(shù)、桂枝、甘草、白芍、豆蔻加水煎煮至少2次，第1次加10倍量水浸泡1小時，煎煮13小時，第2次以及以后每次加8倍量水，煎煮12小時，合并煎液過濾，濾液濃縮，與上述乙醇提取液合并，加20乙醇使含醇量為70%，靜置，取上清液，回收乙醇，加水至3500ml份，攪勻，靜置；取上清液濾過，濾液濃縮成稠膏，干燥后粉碎，加輔料混勻，制粒，干燥，裝入膠囊，即得。本發(fā)明提供了健腦補(bǔ)腎膠囊，其特征在于該膠囊的每個制劑單位含甘草酸不得低于0.15mg。在本發(fā)明的健腦補(bǔ)腎膠囊內(nèi)容物中，每粒膠囊含甘草酸不得低于0.15mg都可以達(dá)到本發(fā)明的有益效果和目的。本發(fā)明中甘草酸的測定方法如下首先制備所述的健腦補(bǔ)腎膠囊，該膠囊的內(nèi)容物的提取物按照以下的步驟方法進(jìn)行制備-取人參55g、鹿茸13g、狗腎26g、肉桂55.5g、砂仁77g，用40%乙醇回流提取二次，每次加6倍量，每次23小時，合并提取液，濾過，備用；其余金牛草22g、牛蒡子(炒)33.0g、金櫻子22.5g、杜仲(炭)66.5g、川牛膝66.5g、金銀花48.0g、連翹44.0g、蟬蛻44.0g、山藥88.0g、遠(yuǎn)志(甘草水制)77.0g、酸棗仁(炒)77.5g、當(dāng)歸66.0g、龍骨(煅)64.5g、牡蠣77.5g、茯苓154.5g、白術(shù)(麩炒)77.5g、桂枝64.5g、甘草51.5g、白芍64.5g、豆蔻64.0g共20味加水煎煮2次，第1次加10倍量水浸泡1小時，煎煮13小時，第2次加8倍量水，煎煮12小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮，與上述備用提取液合并，加乙醇使含醇量為70%，靜置，取上清液，回收乙醇，加水至3500ml，攪勻，靜置。取上清液濾過，濾液濃縮成稠膏，干燥后粉碎，加適量輔料混勻，制粒，干燥，裝入膠囊，制成1000粒，即得。色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗用十八烷基或者辛垸基硅垸鍵合硅膠為填充劑；甲醇-0.2mol/L醋酸銨溶液-冰醋酸(63:37:2)為流動相；檢測波長為250nm。理論板數(shù)按甘草酸峰計算應(yīng)不低于1500。對照品溶液的制備精密稱取甘草酸銨對照品適量(約相當(dāng)于甘草酸12.5mg),置25ml量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密移取5ml21置50ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得。供試品溶液的制備取膠囊內(nèi)容物適量，研細(xì)，精密稱取約0.5g，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇-36。/。乙酸(25:5)溶液25ml，稱重，超聲處理40分鐘，放冷，再稱重，用甲醇-36%乙酸(25:5)溶液補(bǔ)足損失的量，搖勻，濾過，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各lOpl,注入高效液相色譜儀測定，按照中國藥典2005版中規(guī)定的外標(biāo)方法進(jìn)行計算即得甘草酸的含量。本發(fā)明提供了健腦補(bǔ)腎膠囊，它能顯著增強(qiáng)其有益效果，比目前市售產(chǎn)品有顯著的穩(wěn)定性和治療優(yōu)點。同時，本發(fā)明提供了一種選擇，它提供了一種新的安全產(chǎn)品作為現(xiàn)有技術(shù)的替代，這種劑型將是醫(yī)生推薦使用并且得到醫(yī)患雙方的認(rèn)可的。本發(fā)明的目的在于提供一種健腦補(bǔ)腎膠囊藥物制劑，其克服了現(xiàn)有健腦補(bǔ)腎口服制劑的缺陷，而且克服了口服液常常出現(xiàn)的顏色變色、有效成分沉淀析出和染菌、有效期短等穩(wěn)定性差的問題，并增強(qiáng)了該制劑的有益效果。在本發(fā)明的優(yōu)選實施例中，所述的健腦補(bǔ)腎膠囊，每粒膠囊含甘草酸不得低于0.15mg。6、健腦補(bǔ)腎膠囊藥效學(xué)實驗實驗?zāi)康挠^察健腦補(bǔ)腎膠囊治療老年性健忘、癡呆的療效。實驗?zāi)Ｐ偷慕⑵は伦⑸銬-半乳糖的方式，建立老年癡呆的小鼠模型。實驗方法模型組、試驗組和對照組分別給藥后，觀察小鼠腦神經(jīng)元細(xì)胞凋亡率。模型組為小鼠癡呆模型組，試驗組為給予健腦補(bǔ)腎膠囊組，對照組為給予健腦補(bǔ)腎口服液組。測定方法采用共聚焦、流式細(xì)胞技術(shù)檢測神經(jīng)元細(xì)胞凋亡的數(shù)量。結(jié)果模型組的小鼠腦神經(jīng)元細(xì)胞凋亡率為58.2±10.8，試驗組小鼠腦神經(jīng)元細(xì)胞凋亡率為10.2±9.3，對照組為29.3±7.6。結(jié)論老年癡呆動物模型腦神經(jīng)元有明顯的細(xì)胞凋亡發(fā)生，說明該模型的可22靠性，而試驗組和對照組的實驗數(shù)據(jù)也同時說明健腦補(bǔ)腎膠囊較口服液有更顯著的抑制老年癡呆，改善老年人健忘等作用。具體實施例方式以下詳細(xì)說明本發(fā)明，但不限定本發(fā)明的實施范圍。實施例l.本發(fā)明的具有益氣健脾、安神定志作用的膠囊組成和配比人參55份、鹿茸13份、狗腎26份、肉桂55.5份、砂仁77份、金牛草22份、牛蒡子(炒)33.0份、金櫻子22.5份、杜仲(炭)66.5份、川牛膝66.5份、金銀花48.0份、連翹44.0份、蟬蛻44.0份、山藥88.0份、遠(yuǎn)志(甘草水制)77.0份、酸棗仁(炒)77.5份、當(dāng)歸66.0份g、龍骨(煅)64.5份、牡蠣77.5份、茯苓154.5份、白術(shù)(麩炒)77.5份、桂枝64.5份、甘草51.5份、白芍64.5份、豆蔻64.0份。制備方法取人參55g、鹿茸13g、狗腎26g、肉桂55.5g、砂仁77g，用40%乙醇回流提取二次，每次加6倍量，每次23小時，合并提取液，濾過，備用；其余金牛草22g、牛蒡子(炒)33.0g、金櫻子22.5g、杜仲(炭)66.5g、川牛膝66.5g、金銀花48.0g、連翹44.0g、蟬蛻44.0g、山藥88.0g、遠(yuǎn)志(甘草水制)77.0g、酸棗仁(炒)77.5g、當(dāng)歸66.0g、龍骨(煅)64.5g、牡蠣77.5g、茯苓154.5g、白術(shù)(麩炒)77.5g、桂枝64.5g、甘草51.5g、白芍64.5g、豆蔻64.0g共20味加水煎煮2次，第1次加10倍量水浸泡1小時，煎煮13小時，第2次加8倍量水，煎煮12小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮，與上述備用提取液合并，加乙醇使含醇量為70%，靜置，取上清液，回收乙醇，加水至3500ml，攪勻，靜置。取上清液濾過，濾液濃縮成稠膏，干燥后粉碎，加適量輔料混勻，制粒，干燥，裝入膠囊，制成1000粒，即得。其中-牛蒡子(炒)，為取干凈牛蒡子，置熱鍋中，用文火炒至略鼓起、微有香氣23時，取出放涼，即得。杜仲(炭)為取干凈杜仲，置熱鍋內(nèi)，用武火炒至表面焦黑色、內(nèi)部焦黃色時，噴淋清水少許，熄滅火星，取出，晾干，即得遠(yuǎn)志(甘草水制)(為取甘草，加適量水煎湯，去渣，加入干凈遠(yuǎn)志，用文火煮至湯吸盡，取出，干燥，即得酸棗仁(炒)為取干凈酸棗仁，置熱鍋中，用文火炒至略鼓起、色微變深時，取出放涼，即得龍骨(煅)為取干凈龍骨，砸成小塊，置無煙的爐火上或置適宜的容器內(nèi)，煅至紅透時，放涼，取出碾碎白術(shù)(麩炒)為取麩，撤在熱鍋中，加熱至冒煙時，加入干凈的白術(shù)，迅速翻動，炒至藥材表面呈黃色或色變深時，取出，篩去麩皮，放涼，即得。試驗l、甘草酸含量測定色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-0.2mol/L醋酸銨溶液-冰醋酸(63:37:2)為流動相；檢測波長為250nm。理論板數(shù)按甘草酸峰計算應(yīng)不低于1500。對照品溶液的制備精密稱取甘草酸銨對照品適量(約相當(dāng)于甘草酸12.5mg)，置25ml量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密移取5ml置50ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得。供試品溶液的制備取膠囊內(nèi)容物適量，研細(xì)，精密稱取約0.5g，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇-36%乙酸(25:5)溶液25ml,稱重，超聲處理40分鐘，放冷，再稱重，用甲醇-36%乙酸(25:5)溶液補(bǔ)足損失的量，搖勻，濾過，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各lOpl,注入高效液相色譜儀測定，按照中國藥典2005版中規(guī)定的外標(biāo)方法進(jìn)行計算，結(jié)果為每粒膠囊中甘草酸的含量為0.35mg。2權(quán)利要求1.一種具有益氣健脾、安神定志作用的膠囊，包括以下重量配比的組分人參45～65份、鹿茸7～18份、狗腎18～24份、肉桂45～65份、砂仁65～85份、金牛草15～30份、牛蒡子52～40份、金櫻子15～30份、杜仲55～78份、川牛膝55～78份、金銀花40～55份、連翹35～53份、蟬蛻35～53份、山藥75～100份、遠(yuǎn)志65～85份、酸棗仁65～85份、當(dāng)歸55～78份g、龍骨55～78份、牡蠣65～85份、茯苓120～180份、白術(shù)65～85份、桂枝55～78份、甘草45～60份、白芍55～78份、豆蔻55～78份；其中，該膠囊經(jīng)由下述方法制得，取人參、鹿茸、狗腎、肉桂、砂仁，用10％～80％的乙醇回流提取，提取液過濾，得到乙醇提取液；金牛草、牛蒡子、金櫻子、杜仲、川牛膝、金銀花、連翹、蟬蛻、山藥、遠(yuǎn)志、酸棗仁、當(dāng)歸、龍骨、牡蠣、茯苓、白術(shù)、桂枝、甘草、白芍、豆蔻加水煎煮，煎液過濾，濾液濃縮，與上述乙醇提取液合并，得到合并液；在合并液中加乙醇使含醇量為60％～80％，取上清液，回收乙醇，加水至3500份，攪勻，靜置，取上清液濾過，濾液濃縮成稠膏，干燥后粉碎，加輔料混勻，制粒，干燥，裝入膠囊，即得。2.如權(quán)利要求1所述的具有益氣健脾、安神定志作用的膠囊，其中，該膠囊的每個制劑單位含甘草酸0.15mg0.6mg。3.如權(quán)利要求1所述的具有益氣健脾、安神定志作用的膠囊，其中包括以下重量配比的組分人參55份、鹿茸13份、狗腎26份、肉桂55.5份、砂仁77份、金牛草22份、牛蒡子33.0份、金櫻子22.5份、杜仲66.5份、川牛膝66.5份、金銀花48.0份、連翹44.0份、蟬蛻44.0份、山藥88.0份、遠(yuǎn)志77.0份、酸棗仁77.5份、當(dāng)歸66.0份g、龍骨64.5份、牡蠣77.5份、茯苓154.5份、白術(shù)77.5份、桂枝64.5份、甘草51.5份、白芍64.5份、豆蔻64.0份。4.如權(quán)利要求1所述的具有益氣健脾、安神定志作用的膠囊，其中，牛蒡子為炒制的牛蒡子，杜仲為炭制的杜仲，遠(yuǎn)志為用甘草水制的遠(yuǎn)志，酸棗仁為炒制的酸棗仁，龍骨為煅制的龍骨，白術(shù)為麩皮炒制的白術(shù)。5.如權(quán)利要求4所述的具有益氣健脾、安神定志作用的膠囊，其中包括以下重量配比的組分人參55份、鹿茸13份、狗腎26份、肉桂55.5份、砂仁77份、金牛草22份、牛蒡子(炒)33.0份、金櫻子22.5份、杜仲(炭)66.5份、川牛膝66.5份、金銀花48.0份、連翹44.0份、蟬蛻44.0份、山藥88.0份、遠(yuǎn)志(甘草水制)77.0份、酸棗仁(炒)77.5份、當(dāng)歸66.0份g、龍骨(煅)64.5份、牡蠣77.5份、茯苓154.5份、白術(shù)(麩炒)77.5份、桂枝64.5份、甘草51.5份、白芍64.5份、豆蔻64.0份。6.權(quán)利要求1所述的具有益氣健脾、安神定志作用的膠囊的制備方法，其中，該方法包括取人參、鹿茸、狗腎、肉桂、砂仁，用10%80%的乙醇回流提取，提取液過濾，得到乙醇提取液；金牛草、牛蒡子、金櫻子、杜仲、川牛膝、金銀花、連翹、蟬蛻、山藥、遠(yuǎn)志、酸棗仁、當(dāng)歸、龍骨、牡蠣、茯苓、白術(shù)、桂枝、甘草、白芍、豆蔻加水煎煮，煎液過濾，濾液濃縮，與上述乙醇提取液合并，得到合并液；在合并液中加乙醇使含醇量為60%80%，取上清液，回收乙醇，加水至3500份，攪勻，靜置，取上清液濾過，濾液濃縮成稠膏，干燥后粉碎，加輔料混勻，制粒，干燥，裝入膠囊。7.如權(quán)利要求6所述的制備方法，其中，該方法包括取人參、鹿茸、狗腎、肉桂、砂仁，用40%的的乙醇回流提取至少2次，每次加6倍量，每次23小時，合并提取液過濾，得到乙醇提取液；金牛草、牛蒡子、金櫻子、杜仲、川牛膝、金銀花、連翹、蟬蛻、山藥、遠(yuǎn)志、酸棗仁、當(dāng)歸、龍骨、牡蠣、茯苓、白術(shù)、桂枝、甘草、白芍、豆蔻加水煎煮至少2次，第1次加10倍量水浸泡1小時，煎煮13小時，第2次以及以后每次加8倍量水，煎煮12小時，合并煎液過濾，濾液濃縮，與上述乙醇提取液合并，加乙醇使含醇量為70%，靜置，取上清液，回收乙醇，加水至3500份，攪勻，靜置；取上清液濾過，濾液濃縮成稠膏，干燥后粉碎，加輔料混勻，制粒，干燥，裝入膠囊，即得。8.如權(quán)利要求6或7所述的制備方法，其中，牛蒡子為炒制的牛蒡子，杜仲為炭制的杜仲，遠(yuǎn)志為用甘草水制的遠(yuǎn)志，酸棗仁為炒制的酸棗仁，龍骨為煅制的龍骨，白術(shù)為麩皮炒制的白術(shù)。全文摘要本發(fā)明提供了一種具有益氣健脾、安神定志作用的膠囊，包括人參、鹿茸、狗腎、肉桂、砂仁、金牛草、牛蒡子、金櫻子、杜仲、川牛膝份、金銀花、連翹、蟬蛻、山藥、遠(yuǎn)志、酸棗仁、當(dāng)歸、龍骨、牡蠣、茯苓、白術(shù)、桂枝、甘草份、白芍、豆蔻；本發(fā)明還提供了該膠囊制劑的制備方法制得；該制劑在能夠改善產(chǎn)品穩(wěn)定性的同時，將其負(fù)面作用降低到最低限度。文檔編號A61K35/02GK101530591SQ20091013687公開日2009年9月16日申請日期2009年4月18日優(yōu)先權(quán)日2009年4月18日發(fā)明者姚俊華申請人:姚俊華