專利名稱：凝血酶抑制劑的藥物前體的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及藥學活性化合物的藥用藥物前體，具體地說，這些活性化合物是胰蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶、特別是凝血酶的競爭抑制劑，本發(fā)明涉及作為藥物的藥物前體、包含它們的藥用組合物以及生產它們的合成途徑。
背景血液凝固是參與止血(即預防受損血管失血)和血栓形成(即在血管內形成血塊，有時導致血管梗塞)的主要過程。
凝固是一系列復雜的酶促反應的結果。該系列反應中的一個最終步驟是將酶原凝血酶原轉化為活性酶凝血酶。
已知凝血酶在凝固中起重要作用。它激活血小板，導致血小板聚集；將纖維蛋白原轉化為血纖維蛋白單體，后者自發(fā)聚合為血纖維蛋白聚合物；以及激活凝血因子XIII，后者再使這些聚合物交聯，形成不溶性血纖維蛋白。此外，凝血酶激活凝血因子V和凝血因子VIII，導致由凝血酶原“正反饋”產生凝血酶。
期望有效的凝血酶抑制劑通過抑制血小板的聚集以及血纖維蛋白的形成和交聯，表現出抗凝活性。此外，期望通過抑制正反饋機制，增強抗凝活性?，F有技術Claesson(Blood Coagul.Fibrin.(1994)5，411)已經描述了低分子量凝血酶抑制劑的開發(fā)。
Blombck等(J.Clin.Lab.Invest.24，增刊107，59，(1969))報道了基于位于纖維蛋白原Aα鏈酶切位點周圍氨基酸序列的凝血酶抑制劑。在討論的氨基酸序列中，這些作者提出三肽序列Phe-Val-Arg是最有效的抑制劑。
隨后在例如美國專利4,346,078；國際專利申請WO 93/11152、WO 94/29336、WO 93/18060和WO 95/01168；和歐洲專利申請648780、468 231、559 046、641 779、185 390、526 877、542 525、195 212、362 002、364 344、530 167、293 881、686 642和601 459中公開了低分子量的肽基凝血酶抑制劑。
新近，在歐洲專利申請0 699 317和國際專利申請WO 95/23609、WO 95/35309、WO 96/25426和WO 94/29336中已經公開了基于肽衍生物的凝血酶抑制劑。
特別是，后一申請公開了肽衍生物RaOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab-H，其中Ra表示H、芐基或C1-6烷基。
盡管已知這些活性化合物表現出顯著的抗凝血酶活性，但改進它們口服和胃腸外給藥后的藥效學性質是有益的。希望改進的藥效學性質實例包括(a)提供改善的胃腸道吸收，以便減小與這些活性化合物生物利用度有關的個體內和/或個體間的變異性；(b)使該血漿濃度時間曲線圖變平(即減小在給藥間隔內血漿濃度中的峰/谷比)，以便減小落在治療間隔之外的風險和由于濃度峰太高引起的副作用(例如出血)以及由于濃度峰太低引起的副作用(例如血栓形成)；以及(c)增加這些活性化合物的作用時間。
此外，口服和胃腸外給與活性凝血酶抑制劑可能由于局部濃度高，導致不良的局部出血(例如在腸腔中或皮下)。
最后，在胃腸道內也可以抑制胰蛋白酶和其它絲氨酸蛋白酶的口服的活性凝血酶抑制劑可能表現出包括消化不良在內的另外的副作用(例如在腸腔內抑制胰蛋白酶)。
盡管在國際專利申請WO 94/29336中也公開了作為凝血酶抑制劑的上述活性化合物的某些N-芐酯基衍生物，但沒有提到這些衍生物可以用作藥物前體。事實上，WO 94/29336沒有提到這些活性化合物的合適藥物前體。
我們發(fā)現通過給與按照本發(fā)明的化合物，可以解決上述問題，這些化合物盡管本身是無活性的，但口服和/胃腸外給藥時在體內代謝，形成包括上述那些化合物在內的活性凝血酶抑制劑。
本發(fā)明說明書按照本發(fā)明，提供式I化合物或其藥學上可接受的鹽(下文稱為“本發(fā)明化合物”)R1O(O)C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab-R2I其中R1表示-R3或-A1C(O)N(R4)R5或-A1C(O)OR4；A1表示C1-5亞烷基；R2(它取代Pab-H的脒基單位中的一個氫原子)表示OH、C(O)OR6、C(O)OR7或C(O)OCH(R8)OC(O)R9；R3表示H、C1-10烷基或C1-3烷苯基(該后一基團可任選地用C1-6烷基、C1-6烷氧基、硝基或鹵素取代)；R4和R5獨立地表示H、C1-6烷基、苯基、2-萘基，或當R1表示-A1C(O)N(R4)R5時，與連接它們的氮原子一起表示吡咯烷基或哌啶基；R6表示C1-17烷基、苯基或2-萘基(它們全都可任選地用C1-6烷基或鹵素取代)；R7表示2-萘基、苯基、C1-3烷苯基(后三種基團可任選地用C1-6烷基、C1-6烷氧基、硝基或鹵素取代)或C1-12烷基(后一基團可任選地用C1-6烷氧基、C1-6酸基或鹵素取代)；R8表示H或C1-4烷基；以及R9表示2-萘基、苯基、C1-6烷氧基或C1-8烷基(后一基團可任選地用鹵素、C1-6烷氧基或C1-6酸基取代)；條件是當R1表示R3，R3表示芐基、甲基、乙基、正丁基或正己基和R2表示C(O)OR7時，那么R7不表示芐基。
本發(fā)明化合物可能表現出互變異構。所有互變異構形式及其混合物都包括在本發(fā)明范圍內。
本發(fā)明化合物也可以含有一個或多個非對稱碳原子，因此可以表現出光學和/或非對映異構現象。所有的非對映異構體都可以采用例如色譜或分級結晶的常規(guī)技術分離?？梢圆捎美绶旨壗Y晶或HPLC的常規(guī)技術通過分離這些化合物的外消旋混合物或其它混合物，分離各種立體異構體?；蛘撸梢酝ㄟ^使合適的光學活性原材料在不引起外消旋或差向異構化的條件下反應，或通過例如用純手性酸衍生，隨后用常規(guī)方法(例如HPLC、硅膠上的色譜)分離非對映異構體衍生物，制備所需光學異構體。所有的立體異構體都包括在本發(fā)明范圍內。
按照本發(fā)明的再一方面，提供上述限定的但無附帶條件的式I化合物作為藥物前體的用途。
R3、R4、R5、R6、R7和R9可以表示的烷基可以是線性的，或當有足夠數目的碳原子時，可以是支鏈、環(huán)狀或部分環(huán)狀的，可以是飽和的或不飽和的，可以插入氧和/或用OH取代或封端，條件是該OH基團不連接sp2碳原子或與氧原子相鄰的碳原子。
“部分環(huán)狀烷基”我們是指諸如CH2Ch之類的基團。
R8可以表示的以及可以用來取代R3、R6和R7的烷基可以是線性的，或當有足夠數目的碳原子時，可以是支鏈的，可以是飽和的或不飽和的和/或插入氧。
R3和R7可以表示的烷苯基的烷基部分可以是線性的，或當有足夠數目的碳原子時，可以是支鏈和/或飽和的或不飽和的。
A1可以表示的亞烷基可以是線性的，或當有足夠數目的碳原子時，可以是支鏈和/或飽和的或不飽和的。
R9可以表示的以及可以用來取代R3、R7和R9的烷氧基可以是線性的，或當有足夠數目的碳原子時，可以是支鏈的和/或飽和的或不飽和的。
可以用來取代R7和R9的酸基可以是線性的，或當有足夠數目的碳原子時，可以是支鏈的和/或飽和的或不飽和的。
本說明書結束處列出了縮寫。
按照本發(fā)明的再一方面，提供上述限定的式I化合物，另外的條件是(a)R1不表示-A1C(O)OR4；(b)R4和R5不獨立地表示H；(c)當R2表示OC(O)R6時，R6不表示C1-17烷基。
按照本發(fā)明的再一方面，提供式I化合物，其中(a)R1表示-A1C(O)OR4；(b)R4和R5獨立地表示H；(c)當R2表示OC(O)R6時，R6表示C1-17烷基。
當R1表示-A1C(O)N(R4)R5時，優(yōu)選的本發(fā)明化合物包括那些化合物，其中A1表示C1-3亞烷基；R4表示H或C1-6烷基；R5獨立地表示C1-6烷基或C4-6環(huán)烷基；或那些化合物，其中R4和R5一起表示吡咯烷基。
當R1表示-A1C(O)OR4時，優(yōu)選的本發(fā)明化合物包括那些化合物，其中A1表示C1-5亞烷基；R4表示C1-6烷基。
當R1表示R3時，優(yōu)選的本發(fā)明化合物包括那些化合物，其中R3表示H、C1-10烷基(該后一基團可以是線性的，或當有足夠數目的碳原子時，可以是支鏈的和/或部分環(huán)狀或環(huán)狀的)或C1-3烷苯基(后一基團可任選地被取代，可以是線性的，或當有足夠數目的碳原子時，可以是支鏈的)。
優(yōu)選的本發(fā)明化合物包括那些化合物，其中R2表示OH、OC(O)R6(其中，在后一種情況下，R6表示任選取代的苯基或C1-17烷基(后一基團可以是線性的，或當有足夠數目的碳原子時，可以是支鏈、環(huán)狀或部分環(huán)狀的和/或飽和或不飽和的))、C(O)OR7(其中，在后一種情況下，R7表示任選地取代的苯基、C1-12烷基(后一基團可任選地被取代，可以是線性的，或當有足夠數目的碳原子時，可以是支鏈、環(huán)狀或部分環(huán)狀的和/或飽和或不飽和的)或C1-3烷苯基(后一基團可任選地被取代，可以是線性的，或當有足夠數目的碳原子時，可以是支鏈的)或C(O)OCH(R8)OC(O)R9(其中在后一種情況下，R8表示H或甲基，及R9表示苯基或C1-8烷基(后一基團可任選地被取代，可以是線性的，或當有足夠數目的碳原子時，可以是支鏈的和/或環(huán)狀或部分環(huán)狀的))。
更優(yōu)選的本發(fā)明化合物包括那些化合物，其中R1表示H、線性C1-10烷基、支鏈C3-10烷基、部分環(huán)狀C4-10烷基、C4-10環(huán)烷基、可任選取代的線性C1-3烷苯基、可任選取代的支鏈C3烷苯基、-A1C(O)N(R4)R5(其中在后一種情況下，A1表示C1-3亞烷基，R4表示H或C1-3烷基，R5表示C2-6烷基或C5-6環(huán)烷基，或R4和R5一起表示吡咯烷基)或-A1C(O)OR4(其中在后一種情況下，A1表示C1-5亞烷基，而R4表示C1-4烷基)；R2表示OH、OC(O)R6(其中在后一種情況下，R6表示可任選取代的苯基、線性C1-4烷基、支鏈C3-4烷基和順式十八基)、C(O)OR7(其中在后一種情況下，R7表示可任選取代和/或可任選不飽和的線性C1-4烷基或可任選取代和/或可任選不飽和的支鏈C3-4烷基、可任選取代的苯基或可任選取代的線性C1-3烷苯基或可任選取代的支鏈C3烷苯基)或C(O)OCH(R8)OC(O)R9(其中，在后一種情況下，R8表示H或甲基，而R9表示苯基、C5-7環(huán)烷基、線性C1-6烷基、支鏈C3-6烷基或部分環(huán)狀C7-8烷基)。
特別優(yōu)選的本發(fā)明化合物包括那些化合物，其中R1表示線性C1-6烷基、C6-10環(huán)烷基或可任選取代的線性C1-3烷苯基；R2表示OH、OC(O)R6(其中在后一種情況下，R6表示線性C1-3烷基或支鏈C3烷基)、C(O)OR7(其中在在后一種情況下，R7表示可任選取代的線性C14烷基或可任選取代的支鏈C3-4烷基、可任選取代的線性C1-3烷苯基或支鏈C3烷苯基)或C(O)OCH(R8)OC(O)R9(其中在后一種情況下，R8表示H，而R9表示C5-7環(huán)烷基、線性C1-6烷基或部分環(huán)狀C7-8烷基)。
當R1表示R3，而R4表示可任選取代的C1-3烷苯基時，優(yōu)選的可任選取代基包括C1-6烷基(尤其是甲基)。
當R2表示C(O)OR7，而R7表示可任選取代的C1-12烷基時，優(yōu)選的可任選的取代基包括鹵素(尤其是氯)和C1-6烷氧基(尤其是甲氧基)。
當R2表示C(O)OR7，而R7表示可任選取代的苯基時，優(yōu)選的可任選取代基包括C1-6烷基(尤其是甲基)、C1-6烷氧基(尤其是甲氧基)和鹵素(尤其是氯)。
當R2表示C(O)OR7，而R7表示可任選取代的C1-3烷苯基時，優(yōu)選的可任選取代基包括硝基。
優(yōu)選的本發(fā)明化合物包括實施例1-68的化合物。
更優(yōu)選的本發(fā)明化合物包括EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH＝CH2；nPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH＝CH2；tBuOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH＝CH2；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOEt；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nBu；PrlC(O)CH2CH2CH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；ChNHC(O)CH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；(nPr)2NC(O)CH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCC(CH3)3；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCC(CH3)3；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH(CH3)OOCCH3；MeOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh；MeOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；nPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；nPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；iPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；tBuOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；(nPr)2NCOCH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；ChNHCOCH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OAc；HOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；HOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-O-cis-Oleyl；Cyclooctyl-OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；tBuCH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；(2-Me)BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；ChCH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；ChOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；PhC(Me)2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；(Me)2CHC(Me)2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)；ChCH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)；(2-Me)BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-Me)；BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-Me)；BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nBu；iPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH＝CH2；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-iBu；BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nPr；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCCh；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCCH2Ch；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH(Me)OOCPh；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCPh；BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH(Me)OAc；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OAc；tBuOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OAc；MeOOC-C(＝CHEt)CH2-OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；Men-OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)；andEtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CCl3.
特別優(yōu)選的本發(fā)明化合物包括EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CCl3；BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOnBu；nPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；Cyclooctyl-OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCCh；MeOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；nPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；iPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；和EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OAc.制備按照本發(fā)明，也提供制備式I化合物的方法，該方法包括(a)通過將相應的式I化合物(其中R2表示OC(O)R6，而R6如上限定)與醇鹽堿(例如一種堿金屬醇鹽)例如于室溫下，在合適有機溶劑(例如THF)存在下進行反應，制備式I化合物(其中R2表示OH)。
(b)通過將相應的式I化合物(其中R2表示C(O)OR7，而R7如上限定)與羥胺或其酸加成鹽例如于室溫下，在合適堿(例如碳酸鉀或三乙胺)和合適有機溶劑(例如THF或EtOH)存在下進行反應，制備其中式I化合物(R2表示OH)。
(c)通過將以下相應式II化合物與式III化合物例如于室溫和較高溫度(例如40℃)之間，在合適堿(例如碳酸鉀)和合適有機溶劑(例如THF、D/F或乙腈)存在下進行反應，制備式I化合物，H-(R)Cgl-Aze-Pab-R2II其中R2如上限定，R1O(O)C-CH2-L1III其中L1表示離去基團，例如鹵化物(例如溴化物)或烷基磺酸鹽(例如三氟甲基磺酸鹽)，而R1如上限定。
(d)通過將相應的式I化合物(其中R1表示C1-10烷基或C1-3烷苯基，而R2表示OH或C(O)OR7)與合適的堿(例如堿金屬醇鹽或堿金屬氫氧化物)例如于室溫下，在合適有機溶劑(例如水和MeOH)存在下進行反應，制備式I化合物(其中R1表示H，R2表示OH或C(O)OR7，而R7上面限定)。
(e)通過將相應的式I化合物(其中R2表示OH)與以下式IV化合物例如于室溫下，在合適堿(例如三乙胺、吡啶或DMAP)和合適有機溶劑(例如二氯甲烷或THF)存在下進行反應，制備式I化合物(其中R2表示OC(O)R6、而R6如上限定)R6C(O)-O-C(O)R6IVR6C(O)Hal V其中Hal表示Cl或Br，而在兩種情況下，R6都如上限定。
(f)通過將以下相應的式VI化合物與合適酸(例如TFA)例如于室溫下，在合適有機溶劑(例如二氯甲烷)存在下進行反應，制備其中R1表示H、R2表示OC(O)R6、而R6如上限定的式I化合物，P1O(O)C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab-R2VI其中P1表示酸不穩(wěn)定酯保護基團(例如tBu或Bn)，而R2表示OC(O)R6，其中R6如上限定。
(g)通過以下相應的式VII化合物在本領域技術人員眾所周知的條件下的酯基轉移，制備式I化合物，其中R1表示R3，R3表示C1-10烷基或C1-3烷苯基，R2表示OH或C(O)OR7，而R7如上限定，R1aO(O)C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab-R2VII其中R1a表示非正在形成的C1-10烷基或C1-3烷苯基，而R2如上限定或為另一不穩(wěn)定烷基取代基。
通過將以下式VIII化合物在本領域技術人員眾所周知的條件下去保護，可以制備式II化合物，
Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-R2VIII其中R2如上限定。
可以用類似于上文所述式I化合物(其中R1表示R3，而R3表示C1-10烷基或C1-3烷苯基)的制備方法，制備式VI和VII化合物。
可以通過將以下式IX化合物與Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-OH例如于室溫下，在合適偶聯系統(tǒng)(例如EDC)、合適堿(例如DMAP)和合適有機溶劑(例如二氯甲烷或乙腈)存在下進行反應，制備式VIII化合物，H-Pab-R2IX其中R2如上限定。
可以通過將相應的式VIII化合物(其中R2表示C(O)OR7或C(O)OCH(R8)OC(O)R9)與羥胺或其酸加成鹽例如于室溫下，在合適堿(例如碳酸鉀或三乙胺)和合適有機溶劑(例如THF和EtOH)存在下進行反應，制備式VIII化合物(其中R2表示OH)。
可以通過將Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H與以下式X化合物例如于室溫下或低于室溫下，在合適堿(例如NaOH)和合適的有機溶劑(例如THF)存在下進行反應，制備式VIII化合物(其中R2表示C(O)OR7或C(O)OCH(R8)OC(O)R9)，L2C(O)OR2aX其中L2表示離去基團(例如鹵素或酚鹽)，R2a表示R7或-CH(R8)OC(O)R9，而R7、R8和R9如上文限定。
或者可以通過將相應的式VIII化合物(其中R2表示OH)與上文限定的式IV或上文限定的式V化合物例如于室溫下，在合適堿(例如三乙胺、吡啶或DMAP)和合適有機溶劑(例如二氯甲烷或THF)存在下進行反應，制備其中R2表示C(O)OR6的式VIII化合物。
或者可以通過將Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H與以下式XI化合物例如于室溫下，在合適的有機溶劑(例如THF)存在下進行反應，制備式VIII化合物(其中R2表示OC(O)R6)，R6C(O)-O-O-C(O)R6XI其中R6如上限定。
可以通過將相應的式VIII化合物(其中R2表示OC(O)R6，而R6如上文限定)與合適堿(例如堿金屬醇鹽)例如于室溫下，在合適的有機溶劑(例如THF)存在下進行反應，制備其中R2表示OH的式VIII化合物。
式IX化合物是文獻中眾所周知的，或可以采用類似于上文所述那些方法制備。例如可以通過將H-Pab-H或其保護的衍生物與上文限定的式X化合物例如于室溫下，在合適堿(例如NaOH)和合適有機溶劑(例如THF)存在下進行反應，制備式IX化合物，其中R2表示C(O)OR7或C(O)OCH(R8)OC(O)R9，而R7、R8和R9如上文限定。
通過將H-Pab-H或其受保護的衍生物與Boc-Cgl-Aze-OH例如按上述用于式VIII的方法進行反應，可以制備Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H。
或者可以通過將以下式XII化合物在本領域技術人員眾所周知的條件下去保護，制備Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H，Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-P2XII其中P2表示Boc鄰位的保護基團。
式III、IV、V、X、XI和XII化合物或者是市售的，是文獻中眾所周知的，或者可采用已知技術(例如下文所述)得到的。
可以采用常規(guī)技術，將本發(fā)明化合物從其反應混合物中分離。
本領域技術人員會意識到，在上述方法中，中間化合物的官能團可能需要用保護基團保護。
希望保護的官能團包括羥基、氨基、脒基和羧酸。合適的羥基保護基團包括三烷基甲硅烷基和二芳基甲硅烷基(例如叔丁基二甲基甲硅烷基、叔丁基二苯基甲硅烷基或三甲基甲硅烷基)和四氫吡喃基。合適的羧酸保護基團包括C1-6烷基酯或芐基酯。合適的氨基和脒基保護基團包括叔丁酯基或芐酯基。脒基氮可以或者是單保護的或者是雙保護的。
可以按照諸如下文所述的本領域技術人員眾所周知的技術除去保護基團。
在Protective Groups in Organic Chemistry，J W F McOmie編輯，Plenum Press(1973)和Protective Groups in Organic synthesis，第2版，TW Green和P G M Wutz，Wiley-Interscience(1991)中全面描述了保護基團的用法。醫(yī)學和藥物用途本發(fā)明化合物是有用的，因為它們在體內代謝，形成具有藥理學活性的化合物。因此它們被指定為藥物，特別是藥物前體。
具體地說，盡管本發(fā)明化合物本身對凝血酶是無活性的，但例如在下述試驗中證明的，它們在體內代謝，形成潛在的凝血酶抑制劑。
“本發(fā)明化合物本身對凝血酶是無活性的”是指在以下試驗A的測定中，它們表現出的IC50TT值大于1μM。
因此預期本發(fā)明化合物可用于需要抑制凝血酶的那些疾病中。
因此，在包括人在內的動物血液和組織中血栓形成和凝固性過高的治療處理和/或預防處理中需要本發(fā)明化合物。
已知凝固性過高可以導致血栓栓塞病。
可以提到的血栓栓塞病包括諸如凝血因子V突變(凝血因子VLeiden)之類的活化蛋白C抗性以及抗凝血酶III、蛋白C、蛋白S、肝素輔因子II的遺傳性或獲得性缺陷。已知與凝固性過高和血栓栓塞病有關的其它疾病包括循環(huán)抗磷脂抗體(Lupus抗凝劑)、高半胱氨酸血(homocysteinemi)、肝素誘導的血小板減少癥和血纖維蛋白溶解中的缺陷。因此，在治療處理和預防處理這些疾病中需要本發(fā)明化合物。
在有不合要求的過量凝血酶而無凝固性過高病癥的疾病的治療中還需要本發(fā)明化合物，這些疾病例如神經變性疾病，諸如Alzheimer氏病。
可以提到的特殊疾病狀態(tài)包括治療處理和/或預防處理靜脈血栓形成和肺栓塞、動脈血栓形成(例如在心肌梗塞、不穩(wěn)定咽峽炎、基于血栓形成的中風和外周動脈血栓形成)和通常在動脈纖維性顫動期間來自心房或在透壁心肌梗塞后來自左心室的全身性栓塞。
此外，預期本發(fā)明化合物在血栓溶解、經皮經管腔成形術(PTA)和冠狀動脈分流術手術后預防重新阻塞(即血栓形成)中用實用性；一般在顯微手術和血管手術后預防重新血栓形成中有實用性。
其它適應癥包括治療處理和/或預防處理由細菌、多種創(chuàng)傷、中毒或任一其它機制引起的播散性血管凝血；當血液與體內外來物表面(諸如血管移植物、stent血管移植片固定模、血管導管、機械和生物假瓣膜或任何其它醫(yī)療裝置)接觸時進行的抗凝劑處理；和諸如在心血管手術期間采用心肺機(heat-lung machine)或在血液透析中，當血液與體外醫(yī)療裝置接觸時進行的抗凝劑處理。
凝血酶除對凝血過程的作用外，還已知激活大量細胞(諸如嗜中性白細胞、成纖維細胞、內皮細胞和平滑肌細胞)。因此，本發(fā)明化合物也可用來治療處理和/或預防處理特發(fā)性和成人呼吸窘迫綜合癥、在用放療或化療治療后的肺纖維化、敗血癥性休克、敗血癥、炎癥反應，包括(但不限于)水腫、諸如冠狀動脈疾病之類的急性或慢性動脈粥樣硬化、腦動脈疾病、外周動脈疾病、再灌損傷和經皮經管腔血管成形術(PTA)后的重狹窄。
抑制胰蛋白酶和/或凝血酶的本發(fā)明化合物也可以用來治療胰腺炎。
按照本發(fā)明的再一方面，提供需要抑制凝血酶的疾病的治療方法，該方法包括給與患這疾病或易患這種疾病的患者治療有效量的如上限定的式I化合物或其藥學上可接受的鹽。
本發(fā)明化合物通常以藥學上可接受的劑量形式經口、頰、直腸、皮膚、鼻、氣管、支氣管、通過任何其它胃腸外途徑或通過吸入，以藥用制劑形式給藥，該藥用制劑包含獲得作為游離堿或者作為藥學上可接受的非毒性有機或無機酸加成鹽的藥物前體。根據所述的失調和待治療病人及給藥途徑，所述組合物可以以變化的劑量給與。
本發(fā)明化合物也可以結合具有不同作用機制的任一抗凝劑和/或與其共同給藥，抗凝劑諸如抗血小板劑乙酰水楊酸、氯芐噻啶、clopidogrel、凝血噁烷受體和/或合成酶抑制劑、血纖維蛋白酶原受體拮抗劑、環(huán)前列腺素mimetics和磷酸二酯酶抑制劑和ADP受體(P2T)拮抗劑。
在血栓形成疾病，特別是心肌梗塞的治療中，本發(fā)明化合物還可以與抗凝劑(thromolytics)結合和/或與其一起給藥，這些抗凝劑諸如組織血纖維蛋白溶酶原激活劑(天然的或重組的)、鏈激酶、尿激酶、原尿激酶、一種分離的鏈激酶血纖維蛋白溶酶原激活劑復合體(ASPAC)、動物唾液腺血纖維蛋白溶酶原激活劑等等。
因此，按照本發(fā)明的再一方面，提供一種藥用制劑，還制劑包含與藥學上可接受的輔助劑、稀釋劑或載體混合的上文限定的式I化合物或其藥學上可接受的鹽。
在人類的治療處理中，本發(fā)明化合物合適的口服日劑量為大約0.001-100mg/kg體重，胃腸外給藥的合適日劑量為0.001-50mg/kg體重。
本發(fā)明化合物的優(yōu)點是，與下式化合物、特別是其中Ra表示H的化合物相比，它們在口服和胃腸外給藥后，可以具有諸如上文指定的那些改進的藥效學性質RaO(O)C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab-H其中Ra如上文限定。
本發(fā)明化合物對凝血酶、胰蛋白酶和其它絲氨酸蛋白酶是無活性的。由此這些化合物在胃腸道中仍是無活性的，因此可以避免口服本身有活性的抗凝劑所經歷的潛在的問題復雜性，諸如由胰蛋白酶抑制引起的出血和消化不良。
此外，采用本發(fā)明化合物可以避免與胃腸外給與活性凝血酶抑制劑伴生的或在胃腸外給與活性凝血酶抑制劑后的局部出血。
本發(fā)明化合物也可能具有的優(yōu)點是，它們比現有技術中已知的化合物更有效，毒性更低，作用時間更長，活性范圍更廣，產生的副作用更小，更易于吸收，或它們可以具有其它的有用藥理學性質。生物學試驗試驗A凝血酶凝結時間(TT)的測定將含人凝血酶(T 6769，Sigma Chem Co.，終濃度為1.4 NIH單位/ml)的100μlpH7.4的緩沖液和10μl抑制劑溶液保溫1分鐘。然后，加入100μl合并的正常檸檬酸鹽人血漿，在自動裝置(KC 10，Amelung)上測定凝結時間。
將以秒計的凝結時間對抑制劑濃度作圖，通過內推法確定IC50TT。
IC50TT為將人血漿凝血酶凝結時間加倍的抑制劑濃度。試驗B體外測定血漿中凝血酶時間以清醒的大鼠檢測口服或胃腸外給與本發(fā)明化合物后的凝血酶的抑制，這些大鼠在實驗前1或2天裝有用于從頸動脈取血的導管。在實驗當天，給與溶于乙醇∶SolutolTM∶水(5∶5∶90)的該化合物，在固定時間取血樣，裝入含有1份檸檬酸鈉溶液(0.13mol/L)和9份血液的塑料管中。將這些管離心，以獲得幾乎不含血小板的血漿。該血漿用來按下述測定凝血酶時間。
100μl檸檬酸鹽大鼠血漿用100μl0.9％的鹽水溶液稀釋，通過加入含人凝血酶(T 6769，Sigma Chem Co.，美國)的100μlpH7.4的緩沖液，開始血漿凝固。在自動裝置(KC 10，Amelung，德國)上測定凝結時間。
通過使用使合并的檸檬酸鹽大鼠血漿的凝血酶時間與溶于鹽水中的活性凝血酶抑制劑HO(O)C-CH2(R)Cgl-Aze-Pab-H(參見國際專利申請WO 94/29336)的已知濃度相聯系的標準曲線，估計大鼠血漿中上述活性凝血酶抑制劑的濃度。
在該大鼠中活性凝血酶抑制劑HO(O)C-CH2(R)Cgl-Aze-Pab-H(假定凝血酶時間的延長是由上述化合物引起的)的估計血漿濃度的基礎上，利用梯形規(guī)律并將數據無限外推，計算口服和/或胃腸外給與該藥物前體后該曲線下的面積(AUCpd)。
在口服或胃腸外給與該藥物前體后，如下計算活性凝血酶抑制劑HO(O)C-CH2(R)Cgl-Aze-Pab-H的生物利用度[(AUCpd/劑量)/(AUC活性，iv/劑量]×100這里AUC活性，iv表示按上述方法給清醒大鼠靜脈注射HO(O)C-CH2(R)Cgl-Aze-Pab-H后獲得的AUC。試驗C體外測定尿中凝血酶時間通過體外測定尿中凝血酶時間，估計口服或胃腸外給與溶于乙醇∶SolutolTM∶水(5∶5∶90)中的本發(fā)明化合物后排泄于尿中的活性凝血酶抑制劑HO(O)C-CH2(R)Cgl-Aze-Pab-H的量(假定該凝血酶時間的延長是由上述化合物引起的)。
將清醒大鼠置于代謝籠中，使得在口服本發(fā)明化合物后分別收集24小時的尿和糞便。如下對收集的尿測定該凝血酶時間。
合并的正常檸檬酸鹽人血漿(100μl)與該濃縮的大鼠尿或其鹽水稀釋液一起保溫1分鐘。然后，通過給與緩沖液(pH7.4；100μl)中的人凝血酶(T 6769，Sigma Chem Co.)，引發(fā)血漿凝固。在自動裝置(KC 10；Amelung)上測定該凝結時間。
通過使用使合并的正常檸檬酸鹽人血漿的凝血酶時間與溶于濃縮大鼠尿(或其鹽水稀釋液)中的活性凝血酶抑制劑HO(O)C-CH2(R)Cgl-Aze-Pab-H的已知濃度相聯系的標準曲線，估計大鼠尿中上述活性凝血酶抑制劑的濃度。通過用尿中上述活性抑制劑的估計平均濃度乘以24小時內大鼠尿的總生產量，可以計算該尿中排泄的該活性抑制劑的量(AMOUNTpd)。
如下計算口服或胃腸外給與藥物前體該后，活性凝血酶抑制劑HO(O)C-CH2(R)Cgl-Aze-Pab-H的生物利用度[(AMOUNTpd/劑量)/(AMOUNT活性，iv/劑量]×100這里AMOUNT活性，iv表示按上述給清醒大鼠靜脈注射HO(O)C-CH2(R)Cgl-Aze-Pab-H后在尿中排泄的量。試驗D通過LC-MS測定尿中的HO(O)C-CH2(R)Cgl-Aze-Pab-H如下所述，通過LC-MS分析測定口服或胃腸外給與溶于乙醇∶SolutolTM∶水(5∶5∶90)的本發(fā)明化合物后排泄在尿中的該活性凝血酶抑制劑HO(O)C-CH2(R)Cgl-Aze-Pab-H的量。
按以上方法C中所述，進行動物研究。收集尿樣，在分析前將其于-20℃冷凍。
按照以下方法分析尿樣的HO(O)C-CH2(R)Cgl-Aze-Pab-H含量將解凍的尿樣混合，如需要在離心機中離心。用1.0ml甲醇活化固相提取管(Analytichem Bond Elut.No.1210-2059)，用1.0ml乙腈∶水(50∶50)調節(jié)，然后用1.0ml0.1％甲酸調節(jié)。將50μl工作內標(20μmol/L)加入每個提取管中。對于尿標準，加入50μl標準溶液。將200μl樣品(或對于尿標準，加入空白尿)加入每個管中，此后通過重力或溫和真空吸出。在用1.0ml乙腈∶醋酸銨(2mmol/L)(35∶65)洗脫之前，用1.0ml醋酸銨(2mmol/L)洗出殘留尿。將收集的洗脫液轉移至自動取樣小瓶中。將30μl該提取物注射到LC柱(Hypersil BDS-C18；3μm；75mm×4.0mm內徑；Hewlett-Packard No.79926 03-354)，用具有40％乙腈和0.1％甲酸的醋酸銨緩沖液(1.3mmol/L)，以0.75ml/分鐘洗脫。分出該流出物，使得以30μl/min進入P-E Sciex API-3質譜儀的電噴霧(electrospray)離子源中。HO(O)C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab-H和HO(O)C-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab-H(內標)的保留時間都接近1.5分鐘。分別在m/z 430.2和444.2下，以單位質量分辨監(jiān)測它們的分子離子((M+H)+)。尿標準有兩個水平，一個在定量極限處，用來基于HO(O)C-CH2(R)Cgl-Aze-Pab-H與該內標峰面積比進行校準。檢查該方法在0.050-20μmol/L范圍內的直線性。變化的相關系數在1-20μmol/L下為1-2％，而在0.50μmol/L下為7％。定量的極限為0.050μmol/L。
通過將24小時內總尿生產量乘以尿中HO(O)C-CH2(R)Cgl-Aze-Pab-H的測定濃度，可以計算該尿中排泄的該活性抑制劑的量(AMOUNTpd)。然后按以上方法C中所述，計算該活性凝血酶抑制劑的生物利用度。
通過以下實施例說明本發(fā)明。實施例一般實驗步驟在備有電噴霧接口的Finnigan MAT TSQ 700三段四極質譜計上記錄質譜。
在BRUKER ACP 300和Varian UNITY加400和500分光計上測量1H NMR和13C NMR，操作的1H頻率分別為300.13、399.96和499.82 MHz，而操作的13C頻率分別為75.46、100.58和125.69 MHz。以δ單位報告化學位移。原材料的制備按照國際專利申請WO 94/29336中所述方法，制備Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H、Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H×HCl、H-(R)Aze-Pab-Z、H-(R)Aze-Pab-Z×HCl、Bn-OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z、Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-Z、Boc-(R)Cgl-Aze-OH和Pab-Z×HCl。實施例1EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH＝CH2(i)Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH＝CH2于0℃將氯甲酸烯丙酯(1.7g；14mmol)滴加到含Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H(6.1g；13mmol)的THF(125ml)和2M NaOH(70ml；140mmol)的溶液中。于0℃攪拌1h后，將反應混合物濃縮，加入水(100ml)，產生的水相用二氯甲烷(3×100ml)萃取。將合并的有機相濃縮，產生6.4g粗產物，后者通過采用EtOAc∶THF∶Et3N(68∶29∶3)作為洗脫劑的快速色譜進行純化。濃縮產生5.8g(81％)白色固體的副標題化合物。1H NMR(500 MHz，CDCl3)δ 8.19(bt，1H)，7.78(d，2H)，7.26(d，2H)，6.02-5.92(m，1H)，5.32(d，J＝17 Hz，1H)，5.18(d，J＝10 Hz，1H)，5.06(d，J＝7 Hz，1H)，4.82(bs，1H)，4.61(d，J＝6 Hz，2H)，4.58-4.48(m，1H)，4.38-4.27(m，2H)，4.14-4.03(m，1H)，3.77-3.68(m，1H)，2.60-0.90(m，24H).13C NMR(125 MHz，CDCl3)羰基和脒信號δ172.70，170.74，168.02，164.54，155.98.(ii)H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH＝CH2×2TFA于0℃將TFA(15ml)加入含Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH＝CH2(2.03g；3.65mmol，來自以上步驟(i))的二氯甲烷(15ml)溶液中。該反應混合物于周圍溫度攪拌3h后，將其濃縮產生2.8g白色固體的副標題化合物。1H NMR(500 MHz，MeOH(d4))δ7.80(d，2H)，7.57(d，2H)，6.02(m，1H)，5.45(d，J＝17 Hz，1H)，5.33(d，J＝10 Hz，1H)，5.91-4.80(m，3H)，4.56(s，2H)，4.38(bq，J＝8 Hz，1H)，3.71(d，J＝7 Hz，1H)，2.76-2.60(m，1H)，2.35-2.20(m，1H)，1.9-1.0(m，11H).(iii)EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH＝CH2將H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH＝CH2×2TFA(649mg；0.95mmol，來自以上步驟(ii))、K2CO3(656mg，4.8mmol)、水(0.1ml)和THF(10ml)的混合物于40℃攪拌2h，然后加入含溴乙酸乙酯(190mg；1.14mmol)的THF(1ml)。于40℃攪拌4h并于周圍溫度下攪拌14h后，將該反應混合物過濾、濃縮并通過采用EtOAc∶THF∶Et3N(68∶29∶3)作為洗脫劑的快速色譜純化，產生244mg(47％)白色固體的標題化合物。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ8.46(bt，1H)，7.81(d，2H)，7.35(d，2H)，6.08-5.94(m，1H)，5.35(d，J＝18 Hz，1H)，5.23(d，J＝11 Hz，1H)，4.93(dd，J＝6 and 9 Hz，1H)，4.66(d，2H)，4.62-4.38(ABX-譜的AB部分)，4.16-4.04)(m，4H)，3.20(d，2H)，2.86(d，1H)，2.64-2.45(m，2H)，2.0-1.0(m 17H).13C NMR(100 MHz，CDCl3)羰基和脒信號δ175.33，172.24，170.72，168.19，164.35.實施例2nPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH＝CH2按照實施例1(iii)所述的步驟，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH＝CH2×2TFA(503mg；0.74mmol，參見以上實施例1(ii))和溴乙酸正丙酯(160mg，0.88mmol)制備標題化合物，產生277mg(68％)的白色固體。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ8.48(bt，1H)，7.83(d，2H)，7.35(d，2H)，6.76(寬峰，1H)，6.02(m，1H)，5.37(dd，1H)，5.24(dd，1H)，4.94(t，1H)，4.67(dd，2H)，4.49(ABX-譜的AB部分，2H)，4.12(m，2H)，3.98(t，2H)，3.24(AB-系統(tǒng)，2H)，2.87(d，1H)，2.52(m，2H)，1.99(bd，2H)，1.80-1.50(m，7H)，1.61(q，2H)，1.30-1.10(m，2H)，1.00(qd，2H)，0.90(t，3H).13C-NMR(100 MHz，CDCl3)羰基和脒信號δ175.4，172.3，170.7，167.9，164.5實施例3tBuOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH＝CH2按照實施例1(iii)所述的步驟，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH＝CH2×2TFA(285mg；0.42mmol，參見以上實施例1(ii))和溴乙酸正丁酯(96mg，0.50mmol)制備標題化合物，產生93mg(39％)的白色固體。1H NMR(500 MHz，CDCl3)δ8.50(bt，1H)，7.81(d，2H)，7.36(d，2H)，6.07-5.97(m，1H)，5.36(d，J＝16 Hz，1H)，5.22(d，J＝10 Hz，1H)，4.93(dd，J＝9 and 6 Hz，1H)，4.76(d，J＝6 Hz，2H)，4.57-4.46(m，2H)，4.18-4.04(m，2H)，3.19-3.08(AB-譜，JAB＝20 Hz，2H)，2.86(d，J＝8 Hz，1H)，2.72-2.53(m，2H)，2.0-0.9(m，23H).13C NMR(100 MHz，CDCl3)羰基和脒信號δ175.28，171.53，170.76，167.81，164.1.實施例4EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOET(i)Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOEt按照實施例1(i)所述步驟，由Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H(600mg；1.3mmol)和氯甲酸乙酯(150mg；1.4mmol)制備副標題化合物，產生240mg(34％)的白色固體。1H-NMR(300 MHz，CDCl3)δ9.37(bs，1H)，8.16(bs，1H)，7.72(d，2H)，7.18(d，2H)，5.17(d，1H)，4.73(t，1H)，4.47(dd，1H)，4.27(m，2H)，4.06(q，2H)，3.66(t，1H)，2.48(m，1H)，2.37(m，1H)，1.4-1.8(m，7H)，1.22(s，9H)，1.3-0.8(m，7H).13C-NMR(75MHz，CDCl3)羰基和脒信號δ172.6，170.7，167.9，164.8，156.0(ii)H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOEt×2HCl于0℃，在5分鐘內將氯化氫加入含Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOEt(240mg；0.44mmol，來自以上步驟(i))的EtOAc(20ml)溶液中。該反應混合物于0℃攪拌1h后，將其濃縮產生225mg(100％)白色固體。1H-NMR(300 MHz，D2O)δ7.85(d，2H)，7.61(d，2H)，4.98(dd，1H)，4.60(s，1H)，4.44(p，5H)，3.90(d，1H)，2.73(m，1H)，2.37(m，1H)，2.0-1.65(m，9H)，1.39(t，3H)，1.4-1.1(m，7H)，0.98(m，1H).13C-NMR(75 MHz，D2O)羰基和脒信號δ172.7，169.4，166.8，154.3.(iii)EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOEt按照實施例1(iii)中所述步驟，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOEt×2HCl(160mg；0.31mmol，來自以上步驟(ii))和溴乙酸乙酯(52.5mg；0.31mmol)制備標題化合物。產量100mg(61％)的淡黃色粉末。1H-NMR(300 MHz，CDCl3)δ8.48(bt，1H)，7.81(d，2H)，7.38(d，2H)，4.51(ABX-譜的AB部分，2H)，4.21(q，2H)，4.15-4.05(m，4H)，3.21(AB-譜，2H)，2.86(d，1H)，2.68(m，1H)，2.53(m，1H)，1.96(bd，2H)，1.90-1.70(m，12H)，1.35(t，3H)，1.22(t，6H)，1.30-0.95(m，2H).13C-NMR(75 MHz，CDCl3)羰基和脒信號δ175.5，172.2，170.7，167.6，164.9實施例5EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nPr(i)Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nPr按照以上實施例1(i)所述步驟，用Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H(6.0g；13mmol)和氯甲酸正丙酯(1.57ml；14mmol)制備副標題化合物，產量為5.4g(76％)。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ8.25(bt，1H)，7.82(d，2H)，7.31(d，2H)，5.09(bd，1H)，4.87(dd，1H)，4.58(dd，1H)，4.39(dd，2H)，4.14(q，1H)，4.10(t，2H)，3.79(t，1H)，2.54(dm，2H)，2.21(s，1H)，1.87-1.55(m，8H)，1.33(s，9H)，1.45-1.0(m，4H)，0.99(t，3H).13C-NMR(100 MHz，CDCl3)羰基和脒信號δ172.7，170.6，167.8，165.0，155.9.(ii)H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nPr×2TFA按照實施例1(ii)所述步驟，用2.1g(3.7mmol)Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nPr(來自以上步驟(i))制備副標題化合物。產量為3.7g。1H-NMR(400 MHz，MeOH-d4)δ7.77(d，2H)，7.60(d，1H)，4.86(dd，1H)，4.56(ABX-譜的AB部分，2H)，4.33(m，4H)，3.72(d，1H)，3.30(m，1H)，2.68(m，1H)，2.28(m，1H)，1.9-1.7(m，9H)，1.4-1.1(m，6H)，1.02(t，3H).13C-NMR(100 MHz，MeOH-d4)羰基和脒信號δ172.7，169.3，168.0，161.4.(iii)EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nPr按照實施例1(iii)中所述步驟，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nPr×2TFA(472mg；0.69mmol，來自以上步驟(ii))和溴乙酸乙酯(138mg；0.83mmol)制備標題化合物，產生0.22mg(58％)的白色固體。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ8.46(bt，1H)，7.82(d，2H)，7.32(d，2H)，4.92(dd，1H)，4.49(ABX-譜的AB部分，2H)，4.10(m，6H)，3.23(AB-譜，2H)，2.80(dm，2H)，1.98(bd，2H)，1.74(q，2H)，1.63(dd，2H)，1.52(m，1)，1.21(t，3H)，1.20-1.10(m，2H)，0.98(t，3H).13C-NMR(100 MHz，CDCl3)羰基和脒信號δ175.3，172.2，170.7，167.6，164.8.實施例6MeOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nPr按照以上實施例1(iii)中所述步驟，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nPr×2TFA(365mg；0.53mmol，參見以上實例5(ii))和溴乙酸甲酯(98mg；O.64mmol)制備標題化合物，產生114mg(41％)的白色固體。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)δ8.44(bt，1H)，7.82(d，2H)，7.32((d，2H)，7.04(寬峰1H)，4.92(dd，1H)，4.49(ABX-譜的AB部分)，4.12(m，2H)，4.10(t，2H)，3.63(s，3H)，3.24(s，2H)，2.87(d，1H)，2.65(m，1H)，2.52(m，1H)，2.01(寬峰，1H)，1.96(bd，2H)，1.75(q，4H)，1.63(bdd，1H)，1.53(m，1H)，1.3-1.1(m，5H)，0.99(t，3H).13C-NMR(100 MHz，CDCl3)羰基和脒信號δ175.3，172.5，170.7，167.7，165.0.實施例7EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH2OMe(i)Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH2OMe按照以上實施例1(i)所述步驟，由Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H(6.0g；13mmol)和氯甲酸2-甲氧基乙酯(1.94g；14mmol)制備副標題化合物。產量為3.9g(34％)。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ8.24(bt，1H)，7.83(d，2H)，7.31(d，2H)，5.08(bd，1H)，4.87(dd，1H)，4.58(dd，1H)，4.39(dd，2H)，4.30(t，2H)，4.15(m，1H)，3.79(bt，1H)，3.68(t，2H)，3.40(s，3H)，2.65-2.45(m，2H)，2.20(寬峰，1H)，1.9-1.55(m，6H)，1.34(s，9H)，1.3-0.95(m，6H).13C-NMR(100 MHz，CDCl3)羰基和脒信號δ172.7，170.7，167.8，164.6，155.9.(ii)H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH2OMe×2TFA按照以上實施例1(ii)的所述步驟，用1.71gBoc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH2OMe(來自以上步驟(i))制備副標題化合物。產量為1.89g(88％)。1H-NMR(400 MHz，MeOH-d4)δ7.77(d，2H)，7.59(d，2H)，4.85(dd，1H)，4.56(d，2H)，4.49(m，2H)，4.37(m，1H)，4.28(m，1H)，3.70(m，3H)，3.37(s，3H)，2.68(m，1H)，2.28(m，1H)，1.9-1.7(m，7H)，1.4-1.1(m，6H).13C-NMR(100 MHz，MeOH-d4)羰基和脒信號δ172.7，169.3，168.0，154.6.(iii)EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH2OMe按照以上實施例1(iii)中所述步驟，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH2OMe×2TFA(487mg；0.69mmol，來自以上步驟(ii))和溴乙酸乙酯(138mg；O.83mmol)制備標題化合物，產生粗產物，后者通過采用THF∶二氯甲烷(3∶1)作為洗脫劑的快速色譜進行純化。產量為0.13mg(34％)的白色粉末。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ8.46(bt，1H)，7.83(d，2H)，7.32(d，2H)，7.21(寬峰，1H)，4.92(dd，1H)，4.49(ABX-譜的AB部分，2H)，4.30(t，2H)，4.12(q，2H)，4.07(q，2H)，3.68(t，1H)，3.40(s，3H)，3.24(s，2H)，2.62(m，1H)，2.52(m，1H)，2.07(寬峰，1H)，1.97(bd，1H)，1.8-1.5(m，5H)，1.3-1.1(m，6H)，1.05-0.95(m，2H).13C-NMR(100 MHz，CDCl3)羰基和脒信號δ175.3，172.2，170.7，167.8，164.6.實施例8MeOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH2OMe按照以上實施例1(iii)中所述步驟，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH2OMe×2TFA(490mg；0.7mmol，參見以上實施例7(ii))和溴乙酸甲酯(128mg；0.84mmol)制備標題化合物，產生粗產物，后者通過采用THF∶二氯甲烷(3∶1)作為洗脫劑的快速色譜進行純化。產量為155mg(41％)的白色粉末。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ8.44(t，1H)，7.83(d，2H)，7.31(d，2H)，4.92(dd，1H)，4.49(ABX-譜的AB部分，2H)，4.30(t，2H)，4.13(m，2H)，3.68(t，2H)，3.63(s，3H)，3.39(s，3H)，3.25(s，2H)，2.87(d，1H)，2.62(m，1H)，2.52(m，1H)，1.96(bd，1H)，1.8-1.5(m，6H)，1.3-1.1(m，5H)，1.00(q，2H).13C-NMR(100 MHz，CDCl3)羰基和脒信號δ175.2，172.6，170.7，167.8，164.5.實施例9EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nBu(i)Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nBu按照實施例1(i)所述步驟，由Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H(1.01g；2.1mmol)和氯甲酸正丁酯(0.32g；2.4mmol)制備副標題化合物。于周圍溫度下攪拌1.5h后，將該反應混合物濃縮，并用三份二氯甲烷萃取。然后合并的有機相用水洗滌，通過Na2SO4干燥并濃縮，產生1.0g(83％)白色粉末的副標題化合物。1H-NMR(300 MHz，CDCl3)δ9.81-9.31(bs，1H)，8.36-8.20(m，1H)，7.35(d，2H)，7.84(d，2H)，6.78-6.43(bs，1H)，5.05-4.82(m，2H)，4.69-4.15(m，3H)，4.15-4.08(m，3H)，3.86-3.70(m，1H)，2.68-2.42(m，2H)，1.92-0.88(m，25H).13C-NMR(125 MHz，CDCl3)羰基和脒信號δ172.5，170.7，167.9，164.9，156.0.FAB-MS(m+1)＝572(m/z)(ii)H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nBu×2HCl按照實施例4(ii)所述步驟，由Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nBu(2.5g；4.4mmol，來自以上步驟(i))制備副標題化合物，產生2.4g(100％)的白色粉末。1H-NMR(300 MHz，MeOH-d4)δ7.78-7.60(m，2H)，4.66-4.49(m，2H)，0.98(t，2H)，4.49-4.35(m，3H)，4.35-4.22(m，1H)，3.75(d，1H)，1.92-1.67(m，8H)，1.56-1.07(m，8H).其中一個質子信號被CD3OH信號所掩蓋13C-NMR(100 MHz，MeOH-d4)羰基和脒信號δ172.7，169.3，167.9，154.7MS(m+1)＝472(m/z)(iii)EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nBu按照實施例1(iii)中所述步驟，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nBu×2HCl(400mg；0.74mmol)和溴乙酸乙酯(147mg；0.88mmol)制備標題化合物。該產物通過用二氯甲烷和EtOH(梯度0.1％＝＞12.8％)作為洗脫劑的快速色譜進行純化，產生290mg(70％)的白色固體。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ9.70-9.36(bs，1H)，8.47(t，1H)，7.81(d，2H)，7.32(d，2H)，7.07-6.73(bs，1H)，4.97-4.87(dd，1H)，4.62-4.35(m，2H)，4.20-3.98(m，6H)，3.27-3.12(m，2H)，2.84(s，1H)，2.70-2.40(m，2H)，2.03-0.85(m，22H)13C-NMR(75MHz，CDCl3)羰基和脒信號δ175.3，172.3，170.8，167.9，165.0FAB-MS(m+1)＝558(m/z)實施例10PrlC(O)CH2CH2CH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(i)PrlC(O)CH2CH2CH2OH將γ-丁內酯(4.0g；46.5mmol)和吡咯烷(6.6g；92.8mmol)的混合物于室溫下攪拌2.5h。真空濃縮該產物，產生14.5g(100％)的黃色油產物。1H-NMR(300MHz，MeOH-d4)δ3.58(t，2H)，3.50(t，2H)，3.40(t，2H)，2.42(t，2H)，2.06-1.75(m，6H)(ii)PrlC(O)CH2CH2CH2OOCCH2Br于0℃將溴乙酰溴(4.0ml；45.8mmol)滴加到含PrlC(O)CH2CH2CH2OH(7.2g；45.8mmol；來自以上步驟(i))和DMAP(5.6g，45.8mmol)的二氯甲烷的混合物中。于室溫下攪拌1.5h后，加入另1份溴乙酰溴(1.0ml，11.4mmol)和DMAP(1.4g，11.4mmol)，反應回流1.5h。加入水，用二氯甲烷萃取3次。該有機相用Na2SO4干燥并濃縮，產生10.3g(81％)的黃色油產物。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ4.15(t，2H)，3.75(s，2H)，3.40-3.31(m，4H)，2.30(t，2H)，1.98-1.83(m，4H)，1.81-1.73(m，2H)(iii)PrlC(O)CH2CH2CH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)按照實施例1(iii)中所述步驟，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(6g；10.4mmol)和PrlC(O)CH2CH2CH2OOCCH2Br(3.5g；12.4mmol；來自以上步驟(ii))制備標題化合物。該粗產物通過用庚烷∶EtOAc∶異丙醇(1∶2∶2)作為洗脫劑的快速色譜進行純化，產生4.2g，然后后者采通過制備型RPLC，用含44％乙腈的0.1M NH4OAc作為洗脫劑進行純化，產生2.64g(36％)的白色固體產物。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)δ9.80-9.22(b s，1H)，8.36(t，1H)，7.96-7.58(m，3H)，7.45(d，2H)，7.37-7.22(m，5H)，5.20(s，2H)，4.95-4.88(dd，1H)，4.72-4.29(m，2H)，4.15-4.04(m，2H)，4.04-3.88(m，2H)，3.40(t，2H)，3.34(t，2H)，3.28-3.17(m，2H)，2.85(d，1H)，2.67-2.48(m，1H)，2.23(t，2H)，2.14-0.93(m，18H).13C-NMR(125 MHz，CDCl3)羰基和脒信號δ175.3，172.4，170.9，170.4，168.2，164.6FAB-MS(m+1)＝703(m/z)實施例11ChNHC(O)CH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(i)ChNHC(O)CH2OH將環(huán)己胺(9.9g；99.8mmol)和2，5-二氧-1，4-二噁烷(3.0g；25.9mmol)的混合物于100℃攪拌2.5h。將該產物濃縮，產生8.1g(100％)的棕色固體產物。1H-NHR(500 MHz，MeOH-d4)δ3.92(s，2H)，3.75-3.65(m，1H)，1.90-1.58(m，5H)，1.43-1.07(m，5H)。其中兩個質子被CD3OH信號信號所掩蓋。13C-NHR(125 MHz，MeOH-d4)脒和羰基信號δ174.0，62.5，33.7，26.5，26.1，26.0。其中一個碳信號被CD3OH信號所掩蓋。(ii)ChNHC(O)CH2OOCCH2Br將溴乙酰溴(4.0ml；45.8mmol)于0℃滴加到含ChNHC(O)CH2OH(8.0g；50.9mmol；來自以上步驟(i))和DMAP(6.2g；50.9mmol)的二氯甲烷(80ml)的混合物中。于室溫下攪拌1.5h后，加入另一份溴乙酰溴(1.0ml，11.4mmol)和DMAP(1.4g，11.4mmol)，將該反應混合物回流1.5h。加入水，該水相用三份二氯甲烷萃取。該有機相用水洗滌，用Na2SO4干燥并濃縮，產生10.3g(73％)的棕色固體產物。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ6.12-6.00(bs，1H)，4.62(s，2H)，3.90(s，2H)，3.84-3.76(m，1H)，1.95-1.86(m，2H)，1.75-1.65(m，2H)，1.65-1.56(m，1H)，1.43-1.29(m，2H)，1.24-1.10(m，3H).(iii)ChNHC(O)CH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z按照實施例1(iii)中所述的相似步驟，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(6g；10.4mmol)和ChNHC(O)CH2OOCCH2Br(3.5g；12.4mmol；來自以上步驟(ii))開始，制備標題化合物。該粗產物通過用庚烷∶EtOAc∶異丙醇(5∶2∶2)作為洗脫劑的快速色譜進行純化，隨后濃縮，然后通過制備型RPLC，采用含50％乙腈的0.1M NH4OAc作為洗脫劑。濃縮和冷凍干燥產生2.6g(36％)的白色固體產物。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)δ9.78-9.25(bs，1H)，7.90(t，1H)，7.78(d，2H)，7.44(d，2H)，7.38-7.24(m，5H)，6.66(t，1H)，5.20(s，2H)，4.90-4.83(dd，1H)，4.60-4.45(m，2H)，4.18-3.93(m，4H)，3.73-3.62(m，1H)，(d，1H)，3.23，3.44(AB，2H)，2.87，2.65-2.08(m，3H)，1.98-0.93(m，22H)13C-NMR(125 MHz，CDCl3)羰基和脒信號δ175.1，171.7，170.7，168.8，166.1，164.4FAB-MS(m+1)＝703(m/z)實施例12(nPr)2NC(O)CH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCC(CH3)3(i)(nPr)2NC(O)CH2OH將2，5-二氧-1，4-二噁烷(2.02g；17.4mmol)和二正丙胺(5ml；36.5mmol)的混合物于50℃加熱1h，于90℃加熱66h。加入甲苯，隨后真空除去過量的二正丙胺。殘留物通過采用含10％甲醇的二氯甲烷作為洗脫劑的快速色譜進行純化，產生4.18g(66％)的所需化合物。1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ4.1(d，2H)，3.65(t，1H)，3.25-3.35(m，2H)，2.9-3.0(m，2H)，1.45-1.6(m，4H)，0.8-0.95(m，6H)(ii)(nPr)2NC(O)CH2OOCCH2Br將含(nPr)2NC(O)CH2OH(0.743g；4.7mmol；來自以上步驟(i))、DCC(0.951g；4.6mmol)和溴乙酸(0.704g；5.1mmol)的二氯甲烷(15ml)的混合物于室溫下攪拌1.5h。通過過濾除去沉淀，并從濾液中真空除去該溶劑。該殘留物的Kugelrohr蒸餾產生0.66g(50％)的所需化合物。1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ4.8(s，2H)，4.0(s，2H)，3.2-3.3(m，2H)，3.05-3.15(m，2H)，1.5-1.7(m，4H)，0.8-1.0(dt，6H)(iii)新戊酸基甲基4-硝基苯基碳酸酯將新戊酸銀(7.5g；25mmol)和碘甲基4-硝基苯基碳酸酯(Alexander等，J.Med.Chem.，(1988)31，318；7.99g；25mmol)的混合物在苯(50ml)中回流2h。真空除去苯，將該殘留物溶于甲苯中。通過hyflo過濾并通過采用甲苯作為洗脫劑的快速色譜進行純化，提供4.00g(54％)副標題化合物。1H NMR(300 MHz；CDCl3)δ8.25(d，2H)，7.40(d，2H)，5.85(s，2H)，1.2(s，2H)13C NMR(75 MHz，CDCl3)羰基和脒信號δ176.77，155.06(iv)Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCC(CH3)3于室溫下，將含新戊酰基甲基4-硝基苯基碳酸酯(1.18g；4mmol；來自以上步驟(iii)的二氯甲烷(20ml)溶液加入含Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H(1.88g；4mmol)和三乙胺(0.66ml；4.75mmol)的二氯甲烷(20ml)溶液中。1h后，用EtOAc替代二氯甲烷，該混合物通過采用EtOAc作為洗脫劑的快速色譜進行純化，產生1.27g(50％)的副標題化合物。1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ9.5(bs，1H)，8.25(t，1H)，7.8(d，2H)，7.3(d，2H)，7.0(bs，1H)，5.0-4.8(m，2H)，4.65-4.5(m，1H)，4.5-4.3(m，2H)，4.2-4.05(m，1H)，3.75(t，1H)，2.7-2.4(m，2H)，1.9-1.45(m，5H)，1.45-0.8(m，24H)(v)H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCC(CH3)3將Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCC(CH3)3(327mg；0,52mmol；來自以上步驟(iv))溶于二氯甲烷(5ml)和TFA(1.2ml)的混合物中。2h后，將該反應混合物真空濃縮，加入乙腈，再真空除去該溶劑，產生副標題粗產物，后者不用進一步純化而用于下一步驟。(vi)(nPr)2NC(O)CH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCC(CH3)3將來自以上步驟(v)的殘留物與含(nPr)2NC(O)CH2OOCCH2Br(150mg；0.53mmol；來自以上步驟(ii))和K2CO3(480mg；3.5mmol)在THF(5ml)中混合，并于40℃加熱3h。將該反應混合物過濾并濃縮為粗產物，后者通過制備型RPLC純化，產生78mg(21％)的標題產物。1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ9.3-9.6(bs，1H)，8.5(m，1H)，7.95-8.15(bs，1H)，7.85-7.95(d，2H)，7.2-7.3(d，2H)，5.8(s，2H)，4.8-4.9(dd，1H)，4.5-4.7(m，3H)，4.0-4.4(m，3H)，2.8-3.4(m，5H)，2.2-2.7(m，3H)，1.75-1.3(m，9H)，1.3-1.0(m，14H)，1.0-0.7(m，7H).13C NMR(75 MHz，CDCl3)羰基和脒信號δ177.24，175.30，171.85，170.79，168.78，165.82，163.14.實施例13EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCC(CH3)3與以上實施例12(vi)中所述步驟相似，由粗品Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCC(CH3)3(0.41g；0.65mmol；來自以上實施例12(iv))，采用乙腈(10ml)作為溶劑，制備標題化合物。于室溫下過夜攪拌后，真空除去該溶劑，將該殘留物在EtOAc和水之間分配。水相用EtOAc萃取3次，將合并的有機相干燥(Na2SO4)，真空除去該溶劑。將該殘留物經過采用二氯甲烷/甲醇作為洗脫劑的快速色譜。從冰醋酸中冷凍干燥，產生84mg(21％)的標題化合物。1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ9.9(bs，1H)，8.5(t，1H)，7.35(d，2H)，5.85(s，2H)，5.90(dd，2H)，4.6-4.35(m，2H)，4.15-4.0(m，4)，3.2(s，2H)，2.85(d，1H)，2.7-2.45(m，2)，2.0-1.9(m，2H)，1.8-1.45(m，5H)，1.3-0.9(m，18H).13C NMR(75 MHz，CDCl3)羰基和脒信號δ177.23，175.48，172.29，170.80，168.85，163.14.實施例14EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH(CH3)OOCCH3(i)Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH(CH3)OOCCH3于室溫下，將含Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H(6.38g；13.5mmol)、1-乙酸基乙基4-硝基苯基碳酸酯(Alexander等，J.Med.Chem.，(1988)31，318)(3.05g；12mmol)和三乙胺(1.95ml；14mmol)的二氯甲烷(40ml)溶液攪拌16h，然后加入EtOAc。將產生的溶液稍微濃縮，并用Na2CO3水溶液(10％)洗滌，將其濃縮為粗產物，后者通過采用EtOAc作為洗脫劑的快速色譜進行純化，產生5.59g(77％)的副標題化合物。1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ9.5(bs，1H)，8.25(t，1H)，7.85(d，2H)，7.35(d，2H)，6.95(q，1H)，6.7(bs，1H)，5.0-4.85(m，2H)，4.65-4.5(m，1H)，4.5-4.25(m，2H)，4.2-4.05(m，1H)3.75(t，1H)，2.65-2.45(m，2H)2.05(s，3H)，1.9-1.45(m，11H)，1.45-0.8(m，12H).13C NMR(75 MHz，CDCl3)羰基和脒信號δ172.61，170.80，169.54，168.91，162.50，156.02.(ii)H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH(CH3)OOCCH3按照以上實施例12(v)中所述步驟，由Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH(CH3)OOCCH3(2.21g；3.68mmol；來自以上步驟(i))制備副標題粗產物。(iii)EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH(CH3)OOCCH3將來自以上步驟(ii)的粗品H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH(CH3)OOCCH3溶于二氯甲烷(150ml)中。該混合物用10％Na2CO3溶液洗滌，該有機相用K2CO3干燥并過濾。將含K2CO3(756mg；5.5mmol)和(O-三氟甲磺酰基)-羥乙酸乙酯(790mg；3.3mmol)的二氯甲烷(5ml)加入該產生的溶液中。該反應混合物于室溫下攪拌5-10分鐘，然后真空濃縮。將該殘留物溶于EtOAc中，產生的混合物通過C鹽過濾。將濾液經過采用EtOAc作為洗脫劑的快速色譜，然后通過HPLC，產生475mg(22％)的標題化合物。1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ9.5(bs，1H)，8.3(t，1H)，7.7(d，2H)，7.2(d，2H)，6.85(q，1H)，4.8(t，1H)，4.45-4.25(m，2H)，4.1-3.85(m，4H)，3.1(s，2H)，2.75(s，1H)，2.5-2.3(m，2H)，1.95(s，3H)，1.9-1.8(m，1H)，1.7-1.25(m，8H)，1.25-1.75(m，8H).13C NMR(75.5 MHz，CDCl3)羰基和脒信號δ175.26，172.34，170.81，169.49，168.80，162.43.實施例15MeOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh(i)Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh于20℃在45分鐘內，將溶于THF(10ml)的過氧化二苯甲酰(556mg；2.3mmol)滴加到含Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H(1.0g；2.1mmol)和Na2HPO4(18.7g；105mmol)的THF(45ml)溶液中。于20℃攪拌24h后，將該反應混合物濃縮，將產生的粗產物經過制備型RPLC。產生124mg(10％)白色固體的副標題化合物。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)δ8.26(m，1H)，8.09(m，2H)，7.72(m，2H)，7.59(m，1H)，7.48(m，2H)，7.36(d，2H)，5.13(s，2H)，4.87-4.98(m，2H)，4.54-4.61(m，1H)，4.33-4.47(m，2H)，4.13-4.19(m，1H)，3.81(t，1H)，2.53-2.63(m，2H)，1.73-1.86(m，3H)，1.66-1.72(m，2H)，1.36(s，9H)，0.968-1.28(m，6H).13C-NMR(100 MHz，CDCl3)羰基和脒信號δ172.7，170.6，163.9，157.0，155.9.LC-MSm/z 592(M+H+)；m/z 614(M+Na+).(ii)H-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh于20℃將TFA(6ml)加入含Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh(600mg；1.01mmol；來自以上步驟(i))的二氯甲烷(18ml)溶液中。攪拌14h后，將該反應混合物濃縮，將產生的粗產物在EtOAc0.1M NaOH之間分配。進行相分離，將有機層干燥(Na2SO4)并蒸發(fā)。產量480mg(96％)白色固體。1H-NMR(400 MHz，MeOH-d4)δ8.18(m，2H)，7.77(m，2H)，7.64(m，1H)，7.52(m，2H)，7.43(d，2H)，4.75-4.81(m，1H)，4.50(s，2H)，4.18-4.34(m，2H)，3.12(d，1H)，2.57-2.68(m，1H)，2.23-2.33(m，1H)，1.88-1.96(m，1H)，1.73-1.84(m，2H)，1.59-1.71(m，2H)，1.45-1.57(m，1H)，0.80-1.34(m，5H)LC-MSm/z 492(M+H+)；m/z 514(M+Na+)(iii)MeOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh于20℃將溴乙酸甲酯(177mg；1.16mmol)加入含H-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh(480mg；0.97mmol；來自以上步驟(ii))、K2CO3(270mg；2mmol)的乙腈(5ml)溶液中。該反應于20℃攪拌4h。將該反應混合物過濾并濃縮，產生粗產物，后者通過制備型RPLC純化，產生269mg(49％)白色固體的標題化合物。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)δ8.43(m，1H，NH)，8.09(m，2H)，7.69(m，2H)，7.59(m，1H)，7.47(m，2H)，7.34(m，2H)，5.27(s，2H)，4.93(dd，1H)，4.59(dd，1H)，4.40(dd，1H)，4.12(m，2H)，3.65(s，3H)，2.87(d，1H)，2.72-2.63(m，1H)，2.55-2.48(m，1H)，1.96(m，1H)，1.74(m，2H)，1.67(d，1H)，1.59(d，1H)，1.56-1.50(m，1H)，1.29-1.08(m，4H)，1.04-0.94(m，1H)13C-NMR(100 MHz，CDCl3)羰基和脒信號δ175.1，172.5，170.6，164.0，157.1LC-MSm/z 564(M+H+)實施例16MeOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH于20℃下，將KOMe(1.6ml；0.29M；0.46mmol)加入含MeOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OC(O)Ph(260mg；0.46mmol；參見以上實施例15(iii))的THF(4.6ml)溶液中。攪拌15分鐘后，將該混合物濃縮并經過制備型RPLC。產生109mg(52％)白色固體的標題化合物。1H-NMR(500 MHz，MeOH-d4)δ7.59(d，2H)，7.34(d，2H)，4.83(s，2H)，4.82-4.76(m，1H)，4.48(d，1H)，4.33(d，1H)，4.15-4.30(m，2H)，3.64(s，3H)，3.04(d，1H)，2.57(m，1H)，2.26(m，1H)，1.95(m，1H)，1.75(m，2H)，1.58-1.70(m，2H)，1.53(m，1H)，1.31-1.10(m，4H)，1.04(m，1H)13C-NMR(100 MHz，MeOH-d4)羰基和脒信號δ175.9，174.3，172.7，155.2LC-MSm/z 460(M+H+)，m/z 482(M+Na+)實施例17EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH向EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-C(O)OCH(CH3)OOCCH3(184mg；0.31mmol；參見以上實施例14(iii))溶液中加入含鹽酸羥胺(120ml；1.72mmol)和三乙胺(0.8ml；5.7mmol)的EtOH(95％；4.0ml)，并將該混合物于室溫下攪拌4天。將該混合物濃縮，該粗產物經過制備型RPLC。產生85mg(58％)的標題化合物。1H-NMR(300 MHz，CD3OD)δ7.6(d，2H)，7.35(d，2H)，4.75-4.85(m，1H)，4.4-4.55(m，2H)，4.0-4.35(m，4H)，3.35(d，2H)，3.05(d，1H)，2.5-2.65(m，1H)，2.2-2.35(m，1H)，1.9-2.05(m，1H)，1.4-1.85(m，5H)，0.85-1.35(m，8H)13C-NMR(75.5 MHz，CD3OD)羰基和脒信號δ175.97，173.91，172.72，155.23LC-MS(m+1)＝474(m/z)實施例18BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH將BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(1.0g；1.52mmol)加入含鹽酸羥胺(320ml；4.59mmol)和三乙胺(1.7ml；12.24mmol)的EtOH溶液中。將該反應混合物攪拌40h，然后濃縮。該粗產物通過制備型RPLC，采用含50％乙腈的0.1M NH4OAc作為洗脫劑進行純化，產生0.34g(42％)的標題化合物。LC-MS(m+1)＝536(m/z)實施例19nPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z與實施例1(iii)中所述步驟類似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z×2HCl(700mg；1.2mmol)和溴乙酸正丙酯(268mg；1.45mmol)制備標題化合物。產量為259mg(35％)。FAB-MS(m+1)＝606(m/z)實施例20nPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH與實施例18中所述步驟類似，由nPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(182mg；0.3mmol；參見以上實施例19)制備標題化合物。該粗產物通過制備型RPLC，采用含40％乙腈的0.1M NH4OAc作為洗脫劑進行純化，產生74mg(51％)的所需化合物。LC-MS(m+1)＝488(m/z)實施例21iPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH與實施例18中所述步驟類似，由iPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(590mg；0.7mmol；參見以下實施例39)制備標題化合物。產量為110mg(32％)。LC-MS；(m+1)＝488(m/z)實施例22tBuOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH與實施例18中所述步驟類似，由tBuOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(738mg；1.2mmol；參見以下實施例37)制備標題化合物。產量為290mg(48％)。LC-MS(m+1)＝502(m/z)實施例23(nPr)2NCOCH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH(i)HOOCCH2-(R)Cgl(Boc)-Aze-Pab-O-Boc將含HOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH(670mg；1.5mmol；參見以下實施例28)、(Boc)2O(654mg；3mmol)和DMAP(92mg；0.75mmol)的THF∶水(10∶1)的溶液于室溫下攪拌2h。將該反應混合物濃縮，并通過制備型RPLC純化。冷凍干燥產生112mg(12％)白色固體的副標題化合物。LC-MS(m-1)＝643(m/z)(ii)(nPr)2NCOCH2OOCCH2-(R)Cgl(Boc)-Aze-Pab-O-Boc將含HOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-O-Boc(100mg；0.15mmol；參見以上步驟(i))、(nPr)2NCOCH2OH(27mg；0.17mmol；參見以上實施例12(i))、EDC(40mg；0.21mmol)和DMAP(10mg；0.075mmol)的乙腈(5ml)溶液于室溫下攪拌4天。將該反應混合物濃縮，通過制備型RPLC純化并冷凍干燥，產生21mg(18％)的副標題化合物。LC-MS(m-1)＝787(m/z)(iii)(nPr)2NCOCH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH將含(nPr)2NCOCH2-(R)Cgl(Boc)-Aze-Pab-O-Boc(20mg；0.025mmol)的TFA∶二氯甲烷(1∶1)溶液于室溫下攪拌5分鐘。將該反應混合物濃縮并從乙腈和水中冷凍干燥，產生5mg(34％)的標題化合物。LC-MS(m+1)＝587(m/z)實施例24ChNHCOCH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH與實施例18中所述步驟類似，由ChNHCOCH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(118mg；0.17mmol；參見以上實施例11(ii))制備標題化合物。產量為1.8mg。LC-MS(m+1)＝585(m/z)實施例25MeNHCOCH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH與實施例18中所述步驟類似，由MeNHCOCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(81mg；0.12mmol；參見以下實施例36)制備標題化合物。產量為10mg(16％)。LC-MS(m+1)＝517(m/z)實施例26EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OAc(i)H-(R)Cgl-Aze-Pab-OAc與以下實施例27(步驟(i)、(ii)和(iii))中所述方法類似，用乙酸酐代替丙酸酐，制備副標題化合物。LC-MS(m+1)＝430(m/z)(ii)EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OAc與以上實施例1(iii)中所述步驟類似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-OAc(370mg；0.6mmol)和溴乙酸乙酯(105mg；0.63mmol)制備標題化合物。產量為67mg(22％)。LC-MS(m+1)＝516(m/z)實施例27EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OC(O)Et(i)Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-OH將Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(1.0g；1.52mmol)加入含鹽酸羥胺和三乙胺的EtOH溶液中。將該反應混合物于室溫下攪拌40小時，然后將其濃縮。該粗產物通過制備型RPLC純化。LC-MS(m+1)＝488(m/z)(ii)Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-OC(O)Et將含Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-OH(500mg；0.91mmol；來自以上步驟(i))和丙酸酐(3.5ml)的溶液于室溫下攪拌45分鐘，然后濃縮。該粗產物通過制備型RPLC采用含50％乙腈的0.1M NH4OAc作為洗脫劑進行純化，產生266mg(54％)的副標題化合物。LC-MS(m+1)＝544(m/z)(iii)H-(R)Cgl-Aze-Pab-OC(O)Et與實施例1(ii)中所述步驟類似，由Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-OC(O)Et(238mg；0.44mmol；來自以上步驟(ii))制備副標題化合物。產量為290mg(100％)。LC-MS(m+1)＝444(m/z)(iv)EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OC(O)Et于0℃將EtOOCCH2OSO2CF3(105mg；0.45mmol，由含triflicanhydride和羥乙酸乙酯制備)滴加到H-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCEt(300mg；0.45mmol；來自以上步驟(iii))和K2CO3(308mg；2.23mmol)的二氯甲烷溶(6ml)液中。于室溫下將該反應混合物攪拌1h后，用水、檸檬酸和水洗滌該反應混合物，將其干燥(Na2SO4)并濃縮。該粗產物通過制備型RPLC，采用含45％乙腈的0.1M NH4OAc作為洗脫劑進行純化，產生63mg(27％)的標題化合物。LC-MS(m+1)＝530(m/z)實施例28HOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH(i)tBuOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh與實施例1(iii)中所述步驟類似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh(250mg；0.5mmol；參見以上實施例15(ii))和溴乙酸叔丁酯(119mg；0.6mmol)制備副標題化合物。產量為211mg(69％)。LC-MS(m+1)＝606(m/z)(iii)HOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh與實施例1(ii)中所述步驟類似，由tBuOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh(233mg；0.3mmol；來自以上步驟(i))制備副標題化合物。產量為65mg(37％)。LC-MS(m+1)＝550(m/z)(iii)HOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pa-OH將含HOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh(60mg；0.1mmol；來自以上步驟(ii))和KOMe(0.2M；0.2mmol)的THF(10ml)和甲醇(1.5ml)的溶液于室溫下攪拌5分鐘。將該反應混合物濃縮并從水和乙腈中冷凍干燥，產生28mg(63％)標題化合物。LC-MS(m+1)＝446(m/z)實施例29HOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-O-順式十八基(i)tBuOOCCH2-(R)Cgl(Boc)-Aze-Pab-Z將含tBuOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(1.7g；2.8mmol；參見以下實施例37)、(Boc)2O(672mg；3.08mmol)和DMAP(68mg；0.56mmol)的THF(30ml)溶液于室溫下攪拌24h。于5℃加入額外的(Boc)2O(305mg；1.4mmol)。再過24h后，將該反應混合物濃縮并通過制備型RPLC純化，產生587mg(30％)的所需化合物。EC-MS(m+1)＝720(m/z)(ii)tBuOOCCH2-(R)Cgl(Boc)-Aze-Pab-OH與實施例18中所述步驟類似，由tBuOOCCH2-(R)Cgl(Boc)-Aze-Pab-Z(580mg；0.8mmol；來自以上步驟(i))制備副標題化合物。產量為341mg(71％)。EC-MS(m+1)＝602(m/z)(iii)tBuOOCCH2-(R)Cgl(Boc)-Aze-Pab-O-順式十八基將含tBuOOCCH2-(R)Cgl(Boc)-Aze-Pab-OH(340mg；0.56mmol；來自以上步驟(ii))、順式十八基氯(170mg；0.56mmol)和三乙胺(62mg；0.61mmol)的二氯甲烷溶液攪拌5分鐘。將該反應混合物濃縮并通過制備型RPLC純化，產生326mg(67％)副標題化合物。EC-MS(m+1)＝867(m/z)(iv)HOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-O-順式十八基與實施例1(ii)中所述步驟類似，由tBuOOCCH2-(R)Cgl(Boc)-Aze-Pab-O-順式十八基(223mg；0.25mmol；來自以上步驟(iii))制備標題化合物。LC-MS(m+1)＝710(m/z)實施例30環(huán)辛基-OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(i)溴乙酸環(huán)辛酯將環(huán)辛醇(1.3g；10mmol)和DMAP(0.3g)溶于二氯甲烷中，然后加入溴乙酰氯(1ml；12mmol)。攪拌18h后，該反應混合物用Na2CO3水溶液(2M)和HCl(1M)洗滌、干燥、濃縮并采用石油醚∶二氯甲烷(50∶50)通過快速色譜純化，產生1.8g(72％)副標題化合物。(ii)環(huán)辛基-OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z與實施例1(iii)中所述步驟類似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z×2HCl(703mg；1.2mmol)和溴乙酸環(huán)辛酯(363mg；1.46mmol；來自以上步驟(i))制備標題化合物。產量為379mg(46％)。FAB-MS(m+1)＝674(m/z)實施例31tBuCH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z與實施例1(iii)中所述步驟類似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z×2HCl(2.5g；4.3mmol)和溴乙酸叔丁基甲酯(1.08g；5.2mmol)制備標題化合物。產量為1.87g(69％)。FAB-MS(m+1)＝634(m/z)實施例32(2-Me)BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(i)溴乙酸甲基芐酯與實施例30(i)中所述步驟類似，由2-甲基芐醇(5g；41mmol)和溴乙酰氯(12.6g；80mmol)制備副標題化合物。產量為8.2g(82％)。(ii)(2-Me)BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z與實施例1(iii)中所述步驟類似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z×2HCl(580mg；1mmol)和溴乙酸2-甲基芐酯(290mg；1.2mmol；來自以上步驟(i))制備標題化合物。產量為30mg(4.5％)。LC-MS(m+1)＝668(m/z)實施例33ChCH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z將含BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(1.41g；1.7mmol)和環(huán)已基甲基醇(6ml)的三乙胺(474μl)和二氯甲烷(3ml)的溶液回流4天。處理該反應混合物，產生粗產物，后者通過采用二氯甲烷∶甲醇(95∶5)作為洗脫劑的快速色譜進行純化，產生801mg(71％)的標題化合物。FAB-MS(m+1)＝660(m/z)實施例34ChOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(i)溴乙酸環(huán)己酯與實施例32(i)中所述步驟類似，由環(huán)己醇(1g；10mmol)和溴乙酰氯(1ml；12mmol)制備副標題化合物。(ii)ChOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z與實施例1(iii)中所述步驟類似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z×2HCl(2.5g；4.32mmol)和溴乙酸環(huán)己酯(1.5g；5.2mmol)制備標題化合物。產量為1.7g(60％)。FAB-MS(m+1)＝646(m/z)實施例35PhC(Me)2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(i)溴乙酸2-苯基-2-丙酯與實施例30(i)中所述步驟類似，由2-苯基-2-丙醇(3g；22mmol)和溴乙酰氯(4.16g，26mmol)制備副標題化合物。產量為1.2g(44％)。(ii)PhC(Me)2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z與實施例1(iii)中所述步驟類似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z×2HCl(1.2g；2.2mmol)和溴乙酸2-苯基-2-丙酯(640mg；2.5mmol；來自以上步驟(i))制備標題化合物。產量為1.3g(86％)。1H-NMR(500 MHz；CDCl3)δ9.3(br s，1H)，8.35(t，1H)，7.75(d，2H)，7.45(d，2H)，7.30-7.05(m，10H or 11H)，5.15(s，2H)，4.78(t，1H)，4.40-4.30(ABX-譜的AB部分，2H)，3.95(q，1H)，3.74(q，1H)3.27-3.19(AB-譜，2H)，2.72(d，1H)，2.43(q，2H)，1.93(br d，1H)，1.75-1.60(m，9H or 10H)，1.54(d，1H)，1.49-1.40(m，1H)，1.25-1.0(m，4H)，0.92(q，1H)實施例36MeNHCOCH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z與實施例1(iii)中所述步驟類似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z×2HCl(1.0g；1.7mmol)和MeNHCOCH2OOCCH2Br(440mg；2mmol；與以上實施例11(步驟(i)、(ii)和(iii))中所述步驟類似，采用甲胺替代環(huán)己胺進行制備)制備標題化合物。產量為380mg(35％)。FAB-MS(m+1)＝635(m/z)實施例37tBuOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z與實施例1(iii)中所述步驟類似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z×2HCl(500mg；1.0mmol)和溴乙酸叔丁酯(231mg；1.2mmol)制備標題化合物。產量為420mg(69％)。LC-MS(m+1)＝620(m/z)實施例38(Me)2CHC(Me)2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z與實施例1(iii)中所述步驟類似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(787mg；1.4mmol)和溴乙酸2，3-二甲基-2-丁酯(364mg；1.63mmol)制備標題化合物。產量為590mg(67％)。FAB-MS(m+1)＝648(m/z)實施例39iPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z與實施例1(iii)中所述步驟類似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(700mg；1.2mmol)和溴乙酸異丙酯(262mg；1.5mmol)制備標題化合物。產量為225mg(31％)。FAB-MS(m+1)＝606(m/z)實施例40BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)(i)Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)與實施例1(i)所述步驟類似，由Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H和氯甲酸4-甲氧基苯酯制備副標題化合物。FAB-MS(m+1)＝622(m/z)(ii)H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)×2HCl與實施例4(ii)中所述步驟類似，由Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)(來自以上步驟(i))制備副標題化合物。(iii)BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)與實施例1(iii)所述步驟類似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)×2HCl(85mg；0.16mmol；來自以上步驟(iii))和溴乙酸芐酯(90mg；0.2mmol)制備標題化合物。產量為60mg(56％)。FAB-MS(m+1)＝670(m/z)實施例41ChCH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)與實施例1(iii)所述步驟類似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)(554mg；0.64mmol；參見以上實施例40(ii))和溴乙酸環(huán)己基甲酯(165mg；0.7mmol)制備標題化合物。產量為34mg(8％)。FAB-MS(m+1)＝676(m/z)實施例42(2-Me)BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)與實施例1(iii)所述步驟類似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)(522mg；1mmol；參見以上實施例40(ii))和溴乙酸2-(甲基)芐酯(365mg；1.5mmol)制備標題化合物。產量為158mg(23％)。LC-MS(m+1)＝684(m/z)實施例43EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-Me)(i)Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-Me)與實施例1(i)所述步驟類似，由Boc-(R)Cgl-Aze-Pab(1.96g；4.56mmol)和4-甲苯基-氯甲酸酯(850mg；4.99mmol)制備副標題化合物。產量為1.39g(55％)。FAB-MS(m+1)＝606(m/z)(ii)H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-Me)與實施例4(ii)中所述步驟類似，由Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-Me)(388mg；0.64mmol；來自以上步驟(i))制備副標題化合物。產量為293mg(91％)。FAB-MS(m+1)＝506(m/z)(iii)EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-Me)與實施例1(iii)所述步驟類似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-Me)(288mg；0.6mmol；來自以上步驟(ii))和溴乙酸乙酯(114mg；0.7mmol)制備標題化合物。產量為81mg(24％)。FAB-MS(m+1)＝592(m/z)實施例44BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-Me)與實施例1(iii)所述步驟類似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-Me)(272mg，；0.54mmol；參見以上實施例43(ii))和溴乙酸芐酯(147mg；0.6mmol)制備標題化合物。產量為107mg(31％)。FAB-MS(m+1)＝654(m/z)實施例45BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nBu與實施例1(iii)所述步驟類似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nBu×2HCl(400mg；0.74mmol；參見以上實施例9(ii))和溴乙酸芐酯(210mg；0.88mmol)制備標題化合物。產量為220mg(48％)。FAB-MS(m+1)＝620(m/z)實施例46iPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH＝CH2與實施例1(iii)所述步驟類似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH＝CH2×2TFA(456mg；0.67mmol；參見以上實施例1(ii))和溴乙酸異丙酯(145mg；0.8mmol)制備標題化合物。產量為294mg(79％)。FAB-MS(m+1)＝556(m/z)實施例47EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-iBu(i)Boc-Pab-COO-iBu于0℃將氯甲酸異丁酯(270mg；2.2mmol)加入含Boc-Pab-H(500mg；2.0mmol；由Pab-Z和(Boc)2O制備(形成Boc-Pab-Z)，然后在Pd/C上氫化制得)和三乙胺(400mg；4.0mmol)的二氯甲烷(10ml)溶液中。攪拌5h后，加入水。將有機相干燥(Na2SO4)并濃縮，產生530mg(76％)的副標題化合物。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)δ9.5(bs，1H)，7.82(d，2H)，7.31(d，2H)，6.6(bs，1H)，5.0(bs，1H)，4.33(bd，2H)，3.93(d，2H)，2.04(m，1H)，1.45(s，9H)，0.97(d，6H)(ii)H-Pab-COO-iBu×2HCl與實施例4(ii)中所述步驟類似，由Boc-Pab-COO-iBu(520mg；1.5mmol；來自以上步驟(i))制備副標題化合物。產量為430mg(88％)。1H-NMR(500 MHz，MeOD)δ7.89(d，2H)，7.75(d，2H)，4.30(s，2H)，4.17(d，2H)，2.11-2.05(m，1H)，1.02(d，6H)(iii)Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-iBu將EDC(270mg；1.4mmol)加入含Boc-(R)Cgl-Aze-OH(480mg；1.4mmol)、H-Pab-COO-iBu×2HCl(430mg；1.3mmol；來自以上步驟(ii))和DMAP(650mg；5.3mmol)的乙腈(20ml)的溶液中。于室溫下攪拌3天后，將該反應混合物濃縮，然后溶于水和EtOAc中。該有機相用NaHCO3(aq)洗滌并干燥(Na2SO4)，濃縮并通過采用EtOAc作為洗脫劑的快速色譜進行純化，產生510mg(52％)副標題化合物。(iv)H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-iBu×2HCl與實施例4(ii)中所述步驟類似，由Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-iBu(500mg；0.88mmol；來自以上步驟(iii))制備副標題化合物。產量為360mg(87％)。(v)EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-iBu與實施例1(iii)所述步驟類似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-iBu×2HCl(290mg；0.53mmol；來自以上步驟(iv))和溴乙酸乙酯(110mg；0.64mmol)制備標題化合物。產量為140mg(47％)。FAB-MS(m+1)＝558(m/z)實施例48BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nPr與實施例1(iii)所述步驟類似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nPr×2TFA(902mg；1.3mmol；參見以上實施例5(ii))和溴乙酸芐酯(362mg；1.6mmol)制備標題化合物。產量為199mg(25％)。1H-NMR(400MHz；CDCl3)δ8.43(bs，1H)，7.78(d，2H)，7.38-7.27(m，7H)，5.05(s，2H)，4.90(dd，1H)，4.56-4.39(ABX-譜的AB部分2H)，4.12-4.03(m，3H)，3.98-3.91(q，1H)，3.33-3.22(AB-譜2H)，2.85(d，1H)，2.65-0.94(m，19H)實施例49EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCCh(i)EtSCOOCH2OOCCh于0℃將NaOH(9.1ml；10M；68mmol)加入含硫酸氫四丁基銨(15.6g；45.6mmol)和環(huán)己基甲酸(5.85mg；46mmol)的二氯甲烷溶液中。攪拌5分鐘后，將該反應混合物過濾，用二氯甲烷洗滌，溶于甲苯中，將其濃縮，并溶于THF中，產生[Bu4N]+[OOCCh]-。將EtSCOOCH2Cl(4g；25.9mmol；參見Folkmann和Lund，J.Synthesis，(1990)，1159)于室溫下加入含[Bu4N]+[OOCCh]-的THF溶液中。于室溫下攪拌12h后，將該反應混合物濃縮，并通過快速色譜純化，產生2.57g(40％)副標題化合物。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)特征峰δ5.80(s，2H，O-CH2-O)，2.85(q，2H，CH2-S)(ii)ClCOOCH2OOCCh將SO2Cl2(31.8g；23.6mmol)于0℃加入EtSCOOCH2OOCCh(2.9g；11.8mmol；來自以上步驟(i))中。攪拌30分鐘后，將該反應混合物濃縮，產生1.82g(70％)的所需化合物。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)特征峰δ5.82(s，2H，O-CH2-O)(iii)Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCCh與實施例1(i)類似，由Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H(750mg；1.59mmol)和ClCOOCH2OOCCh(460mg；2.1mmol；來自以上步驟(ii))制備副標題化合物。該粗產物通過制備型RPLC純化。產量為355mg(9％)。FAB-MS(m+1)＝656(m/z)(iv)H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCCh×2TFA與實施例1(ii)中所述步驟類似，由Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCCh(來自以上步驟(iii))制備副標題化合物。(v)EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCCh與實施例1(iii)所述步驟類似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCCh×2TFA(193mg；0.35mmol；來自以上步驟(iv))和三氟乙酸乙酯(83mg；0.35mmol)制備標題化合物。產量為87mg(39％)。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ8.48(t br，1H)，7.83(d，2H)，7.37(d，2H)，5.86(s，2H)，4.95(dd，1H)，4.15-4.39(ABX-譜的AB部分2H)，4.18-4.05(m，5H)，3.26-3.17(AB＝譜，2H)，2.87(d，1H)，2.75-0.95(m，29H)實施例50EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCCH2Ch與實施例49所述步驟類似，由環(huán)己基乙酸代替環(huán)己基甲酸開始，制備標題化合物。產量為74mg(17％)。FAB-MS(m+1)＝656(m/z)實施例51EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH(Me)OOCPh與實施例49所述步驟類似，由EtSCOOCH(CH3)Cl(采用Folkmann等，J.Synthesis，(1990)，1159所述步驟，由ClCOCH(CH3)Cl和EtSH制備)代替EtSCOOCH2Cl開始，制備標題化合物。產量為70mg(23％)。FAB-MS(m+1)＝650(m/z)實施例52EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCPh與實施例49所述步驟類似，用苯甲酸代替環(huán)己基甲酸制備標題化合物。產量為50mg(39％)。1H-NMR(300 MHz，CDCl3)δ9.73-9.25(s br，1H)，8.45(t，1H)，8.05(d，2H)，7.83(d，2H)，7.60-7.10(m，6H)，6.10(s，2H)，4.96-4.84(dd，1H)，4.62-4.30(ABX，2H)，4.20-3.93(m，4H)，3.25(s，2H)，2.84(d，1H)，2.73-2.41(m，2H)，2.41-0.87(m，15H)13C-NMR(300 MHz，CDCl3，羰基和脒信號)δ163.1，165.3，169.0，170.8，172.3，175.5實施例53BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH(Me)OAc與實施例1(iii)所述步驟類似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH(CH3)OC(O)CH3(108mg；0.21mmol；參見以上實施例14(ii))和溴乙酸芐酯(36μl；0.23mmol)制備標題化合物。產量為41mg(30％)。FAB-MS(m+1)＝650(m/z)實施例54EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OAc(i)H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OAc×2TFA與實施例14(步驟(i)和(ii))中所述步驟類似，采用乙酸基甲基4-硝基苯基碳酸酯(與實施例12(iii)中所述步驟類似，采用乙酸銀代替新戊酸銀制備)制備副標題化合物。處理產生的副標題化合物不用進一步純化而用于下一步驟中。(ii)EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OAc與實施例1(iii)所述步驟類似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OAc×2TFA(0.83mmol；來自以上步驟(i))和溴乙酸乙酯(2.2mmol)制備標題化合物。產量為286mg。FAB-MS(m+1)＝574(m/z)實施例55tBuOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OAc與實施例1(iii)所述步驟類似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OAc×2TFA(0.313mmol；參見以上實施例54(i))和溴乙酸叔丁酯(73mg；0.376mmol)制備標題化合物。產量為156mg(83％)。FAB-MS(m+1)＝602(m/z)實施例56BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOC-tBu與實施例1(iii)所述步驟類似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOC-tBu(379mg；0.71mmol；參見以上實施例12(v))和溴乙酸芐酯(135μl；0.85mmol)制備標題化合物。產量為146mg(30％)。FAB-MS(m+1)＝678(m/z)實施例57EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CCl3(i)Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CCl3與實施例1(i)中所述步驟類似，由Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H(1.0g；2.12mmol)、2M NaOH(11.7mmol)和氯甲酸三氯乙酯(494mg；2.33mmol)制備副標題化合物。產量為1.08g(79％)。(ii)H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CCl3與實施例1(ii)所述步驟類似，由Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CCl3(1.04g；1.607mmol；來自以上步驟(i))制備副標題化合物。產量為1.43g(99％)。1H-NMR(500MHz；CD3OD)δ7.79(d，2H)，7.61(d，2H)，5.10(s，2H)，4.87-4.81(m，2H)，4.63-4.52(q，2H)，4.41-4.34(m，1H)，4.30-4.24(m，1H)，3.72(d，1H)，2.72-2.63(m，1H)，2.32-2.25(m，1H)，1.88-1.10(m，14H)(iii)EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CCl3與實施例1(ii)所述步驟類似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CCl3(400mg；0.52mmol；來自以上步驟(iii))和溴乙酸乙酯(95mg；0.57mmol)制備標題化合物。產量為8mg(23％)。1H-NMR(500MHz；CDCl3)δ8.47(bt，1H)，7.83(d，2H)，7.48(bs，1H)，7.31(d，2H)，4.92(dd，1H)，4.85(s，2H)，4.58-4.39(ABX-譜的AB部分，2H)，4.16-4.06(m，4H)，3.24(s，2H)，4.87(d，1H)，2.65-2.59(m，1H)，2.56-2.48(m，1H)，2.10-0.95(m，16H)實施例58MeOOC-C(＝CEt)CH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(i)MeOOC-C(＝CH)C(OH)Et將丙醛(10.1g；0.174mol)滴加到含丙烯酸甲酯(10g；0.116mol)和1，4-二氮雜雙環(huán)[2，2，2]辛烷(1.3g；0.0116mol)的溶液中。將該反應混合物于室溫下攪拌14天。加入乙酸乙酯(150ml)。該有機相用水和鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)、過濾并濃縮，產生所需化合物。產量為15.5g(93％)。1H-NMR(400MHz；CDCl3)δ6.24(s，1H)，5.81(s，1H)，4.34(t，1H)，3.78(s，3H)，2.82(bs，1H)，1.69(m，2H)，0.95(t，3H)(ii)MeOOC-C(＝CEt)CH2Br于0℃將HBr(6.5ml，～48％)滴加到MeOOC-C(＝CH)C(OH)Et(3g；20.8mmol；來自以上步驟(i))中。5分鐘后，滴加H2SO4(濃H2SO4；6ml)。于室溫下將該反應混合物攪拌12小時。分離兩相，上層相用醚稀釋。該醚相用水和NaHCO3水溶液洗滌，干燥(Na2SO4和木炭)并濃縮。該殘留物通過快速色譜所純化。產量為1.7g(40％)。1H-NMR(400MHz；CDCl3)δ6.97(t，3H)，4.23(s，2H)，3.8(s，3H)，2.32(m，2H)，1.13(t，3H)(iii)tBuOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z與實施例1(iii)所述步驟類似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(2.1g；3.6mmol)和溴乙酸叔丁酯(780mg；4.0mmol)制備副標題化合物。產量為1.73g(78％)。(iv)HOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z將含tBuOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(來自以上步驟(iii))和TFA的二氯甲烷溶液于室溫下攪拌3h。將該反應混合物濃縮并從水和HCl(濃的；10eq)中冷凍干燥。(v)MeOOC-C(＝CEt)CH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z將含HOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(263mg；0.41mmol；來自以上步驟(iv))、NaOH(1M；1.239mmol)和水(4ml)的溶液冷凍干燥。加入DMF(5ml)，然后于0℃滴加MeOOC-C(＝CEt)CH2Br(103mg；0.496mmol；來自以上步驟(ii))。該反應混合物于室溫下攪拌24h，用甲苯(5ml)稀釋，用水洗滌，干燥(Na2SO4)并濃縮。該殘留物通過采用EtOAc∶甲醇(95∶5)作為洗脫劑的快速色譜進行純化。產量為95mg(33)。FAB-MS(m+1)＝690(m/z)實施例59MenOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)(i)MenOOCCH2Br與實施例30(i)所述步驟類似，由MenOH(10mmol)和溴乙酰氯(12mmol)制備副標題化合物。產量為1.5g(54％)。(ii)MenOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)與實施例1(iii)中所述步驟類似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)(521mg；1mmol；參見以上實施例40(ii))和MenOOCCH2Br(416mg；1.5mmol；來自以上步驟(i))制備標題化合物。產量為36mg(5％)。FAB-MS(m+1)＝718(m/z)實施例60tBuOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOnPr與實施例1(iii)所述步驟類似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nPr(575mg；0.837mmol；參見以上實施例5(ii))和溴乙酸叔丁酯(196mg；1.01mmol)制備標題化合物。產量為110mg(23％)。LC-MS(m+1)＝572(m/z)實施例61MenOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z與實施例1(iii)所述步驟類似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(0.7g；1.21mmol)和MenOOCCH2Br(0.4g；1.45mmol；參見以上實施例59(i))制備標題化合物。產量為0.33g(38％)。FAB-MS(m+1)＝702(m/z)實施例62BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-Bn(4-NO2)(i)Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-Bn(4-NO2)與實施例1(i)中所述步驟類似，由Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H(1.03g；2.18mmol)、2M NaOH(24ml)和氯甲酸4-NO2-芐酯(518mg；2.4mmol)制備副標題化合物。產量為1.32g(93％)。FAB-MS(m+1)＝651(m/z)(ii)H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-Bn(4-NO2)與實施例4(ii)所述步驟類似，由Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-Bn(4-NO2)(1.32g；2.03mmol；來自以上步驟(i))制備副標題化合物。產量為1.0g(79％)。FAB-MS(m+1)＝551(m/z)(iii)BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-Bn(4-NO2)與實施例1(iii)所述步驟類似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-Bn(4-NO2)(0.5g；0.80mmol；來自以上步驟(ii))和溴乙酸芐酯(220mg；0.90mmol)制備標題化合物。FAB-MS(m+1)＝699(m/z)實施例63EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Bn(4-NO2)
與實施例1(iii)中所述步驟類似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-Bn(4-NO2)(211g；0.38mmol；參見以上實施例62(ii))和溴乙酸乙酯(47μl；0.42mmol)制備標題化合物。產量為44mg(18％)。1H-NMR(300MHz；CDCl3)δ9.55(bs，1H)，8.50(bt，1H)，8.20(d，2H)，7.80(d，2H)，7.60(d，2H)，7.35(d，2H)，6.87(bs，1H)，4.95(dd，1H)，4.65-4.40(ABX-譜的AB部分，2H)，4.18-4.04(m，5H)，3.27-3.15(AB-譜，2H)，2.87(d，1H)，2.75-2.60(m，1H)，2.57-2.45(m，1H)，2.00-0.95(m，16H).實施例64PrlC(O)CH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(i)PrlC(O)CH2OH將2，5-二氧-1，4-二噁烷(2.0g；17mmol)和吡咯烷(8ml；97mmol)的混合物回流1h。通過蒸發(fā)除去過量的吡咯烷。產量為4.4g(99％)。FAB-MS(m+1)＝130(m/z)(ii)PrlC(O)CH2OOCCH2Br于0℃將溴乙酰溴(0.63g；3.1mmol)滴加到含PrlC(O)CH2OH(0.4g；3.1mmol；來自以上步驟(i))的DMF(15ml)溶液中。該反應混合物于0℃攪拌1.5h，于室溫下攪拌3h。再加入溴乙酰溴(0.63g；3.1mmol)，將該反應混合物加熱至80℃，將其于室溫下攪拌12h并濃縮。產量為320mg(41％)。FAB-MS(m+1)＝252(m/z)(iii)PrlC(O)CH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z與實施例1(iii)所述步驟類似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z(580mg；1mmol)和PrlC(O)CH2OOCCH2Br(300mg；1.2mmol；來自以上步驟(ii))制備標題化合物。產量為400mg(60％)。FAB-MS(m+1)＝675(m/z)1H-NMR(500MHz；CDCl3)δ9.66-9.42(bs，1H)，8.64-8.56(m，1H)，8.03-7.93(d，2H)，7.89-7.66(bs，1H)，7.45(d，2H)，7.45-7.25(m，5H)，5.20(s，2H)，4.98-4.92(dd，1H)，4.82-4.74(m，1H)，4.62，4.58(AB譜，2H)，4.26-4.05(m，3H)，3.47-3.16(m，6H)，2.95(d，1H)，2.78-2.68(m，1H)，2.54-2.42(m，1H)，2.03-1.95(m，16H)實施例65(2-Me)BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-Bn(4-NO2)與實施例1(iii)中所述步驟類似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-Bn(4-NO2)(500g；0.80mmol；參見以上實施例62(ii))和溴乙酸2-(甲基)芐酯(234mg；0.96mmol；參見以上實施例32(i))制備標題化合物。產量為528mg(92％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ9.34(bs，1H)，8.38(t，1H)，8.09(d，2H)，7.72(d，2H)，7.48(d，2H)，7.37(bs，1H)，7.23(d，2H)，7.17-7.05(m，4H)，5.18(s，2H)，5.00(s，2H)，4.81(dd，1H)，4.45-4.34(ABX-譜的AB部分，2H)，4.04-3.97(q，1H)，3.93-3.86(q，1H)，3.27-3.17(AB譜，2H)，2.79(d，1H)，2.54-2.35(m，2H)，2.22(s，3H)，1.91-1.84(bd，1H)，1.71-1.39(m，5H)，1.19-0.84(m，4H).實施例66MeOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOEt與實施例1(iii)中所述步驟類似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOEt(350mg；0.69mmol；參見實施例4(ii))和溴乙酸甲酯(126mg；0.83mmol)制備標題化合物。產量為188mg(53％)。LC-MS(m+1)＝516(m/z)實施例67(nPr)2NC(O)CH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-Bn(4-NO2)(i)(nPr)2NC(O)CH2OOCCH2Cl將(nPr)2NC(O)CH2OH(244mg；1.53mmol；參見以上實施例12(i))和溴乙酰氯(270mg；1.72mmol)的混合物于室溫下攪拌12小時。將該混合物注入NaHCO3水溶液中，用二氯甲烷萃取。該有機相用KHSO4水溶液(0.2M)和鹽水洗滌，干燥并濃縮。FAB-MS(m+1)＝237(m/z)1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ4.82(s，2H)，4.22(s，2H)，3.31-3.26(t，2H)，3.10-3.15(t，2H)，1.68-1.52(m，2H)，1.97-0.86(m，6H)(ii)(nPr)2NC(O)CH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-Bn(4-NO2)與實施例1(iii)中所述步驟類似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOBn(4-NO2)(343mg；0.62mmol；參見以上實施例62(ii))和(nPr)2NC(O)CH2OOCCH2Cl(160mg；0.68mmol；來自以上步驟(i))制備標題化合物。產量為89mg(19％)。FAB-MS(m+1)＝750(m/z)實施例68(2-Me)BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCtBu與實施例1(iii)中所述步驟類似，由H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCtBu(380mg；0.71mmol；參見以上實施例12(ii))和溴乙酸2-(甲基)芐酯(215mg；0.88mmol；參見以上實施例32(i))制備標題化合物。產量為37mg(7.5％)。FAB-MS(m+1)＝692(m/z)實施例69實施例1-68的化合物都在以上試驗A中進行測試，發(fā)現全都表現出高于1.0μM的IC50TT值(即與表現出0.01μMIC50TT的活性抑制劑HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab-H相比較，它們本身對凝血酶無活性)。實施例70實施例1-68的化合物都在以上試驗B、C和/或D中的一個、兩個或全部試驗中進行測試，發(fā)現它們或者作為游離酸和/或者作為其一種或多種酯，表現出的大鼠口服和/或胃腸外生物利用度都同活性抑制劑HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab-H一樣。在假定在大鼠內形成HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab-H的基礎上，合適時按照試驗B和/或試驗C中所述公式，計算該生物利用度?？s寫Ac＝ 乙?；鵤q＝ 水溶液Aze＝S-氮雜環(huán)丁烷-2-甲酸Boc＝叔丁酯基(Boc)2O＝二叔丁基二碳酸酯Bn＝ 芐基Bu＝ 丁基Cgl＝ 環(huán)己基甘氨酸Ch＝ 環(huán)己基DCC＝ 二環(huán)己基碳二亞胺DMAP＝N，N-二甲基氨基吡啶EDC＝ 鹽酸1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺Et＝ 乙基EtOH＝乙醇EtOAc＝ 乙酸乙酯h＝ 小時HCl＝鹽酸H-Pab-H＝ 1-脒基-4-氨基甲苯H-Pab-Z＝ 4-氨甲基-1-(N-芐酯基脒基)苯HPLC＝高效液相色譜K2CO3無水碳酸鉀Me＝ 甲基Men (1R，2S，5R)-基Pab-OH＝ 4-氨甲基-芐胺肟(4-氨甲基-1-(氨基-羥基亞氨基甲基)苯Piv(aloyl)＝ 2，2-二甲基乙?；鵓r＝ 丙基Prl＝ N-吡咯烷基RPLC＝反相高效液相色譜TFA＝ 三氟乙酸THF＝ 四氫呋喃Z＝ 芐酯基前綴n、s、i和t具有其常用的含義正、異、仲和叔。NHR譜中的前綴s、d、t、q和b分別指單峰、雙重峰、三重峰、四重峰和寬峰。如果沒有另外陳述，則默認氨基酸的立體化學為(S)型。
權利要求
1.式I化合物或其藥學上可接受的鹽，R1O(O)C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab-R2I其中R1表示-R3或-A1C(O)N(R4)R5或-A1C(O)OR4；A1表示C1-5亞烷基；R2(它取代Pab-H的脒基單位中的一個氫原子)的表示OH、OC(O)R6、C(O)OR7或C(O)OCH(R8)OC(O)R9；R3表示H、C1-10烷基或C1-3烷苯基(該后一基團可任選地用C1-6烷基、C1-6烷氧基、硝基或鹵素取代)；R4和R5獨立地表示H、C1-6烷基、苯基、2-萘基，或當R1表示-A1C(O)N(R4)R5時，與連接它們的氮原子一起表示吡咯烷基或哌啶基；R6表示C1-17烷基、苯基或2-萘基(它們全都可任選地用C1-6烷基或鹵素取代)；R7表示2-萘基、苯基、C1-3烷苯基(后三種基團可任選地用C1-6烷基、C1-6烷氧基、硝基或鹵素取代)或C1-12烷基(后一基團可任選地用C1-6烷氧基、C1-6酸基或鹵素取代)；R8表示H或C1-4烷基；以及R9表示2-萘基、苯基、C1-6烷氧基或C1-8烷基(后一基團可任選地用鹵素、C1-6烷氧基或C1-6酸基取代)；條件是當R1表示R3，R3表示芐基、甲基、乙基、正丁基或正己基，而R2表示C(O)OR7時，那么R7不表示芐基。
2.權利要求1限定的式I化合物，其中當R1表示-A1C(O)N(R4)R5時，A1表示C1-3亞烷基。
3.權利要求1或2中限定的式I化合物，其中當R1表示-A1C(O)N(R4)R5時，R4表示H或C1-6烷基。
4.權利要求1-3的任一項中限定的式I化合物，其中當R1表示-A1C(O)N(R4)R5時，R5表示C1-6烷基或C4-6環(huán)烷基。
5.權利要求1-3的任一項中限定的式I化合物，其中當R1表示-A1C(O)N(R4)R5時，R4和R5一起表示吡咯烷基。
6.權利要求2-5的任一項中限定的式I化合物，其中A1表示C1-3亞烷基，R4表示H或C1-3烷基，R5表示C2-6烷基或C5-6環(huán)烷基，或R4和R5一起表示吡咯烷基。
7.權利要求1限定的式I化合物，其中當R1表示-A1C(O)OR4時，A1表示C1-5亞烷基。
8.權利要求1或7限定的式I化合物，其中當R1表示-A1C(O)OR4時，R4表示C1-6烷基。
9.權利要求7或8限定的式I化合物，其中A1表示C1-5亞烷基，而R4表示C1-4烷基。
10.權利要求1限定的式I化合物，其中當R1表示R3時，R3表示H、C1-10烷基(該后一基團可以是線性的，或當有足夠數目的碳原子時，可以是支鏈的和/或部分環(huán)狀或環(huán)狀的)或C1-3烷苯基(后一基團可任選地被取代，可以是線性的，或當有足夠數目的碳原子時，可以是支鏈的)。
11.權利要求1或權利要求10中要求保護的化合物，其中R1表示H、線性C1-10烷基、支鏈C3-10烷基、部分環(huán)狀C4-10烷基、C4-10環(huán)烷基、可任選取代的線性C1-3烷苯基、可任選取代的支鏈C3烷苯基。
12.權利要求11中要求保護的化合物，其中R1表示線性C1-6烷基、C6-10環(huán)烷基或可任選取代的線性C1-3烷苯基。
13.權利要求1-12的任一項中限定的式I化合物，其中R2表示OH。
14.權利要求1-12的任一項中限定的式I化合物，其中當R2表示OC(O)R6時，R6表示任選取代的苯基或C1-17烷基(后一基團可以是線性的，或當有足夠數目的碳原子時，可以是支鏈、環(huán)狀或部分環(huán)狀的和/或飽和或不飽和的))。
15.權利要求14中要求保護的化合物，其中R6表示可任選取代的苯基、線性C1-4烷基、支鏈C3-4烷基和順式十八基。
16.權利要求15中要求保護的化合物，其中R6表示線性C1-3烷基或支鏈C3烷基。
17權利要求1-12的任一項中限定的式I化合物，其中當R2表示C(O)OR7時，R7表示任選取代的苯基、C1-12烷基(后一基團可任選地被取代，可以是線性的，或當有足夠數目的碳原子時，可以是支鏈、環(huán)狀或部分環(huán)狀的和/或飽和或不飽和的)或C1-3烷苯基(后一基團可任選地被取代，可以是線性的，或當有足夠數目的碳原子時，可以是支鏈的)。
18.權利要求17中要求保護的化合物，其中R7表示可任選取代和/或可任選不飽和的線性C1-4烷基或可任選取代和/可任選不飽和的支鏈C3-4烷基、可任選取代的苯基或可任選取代的線性C1-3烷苯基或可任選取代的支鏈C3烷苯基。
19.權利要求18中要求保護的化合物，其中R7表示可任選取代的線性C1-4烷基或可任選取代的支鏈C3-4烷基、可任選取代的線性C1-3烷苯基或支鏈C3烷苯基。
20.權利要求1-12的任一項中限定的式I化合物，其中當R2表示C(O)OCH(R8)OC(O)R9時，R8表示H或甲基。
21.權利要求1-12或權利要求20的任一項中限定的式I化合物，其中當R2表示C(O)OCH(R8)OC(O)R9時，R9表示苯基或C1-8烷基(后一基團可任選地被取代，可以是線性的，或當有足夠數目的碳原子時，可以是支鏈的和/或環(huán)狀或部分環(huán)狀的))。
22.權利要求20或權利要求21中限定的式I化合物，其中R8表示H或甲基，而R9表示苯基、C5-7環(huán)烷基、線性C1-6烷基、支鏈C3-6烷基或部分環(huán)狀C7-8烷基。
23.權利要求22中要求保護的化合物，其中R8表示H，而R9表示C5-7環(huán)烷基、線性C1-6烷基或部分環(huán)狀C7-8烷基。
24.前述權利要求的任一項中要求保護的化合物，其中當R1表示R3，而R3表示可任選取代的C1-3烷苯基時，所述可任選的取代基為C1-6烷基
25.權利要求24中要求保護的化合物，其中所述取代基為甲基。
26.前述權利要求的任一項中要求保護的化合物，其中當R2表示C(O)OR7，而R7表示可任選取代的C1-12烷基時，所述可任選取代基選自鹵素和C1-6烷氧基。
27.權利要求26中要求保護的化合物，其中所述取代基選自氯和甲氧基。
28.前述權利要求的任一項中要求保護的化合物，其中當R2表示C(O)OR7，而R7表示可任選取代的苯基時，所述可任選取代基選自C1-6烷基、C1-6烷氧基和鹵素。
29.權利要求28中要求保護的化合物，其中所述取代基選自甲基、甲氧基和氯。
30.前述權利要求的任一項中要求保護的化合物，其中當R2表示C(O)OR7，而R7表示可任選取代的C1-3烷苯基時，所述可任選取代基為硝基。
31.權利要求1中要求保護的化合物，其中EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH＝CH2；nPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH＝CH2；tBuOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH＝CH2；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOEt；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nBu；PrlC(O)CH2CH2CH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；ChNHC(O)CH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；(nPr)2NC(O)CH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCC(CH3)3；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCC(CH3)3；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH(CH3)OOCCH3；MeOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh；MeOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；nPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；nPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；iPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；tBuOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；(nPr)2NCOCH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；ChNHCOCH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OAc；HOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；HOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-O-cis-Oleyl；Cyclooctyl-OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；tBuCH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；(2-Me)BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；ChCH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；ChOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；PhC(Me)2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；(Me)2CHC(Me)2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)；ChCH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)；(2-Me)BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-Me)；BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-Me)；BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nBu；iPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CH＝CH2；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-iBu；BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nPr；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCCh；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCCH2Ch；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH(Me)OOCPh；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCPh；BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH(Me)OAc；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OAc；tBuOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OAc；MeOOC-C(＝CHEt)CH2-OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；Men-OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)；andEtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CCl3.
32.權利要求1要求保護的化合物，它為EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CCl3；BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOnBu；nPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；Cyclooctyl-OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2OOCCh；MeOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；nPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；iPrOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；BnOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH；andEtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OAc.
33.權利要求1限定的式I化合物，其中額外的條件是R1不表示-A1C(O)OR4。
34.權利要求1限定的式I化合物，其中額外的條件是R4和R5不獨立地表示H。
35.權利要求1限定的式I化合物，其中額外的條件是當R2表示OC(O)R6時，R6不表示C1-17烷基。
36.權利要求1限定的式I化合物，其中R1表示-A1C(O)OR4。
37.權利要求1限定的式I化合物，其中當R4和R5獨立地表示H。
38.權利要求1限定的式I化合物，其中當R2表示OC(O)R6時，R6表示C1-17烷基。
39.藥用制劑，它包括與藥學上可接受的輔助劑、稀釋劑或載體混合的權利要求1-38的任一項中限定的式I化合物或其藥學上可接受的鹽。
40.用作藥物的權利要求1-38的任一項中限定的式I化合物或其藥學上可接受的鹽。
41.用于治療需要抑制凝血酶的疾病的權利要求1-38的任一項中限定的式I化合物或其藥學上可接受的鹽。
42.用于治療血栓形成的權利要求1-38的任一項中限定的式I化合物或其藥學上可接受的鹽。
43.用作抗凝劑的權利要求1-38的任一項中限定的式I化合物或其藥學上可接受的鹽。
44.權利要求1-38的任一項中限定的式I化合物或其藥學上可接受的鹽的用途，即用作治療需要抑制凝血酶的疾病的藥物生產中的活性組分的用途。
45.權利要求44中要求保護的用途，其中所述疾病為血栓形成。
46.權利要求1-38的任一項中限定的式I化合物或其藥學上可接受的鹽的用途，即用作抗凝劑生產中的活性組分的用途。
47.需要抑制凝血酶的疾病的治療方法，該方法包括向患或易患此種疾病的人給與權利要求1-38的任一項中限定的式I化合物或其藥學上可接受的鹽。
48.權利要求47中要求保護的方法，其中所述疾病為血栓形成。
49.權利要求47中要求保護的方法，其中所述疾病為血液和組織中凝固性過高。
50.權利要求1中限定的、但沒有附帶條件的式I化合物作為藥物前體的用途。
51.制備式I化合物的方法，該方法包括(a)對于R2表示OH的式I化合物，將R2表示OC(O)R6和R6如權利要求1限定的相應式I化合物與醇鹽堿反應；(b)對于R2表示OH的式I化合物，將R2表示C(O)OR7而R7如權利要求1限定的相應的式I化合物與羥胺或其酸加成鹽反應；(c)將以下相應的式II化合物與式III化合物反應，H-(R)Cgl-Aze-Pab-R2II其中R2如權利要求1限定的，R1O(O)C-CH2-L1III其中L1表示離去基團，而R1如權利要求1限定的；(d)對于R1表示H及R2表示OH或C(O)OR7的式I化合物，將相應的式I化合物(其中R1表示C1-10烷基或C1-3烷苯基，而R2表示OH或C(O)OR7)與堿反應；(e)對于R2表示OC(O)R6的式I化合物，將R2表示OH的相應的式I化合物與以下式IV化合物反應，R6C(O)-O-C(O)R6IVR6C(O)HalV其中Hal表示Cl或Br，而在兩種情況下，R6都如權利要求1限定的。(f)對于其中R1表示H，而R2表示OC(O)R6，而R6如權利要求1限定的式I化合物，將以下相應的式VI或式V化合物與酸反應，P1O(O)C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab-R2VI其中P1表示酸不穩(wěn)定酯保護基團，而R2表示OC(O)R6，其中R6如權利要求1限定的；(g)對于其中R1表示R3，R3表示C1-10烷基和C1-3烷苯基，R2表示OH或C(O)OR7，而R7如權利要求1限定的式I化合物，將以下相應的式VII化合物進行酯基轉移，R1aO(O)C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab-R2VII其中R1a表示非正在形成的C1-10烷基或C1-3烷苯基或另一選擇的不穩(wěn)定烷基取代基，而R2如權利要求1限定的。
全文摘要
提供式(Ⅰ)化合物:R
文檔編號A61P7/02GK1209139SQ9618002
公開日1999年2月24日 申請日期1996年12月17日 優(yōu)先權日1995年12月21日
發(fā)明者T·安頓松, D·古斯塔夫松, K·J·霍夫曼, J·E·奈斯特倫, H·澤倫森, M·瑟倫 申請人:阿斯特拉公司