專利名稱：：25－亞甲基和24,25－環(huán)氧馬可福胺和帕拉郝金胺的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及適用作抗寄生物劑的(取代的)25-亞甲基和24,25-環(huán)氧馬可福胺(marcfortines)和帕拉郝金胺(paraherquamides)。馬可福胺是已知化合物，見“化學(xué)學(xué)會化學(xué)通訊雜志”(JournaloftheChemicalSocietyChemicalCommunications),601-602(1980)關(guān)于馬可福胺A以及“四面體通訊”(TetrahedronLetters),22,1977-1980(1981)關(guān)于馬可福胺B和C。這些化合物是真菌婁地青霉(Penicilliumroqueforti)的代謝產(chǎn)物。馬可福胺在結(jié)構(gòu)上與也是已知化合物的帕拉郝金胺相關(guān)。帕拉郝金胺被公開于“四面體通訊”，22,135-136(1981)，以及“抗生素雜志”(JournalofAntibiotics),44,492-497(1991)中。美國專利4,866,060和4,923,867公開了馬可福胺A、B和C及其某些衍生物在治療和預(yù)防動物寄生蟲病方面的應(yīng)用。WO92/22555(1992年12月23日公開的)一般性地描述了一種馬可福胺或帕拉郝金胺衍生物(即在位置14上用甲基或者甲基和羥基取代的部分的式(Ⅲ))，但是未描述如何制備這種14-甲基-14-羥基馬可福胺化合物?！翱股仉s志”，43,1380-1386(1990)公開了具有如下結(jié)構(gòu)的帕拉郝金胺A馬可福胺A具有如下結(jié)構(gòu)馬可福胺B具有如下結(jié)構(gòu)馬可福胺C具有如下結(jié)構(gòu)馬可福胺D具有如下結(jié)構(gòu)WO91/09961(1991年7月11日公開的)公開了馬可福胺和帕拉郝金胺的各種衍生物，及其12a-N-氧化物，以及尤其從青霉屬菌種(PenicilliumSp.)IMI332995生產(chǎn)VM29919(帕拉郝金胺)和VM55596(帕拉郝金胺的12a-N-氧化物)的生產(chǎn)方法。美國專利4,873,247公開了帕拉郝金胺的衍生物和生產(chǎn)帕拉郝金胺的菌株查爾斯青霉(Penicilliumcharlessi)MF5123(ATCC20841)。美國專利4,978,656(以及EP390532-A、EP-301742-A)公開了各種合成的帕拉郝金胺衍生物以及從查爾斯青霉MF5123(ATCC20841)生產(chǎn)帕拉郝金胺的方法。國際公開WO92/22555(1992年12月23日公開的)一般性地公開了14α-羥基馬可福胺化合物以及應(yīng)用14-羥基-14-甲基馬可福胺化合物生產(chǎn)抗寄生蟲藥物的方法。但是，未描述制備14α-羥基馬可福胺或14α-羥基-14β-甲基馬可福胺化合物的任何方法。國際公開WO94/29319公開了各種14-取代的馬可福胺及其衍生物。15-烷基-14-羥基化合物(Ⅲ)(其中n1是0)是已知化合物，見國際公開WO94/29319。本發(fā)明公開了式(Ⅶ)的25-亞甲基化合物，其中關(guān)于(Ⅰ)馬可福胺A(a)n是1，(b)R14是R14α:R14β，其中R14α是-H，且R14β是-H，(c)R15是R15α:R15β，其中R15α是-H，且R15β是-H；(Ⅱ)帕拉郝金胺A(a)n是0，(b)R14是R14α:R14β，其中R14α是-OH，且R14β是-CH3，(c)R15是R15α:R15β，其中R15α是-H，且R15β是-H；(Ⅲ)14-羥基-14-烷基馬可福胺A(a)n是1，(b)R14是R14α:R14β，其中R14α是-OH，且R14β是C1-C4烷基，(c)R15是R15α:R15β，其中R15α是-H，且R15β是-H；(Ⅳ)14-羥基-15-甲基馬可福胺A(a)n是1，(b)R14是R14α:R14β，其中R14α是-OH，且R14β是-H，(c)R15是R15α:R15β，其中R15α是C1-C4烷基，且R15β是-H及其藥物上可接受的鹽。還公開了式(Ⅷ)的24,25-環(huán)氧化合物，其中關(guān)于(Ⅰ)馬可福胺A(a)n是1，(b)R14是R14α:R14β，其中R14α是-H，且R14β是-H，(c)R15是R15α:R15β，其中R15α是-H，且R15β是-H；(Ⅱ)帕拉郝金胺A(a)n是0，(b)R14是R14α:R14β，其中R14α是-OH，且R14β是-CH3，(c)R15是R15α:R15β，其中R15α是-H，且R15β是-H；(Ⅲ)14-羥基-14-烷基馬可福胺A(a)n是1，(b)R14是R14α:R14β，其中R14α是-OH，且R14β是C1-C4烷基，(c)R15是R15α:R15β，其中R15α是-H，且R15β是-H；(Ⅳ)14-羥基-15-甲基馬可福胺A(a)n是1，(b)R14是R14α:R14β，其中R14α是-OH，且R14β是-H，(c)R15是R15α:R15β，其中R15α是C1-C4烷基，且R15β是-H及其藥物上可接受的鹽。公開了N-(18a)-脫甲基-2-脫氧帕拉郝金胺A及其藥物上可接受的鹽。本發(fā)明涉及25-亞甲基(Ⅶ)和24，25-環(huán)氧(Ⅷ)馬可福胺和帕拉郝金胺。這些化合物是從已知化合物通過兩種不同反應(yīng)制備的。25-亞甲基馬可福胺和帕拉郝金胺(Ⅶ)是從已知的相應(yīng)環(huán)烯(Ⅰ)制備的。當(a)n是1,(b)R14是R14α:R14β，其中R14α是-H，且R14β是-H以及(c)R15是R15α:R15β，其中R15α是-H，且R15β是-H時，則起始環(huán)烯(Ⅰ)是馬可福胺A；當(a)n是0，(b)R14是R14α:R14β，其中R14α是-OH，且R14β是-CH3以及(c)R15是R15α:R15β，其中R15α是-H，且15β是-H時，則起始環(huán)烯(Ⅰ)是帕拉郝金胺A；當(a)n是1，(b)R14是R14α:R14β，其中R14α是-OH，且R14β是-CH3以及(c)R15是R15α:R15β，其中R15α是-H，且R15β是-H時，則起始環(huán)烯(Ⅰ)是14-羥基-14-甲基馬可福胺A；當(a)n是1，(b)R14是R14α:R14β，其中R14α是-OH，且R14β是-H以及(c)R15是R15α:R15β，其中R15α是-CH3，且R15β是-H時，則起始環(huán)烯(Ⅰ)是14-羥基-15-甲基馬可福胺A。馬可福胺A和帕拉郝金胺A都是人們熟知的化合物?；衔?4-羥基-14-烷基馬可福胺A和14-羥基-15-烷基馬可福胺A是通過表A和B和制備例1-31中給出的方法制備的。“表”和“制備例”例舉甲基作為烷基取代基，但本領(lǐng)域技術(shù)人員知道可按類似方式制備乙基、丙基和丁基(如果存在的話還包括其異構(gòu)體)。25-亞甲基化合物(Ⅶ)是這樣從相應(yīng)的環(huán)烯(Ⅰ)制備的首先應(yīng)用試劑(如甲酸)把含該烯的七元環(huán)醚裂解生產(chǎn)二醇(Ⅱ)。再用烷基化劑使該二醇(Ⅱ)烷基化而生成相應(yīng)的烯(Ⅲ)。烯(Ⅲ)在特定的位置必須具有雙鍵以制備所需的產(chǎn)物，即當環(huán)化和氧化后，該產(chǎn)物將在C-25上具有一個羥基。這種試劑包括式X1-CH2-CH=C(CH3)2的化合物，其中X1是離去基團，如-Br或-Cl；優(yōu)選X1是-Br，更優(yōu)選該試劑是4-溴-2-甲基-2-丁烯。在碘化鉀和弱堿如碳酸氫鹽或碳酸鹽(優(yōu)選是碳酸鉀)存在下，在水-有機溶劑混合物(優(yōu)選是丙酮/水)中進行該反應(yīng)。然后應(yīng)用過酸(優(yōu)選用間-氯過苯甲酸)將該烯(Ⅲ)氧化成相應(yīng)的環(huán)氧酚(Ⅳ)，接著用亞硫酸氫鈉處理。再應(yīng)用氯化錫(Ⅳ)將該環(huán)氧酚(Ⅳ)環(huán)化成相應(yīng)的環(huán)醇(Ⅴ)。然后在Swern條件(草酰氯，DMSO，接著用TEA處理)下將該環(huán)醇(Ⅴ)氧化成相應(yīng)的酮(Ⅵ)。再通過Wittig反應(yīng)應(yīng)用甲基三苯基溴化鏻和強堿(如正丁基鋰)將該酮(Ⅵ)轉(zhuǎn)變成所需的25-亞甲基化合物(Ⅶ)。了解到該25-亞甲基化合物(Ⅶ)是24,25-二氫化合物。24,25-環(huán)氧化合物(Ⅷ)是這樣制備的用過酸在過酸氧化至環(huán)氧化物的常規(guī)條件下氧化相應(yīng)的環(huán)烯(Ⅰ)，接著用亞硫酸氫鈉水溶液處理。優(yōu)選該過酸是間-氯過苯甲酸。N-(18a)-脫甲基-2-脫氧帕拉郝金胺A也被稱為(1′α,5′αβ,7′β,8＇αβ,9′+β)-(-)-2,2′,3,3′,8a′,9′-六氫-1′-羥基-1′,4,4,8′,8′-五甲基-螺[4H,8H,-[1,4]二氧(dioxepino)[2,3-g]吲哚-8,7′(8′H)-[5H,6H-5a,9a](亞氨基亞甲基)[1H]環(huán)戊[f]中氮茚]-9-酮]。N-(18a)-脫甲基-2-脫氧帕拉郝金胺A可通過兩種不同方法制備，見實施例14和15。25-亞甲基化合物(Ⅶ)、24,25-環(huán)氧化合物(Ⅷ)和N-(18a)-脫甲基-2-脫氧帕拉郝金胺A都是胺，所以當它們與足夠強度的酸反應(yīng)時形成酸加合鹽。藥物上可接受的鹽包括無機酸和有機酸的鹽。藥物上可接受的鹽比相應(yīng)的游離胺更優(yōu)選，因為它們產(chǎn)生的化合物水溶性更大，更易結(jié)晶。優(yōu)選的藥物上可接受的鹽包括下列酸的鹽，即甲磺酸、鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、硝酸、苯甲酸、檸檬酸、酒石酸、富馬酸、馬來酸、CH3-(CH2)n-COOH(其中n是0～4),HOOC-(CH2)n-COOH(其中n同上述定義)。意外地發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的25-亞甲基化合物(Ⅶ)、24,25-環(huán)氧化合物(Ⅷ)和N-(18a)-脫甲基-2-脫氧帕拉郝金胺A是抗內(nèi)寄生物和外寄生物，尤其是抗蠕蟲和節(jié)肢動物的有效抗寄生物劑，所述寄生物引起人、動物和植物的多種寄生物病。寄生物病可通過內(nèi)寄生物或外寄生物而引起。內(nèi)寄生物是這種寄生物，即它們生存在宿主體內(nèi)，或者在器官(如胃、肺、心臟、腸等)內(nèi)或者只是在皮下。外寄生物是生存在宿主外表面但仍從宿主吸收營養(yǎng)物質(zhì)的寄生物。內(nèi)寄生物病一般稱為蠕蟲病，是由于被稱為蠕蟲的寄生蟲感染宿主而引起的。蠕蟲病是盛行的嚴重的世界性經(jīng)濟問題，它是由于馴化動物(如豬、綿羊、馬、牛、山羊、狗、貓和家禽)的感染造成的。這些感染有很多是由被稱為線蟲的蟲引起的，該線蟲引起世界上多種動物的疾病。這類疾病通常很嚴重，可導(dǎo)致受感染動物死亡。感染前面提到的動物的最常見線蟲屬是血矛線蟲屬(Haemonchus)、毛圓線蟲屬(Trichostrongylus)、胃線蟲屬(Ostertagia)、細頸線蟲屬(Nematodirus)、古柏線蟲屬(Cooperia)、蛔蟲(Ascaris)、仰口線蟲屬(Bunostomum)、結(jié)節(jié)線蟲屬(Oesophagostomum)、夏氏線蟲屬(Chabertia)、鞭蟲屬(Trichuris)、圓線蟲(Strongylus)、毛線蟲(Trichonema)、網(wǎng)尾線蟲屬(Dictyocaulus)、毛細線蟲屬(Capillaria)、異刺線蟲屬(Heterakis)、弓蛔蟲屬(Toxocara)、雞蛔蟲屬(Ascaridia)、尖尾線蟲屬(Oxyuris)、鉤口線蟲屬(Ancylostoma)、鉤蟲屬(Uncinaria)、弓蛔線蟲屬(Toxascaris)、和副蛔蟲屬(Parascaris)。很多寄生物是物種專一性的(只感染一種宿主)，而大多數(shù)也在動物內(nèi)有優(yōu)選的感染部位。于是血矛線蟲屬和胃線蟲屬主要感染胃，而細頸線蟲屬和古柏線蟲屬則通常侵襲腸。其它寄生物有些喜歡寄生在心、眼、肺、血管等中，而另一些則是皮下寄生物。蠕蟲病可導(dǎo)致虛弱、減重、貧血、腸損傷、營養(yǎng)不良和對其它器官的損傷。如果不醫(yī)治這些疾病就會導(dǎo)致動物死亡。外寄生節(jié)肢動物(如蜱(ticks)、螨(mites)、虱(lice)、廄螫蠅(stableflies)、角蠅(hornflies)、麗蠅(blowflies)、蚤(fleas)等)的感染也是嚴重的問題。這些寄生物的感染導(dǎo)致失血、皮膚損傷，且能干擾正常的飲食習(xí)慣而導(dǎo)致減重。這些感染也可導(dǎo)致傳播嚴重疾病(如腦炎、無形體病、豬痘等)，這類疾病會是致命性的。動物可能同時受數(shù)種寄生物感染，因為一種寄生物會使動物變虛弱，于是使它更易受第二種寄生物感染。所以具有廣譜活性的化合物在這類疾病的治療中特別有益。該25-亞甲基化合物(Ⅶ)、24,25-環(huán)氧化合物(Ⅷ)和N-(18a)-脫甲基-2-脫氧帕拉郝金胺A意外地具有抗這些寄生物的高活性，此外，還具有抗下列寄生物的活性，即狗中的惡絲蟲屬(Dirofilaria)，嚙齒動物中的Nematospiroides和管狀線蟲屬(Syphacia)，牛中的叮咬昆蟲和遷徙雙翅目幼蟲(如皮下蠅屬的種(Hypodermasp.))，以及馬中的胃蠅屬(Gastrophilus)。該25-亞甲基化合物(Ⅶ)、24,25-環(huán)氧化合物(Ⅷ)和N-(18a)-脫甲基-2-脫氧帕拉郝金胺A還適合抗引起人寄生物病的內(nèi)寄生物和外寄生物。這類感染人的內(nèi)寄生物實例包括下列屬的胃腸寄生物鉤口線蟲屬、板口線蟲屬(Necator)、蛔蟲、類圓線蟲屬(Strongyloides)、毛線蟲屬(Trichinella)、毛細線蟲屬、鞭蟲屬、蟯蟲屬(Enterobius)等。感染人的其它內(nèi)寄生物見于血液或其它器官中。這類寄生物的實例有絲蟲吳策線蟲屬(Wucheria)、布魯格氏絲蟲屬(Brugia)、盤尾絲蟲屬(Onchocerca)等，以及腸蠕蟲圓線蟲(Strongylides)和毛線蟲屬的腸外期。寄生于人的外寄生物包括節(jié)肢動物，如蜱、蚤、螨、虱等，而且對于馴化動物來說，這些寄生物的感染能導(dǎo)致傳播嚴重疾病和甚至致命的疾病。該25-亞甲基化合物(Ⅶ)、24,25-環(huán)氧化合物(Ⅷ)和N-(18a)-脫甲基-2-脫氧帕拉郝金胺A都有效地抗這些內(nèi)寄生物和外寄生物，此外還有效地抗煩擾人的叮咬昆蟲和其它雙翅目害蟲。該25-亞甲基化合物(Ⅶ)、24,25-環(huán)氧化合物(Ⅷ)和N-(18a)-脫甲基-2-脫氧帕拉郝金胺A在被口服或非腸道施用時的劑量率為0.05～20mg/Kg動物體重。該25-亞甲基化合物(Ⅶ)、24,25-環(huán)氧化合物(Ⅷ)和N-(18a)-脫甲基-2-脫氧帕拉郝金胺A還適用于抗家庭害蟲，如蠊屬(Blatellasp.)(蟑螂)、衣蛾屬(Tineolasp.)(衣蛾)、毛蠹屬(Attagenussp.)(皮蠹)、家蠅(Muscadomestica)和抗紅外來火蟻(Solenopsisinvicta)(里氏火蟻)。該25-亞甲基化合物(Ⅶ)、24,25-環(huán)氧化合物(Ⅷ)和N-(18a)-脫甲基-2-脫氧帕拉郝金胺A還適用于抗農(nóng)業(yè)害蟲，例如蚜蟲(無網(wǎng)長管蚜屬(Acyrthiosiphonsp.))、蝗蟲和棉象蟲，以及抗侵襲儲藏谷物的蟲害，例如擬谷盜屬(Triboliumsp.)，也抗生活在植物組織中未成熟階段的昆蟲。該25-亞甲基化合物(Ⅶ)、24,25-環(huán)氧化合物(Ⅷ)和N-(18a)-脫甲基-2-脫氧帕拉郝金胺A還適用作控制可能是農(nóng)業(yè)上重要的土壤線蟲的殺線蟲劑。用作動物中的抗寄生物劑時，該25-亞甲基化合物(Ⅶ)、24,25-環(huán)氧化合物(Ⅷ)和N-(18a)-脫甲基-2-脫氧帕拉郝金胺A可通過經(jīng)口或通過注射體內(nèi)施用，或者作為液體灌藥或者作為洗發(fā)劑而局部施用。至于口服，該25-亞甲基化合物(Ⅶ)、24,25-環(huán)氧化合物(Ⅷ)和N-(18a)-脫甲基-2-脫氧帕拉郝金胺A可呈膠囊、片劑或灌服大丸的形式施用，或者可與動物飼料混合施用。該膠囊、片劑和灌服大丸包括活性成分，結(jié)合適當載體，如淀粉、滑石、硬脂酸鎂或磷酸二鈣。這些單位劑量形式是這樣制備的，即通過將活性成分與合適的細粉狀惰性組分(包括稀釋劑、填料、崩解劑、懸浮劑和／或粘合劑)緊密混合，于是得均勻混合溶液或懸浮液。惰性組分是這樣的物質(zhì)，即不與該25-亞甲基化合物(Ⅶ)、24,25-環(huán)氧化合物(Ⅷ)和N-(18a)-脫甲基-2-脫氧帕拉郝金胺A反應(yīng)，且對受治療的動物無毒。合適的惰性組分包括淀粉、乳糖、滑石、硬脂酸鎂、植物膠和油等。這些制劑可含很寬可變量的活性組分和非活性組分，這取決于多種因素，例如待治療動物的大小和類別，感染的類別和嚴重性。活性組分也可作為飼料添加劑施用，只需簡單地將該25-亞甲基化合物(Ⅶ)、24,25-環(huán)氧化合物(Ⅷ)和N-(18a)-脫甲基-2-脫氧帕拉郝金胺A與飼料混合或者將該化合物施到飼料表面。也可將活性組分與惰性載體混合，再將所得組合物與飼料混合或直接喂給動物。合適的惰性載體包括玉米粉、柑桔渣、發(fā)酵渣、大豆渣、干谷物等。將活性組分與這些惰性載體通過碾碎、攪拌、磨粉或滾轉(zhuǎn)而緊密地混合，使得最終組合物含0.001～5.0wt％活性組分。25-亞甲基化合物(Ⅶ)、24,25-環(huán)氧化合物(Ⅷ)和N-(18a)-脫甲基-2-脫氧帕拉郝金胺A也可被非腸道施用，即通過注射由溶于惰性液體載體的活性組分構(gòu)成的制劑。可通過肌內(nèi)、管腔內(nèi)、氣管內(nèi)或皮下注射。注射性制劑由活性組分與合適的惰性液體載體混合而成?？山邮艿囊后w載體包括植物油，如花生油、棉子油、麻油等，以及有機溶劑，如溶膠縮酮、甘油縮甲醛等。還可應(yīng)用含水的非腸道制劑。植物油是優(yōu)選的液體載體。該制劑是通過將活性組分溶于或懸浮于液體載體制備的，使最終組合物含0.005～20wt％活性組分?？删植渴┯迷?5-亞甲基化合物(Ⅶ)、24，25-環(huán)氧化合物(Ⅷ)和N-(18a)-脫甲基-2-脫氧帕拉郝金胺A，即通過應(yīng)用呈水溶液或懸浮液的、含該25-亞甲基化合物(Ⅵ)、24,25-環(huán)氧化合物(Ⅷ)和N-(18a)-脫甲基-2-脫氧帕拉郝金胺A的灌服液或洗發(fā)劑。這些制劑通常含懸浮劑如皂土，且一般還包含消泡劑。含0.005～20wt％活性組分的制劑是可接受的。優(yōu)選的制劑含0.5～5wt％25-亞甲基化合物(Ⅶ)、24,25-環(huán)氧化合物(Ⅷ)和N-(18a)-脫甲基-2-脫氧帕拉郝金胺A。該25-亞甲基化合物(Ⅶ)、24,25-環(huán)氧化合物(Ⅷ)和N-(18a)-脫甲基-2-脫氧帕拉郝金胺A主要適用作抗寄生物劑用于治療和/或預(yù)防馴化動物(如牛、綿羊、馬、狗、貓、山羊、豬和家禽)的蠕蟲病。它們還適用于預(yù)防和治療這些動物被外寄生物(如蜱、螨、虱、蚤等)的寄生物感染。它們還可有效治療人的寄生物感染。在治療這樣的感染時，該25-亞甲基化合物(Ⅶ)、24,25-環(huán)氧化合物(Ⅷ)和N-(18a)-脫甲基-2-脫氧帕拉郝金胺A可單獨用或相互組合用或與其它不相關(guān)的抗寄生物劑組合用。達最佳效果所需的該25-亞甲基化合物(Ⅶ)、24,25-環(huán)氧化合物(Ⅷ)和N-(18a)-脫甲基-2-脫氧帕拉郝金胺A的劑量依賴于數(shù)個因素，例如動物的類別和大小，感染的類別和嚴重性，施用的方法和應(yīng)用的具體25-亞甲基化合物(Ⅶ)、24,25-環(huán)氧化合物(Ⅷ)和N-(18a)-脫甲基-2-脫氧帕拉郝金胺A。以單次劑量或間隔數(shù)天數(shù)次劑量的方式在0.005～50mg/kg動物體重的劑量下口服該25-亞甲基化合物(Ⅶ)、24,25-環(huán)氧化合物(Ⅷ)和N-(18a)-脫甲基-2-脫氧帕拉郝金胺A通常給出良好結(jié)果。該25-亞甲基化合物(Ⅶ)、24,25-環(huán)氧化合物(Ⅷ)和N-(18a)-脫甲基-2-脫氧帕拉郝金胺A之一的單次劑量通常給出良好的控制效果，但可以給出重復(fù)劑量以抗再感染或者抗異常持久的寄生物。給動物施用該25-亞甲基化合物(Ⅶ)、24,25-環(huán)氧化合物(Ⅷ)和N-(18a)-脫甲基-2-脫氧帕拉郝金胺A的方法是獸醫(yī)領(lǐng)域中技術(shù)人員已知的。該25-亞甲基化合物(Ⅶ)、24,25-環(huán)氧化合物(Ⅷ)和N-(18a)-脫甲基-2-脫氧帕拉郝金胺A還可用于抗侵襲田間的或儲藏的作物的農(nóng)業(yè)害蟲。在這類應(yīng)用中，將該25-亞甲基化合物(Ⅶ)、24,25-環(huán)氧化合物(Ⅷ)和N-(18a)-脫甲基-2-脫氧帕拉郝金胺A用作噴霧液、粉劑、乳劑等用于生長中的植物或收獲了的作物。以該方式施用25-亞甲基化合物(Ⅶ)、24,25-環(huán)氧化合物(Ⅷ)和N-(18a)-脫甲基-2-脫氧帕拉郝金胺A的方法是農(nóng)業(yè)領(lǐng)域中技術(shù)人員已知的。施用的準確劑量和次數(shù)取決于應(yīng)用的具體25-亞甲基化合物(Ⅶ)、24,25-環(huán)氧化合物(Ⅷ)和N-(18a)-脫甲基-2-脫氧帕拉郝金胺A，受治療的具體病況，受治療病況的嚴重性，具體患者的年齡、體重、綜合身體狀況，可對個體采取的其它藥療法是本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的，并且可通過測定血液量或患者血液中該25-亞甲基化合物(Ⅶ)、24,25-環(huán)氧化合物(Ⅷ)和N-(18a)-脫甲基-2-脫氧帕拉郝金胺A的濃度和/患者對受治療具體病況的響應(yīng)而更準確地測定。下列定義和解釋是針對包括說明書和權(quán)利要求的整個文本應(yīng)用的術(shù)語。Ⅰ．對式子的規(guī)定和對變量的定義表示說明書和權(quán)利要求書中各化合物或分子片段的化學(xué)式除了表達規(guī)定的結(jié)構(gòu)特征外還可包括可變的取代基。這些可變的取代基通過字母或帶數(shù)字下標的字母區(qū)別，例如“Z1”或“Ri”，其中“i”是整數(shù)。這些可變?nèi)〈梢允菃蝺r或二價的，即它們表示通過一個或兩個化學(xué)鍵與式連接的基團。例如，基團Z1如果與式CH3-C(=Z1-)H連接就表示二價可變基?；鶊FRi和Ri如果與式CH3-CH2-C(Ri)(Ri)-H連接就表示一價可變?nèi)〈Ｈ绻瘜W(xué)式以線型畫出，如上述式子，含于括號內(nèi)的可變?nèi)〈苯舆B接在包括于括號內(nèi)的可變?nèi)〈o鄰左邊的原子上。當兩個或多個連續(xù)的可變?nèi)〈ㄓ诶ㄌ杻?nèi)時，連續(xù)可變?nèi)〈忻恳粋€都與未包括于括號內(nèi)的緊鄰左邊前一個原子連接。所以，在上式中，Ri和Ri都與前一個碳原子連接。還有，對于有確定的碳原子編號體系的任何分子來說，例如甾族化合物，這些碳原子被標明為Ci，其中“i”是相應(yīng)于碳原子號的整數(shù)。例如C6表示6號位置或甾族化學(xué)領(lǐng)域中技術(shù)人員習(xí)慣規(guī)定的甾核中的碳原子號。同樣，術(shù)語“R6”表示C6位置上的可變?nèi)〈?單價或二價)。以線型畫出的化學(xué)式或其部分表示線型鏈中的原子。符號“-”通常表示鏈中兩原子間的鍵。所以CH3-O-CH2-CH(Ri)-CH3表示2-取代的-1-甲氧基丙烷化合物。以同樣方式，符號“=”表示雙鍵，例如CH2=C(Ri)-O-CH3，而符號“≡”則表示叁鍵，如HC≡C-CH(Ri)-CH2-CH3。羰基以如下兩種方式之任一種表示-CO-或-C(=O)-，前一種因簡單而被優(yōu)選。環(huán)狀化合物或分子片段的化學(xué)式可以線型表示。這樣，化合物4-氯-2-甲基吡啶可以線型N*=C(CH3)-CH=CCl-CH=C*H表示，按慣例標有星號(*)的原子相互結(jié)合而形成環(huán)。同樣，環(huán)狀分子片段4-(乙基)-1-哌嗪基可以-N*-(CH2)2-N(C2H5)-CH2-C*H2表示。本文任意化合物的剛性環(huán)狀結(jié)構(gòu)規(guī)定了該剛性環(huán)狀化合物的各碳原子連接的取代基關(guān)于環(huán)平面的取向。至于有兩個取代基連在屬于環(huán)狀系統(tǒng)部分的一個碳原子上的飽和化合物，-C(X1)(X2)-兩個取代基相對于環(huán)可呈直立或平伏位置，且可在直立/平伏之間變換。不過，兩個取代基相對于環(huán)和相互間的位置保持固定。雖然任一取代基有時可能位于環(huán)平面中(平伏)而不是在平面的上方或下方(直立)，但一個取代基總是在另一個上方。在描繪這種化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)式中，位于另一取代基(X2)“下方”的一個取代基(X1)被定義為α構(gòu)型，由虛線、短劃線或點劃線連在碳原子上，即由符號“---”或“…”表示。連接在另一取代基(X1)“上方”的相應(yīng)取代基(X2)被定義為β構(gòu)型，由連在該碳原子上的實線表示。當可變?nèi)〈嵌r時，價鍵可以一起或獨立地或者都有地定義該可變基。例如，連在一個碳原子上的可變基Ri如-C(=Ri)-可能是二價的，并可定義為氧代或酮基(于是形成羰基(-CO-))，或定義為兩個獨立連接的一價可變?nèi)〈?Ri-j和β-Ri-k。當二價可變基Ri被定義為包括兩個一價可變?nèi)〈鶗r，用于定義該二價可變基的常規(guī)形式是“α-Ri-j:β-Ri-k”或其某種變體。在這種情況下，α-Ri-j和β-Ri-k都連在該碳原子上形成-C(α-Ri-j)(β-Ri-k)-。例如，當二價可變基R6,-C(=R6)-被定義為包括兩個一價可變?nèi)〈鶗r，該兩個一價可變?nèi)〈铅?R6-1:β-R6-2,…α-R6-9:β-R6-10等，給出-C(α-R6-1)(β-R6-2)-,…-C(α-R6-9)(β-R6-10)-等。同樣，至于二價可變基R11,-C(=R11)-，兩個一價可變?nèi)〈铅?R11-1:β-R11-2。至于不存在獨立的α和β取向的環(huán)形取代基(例如由于環(huán)上存在碳碳雙鍵)，以及至于連接在不屬于環(huán)部分的碳原子上的取代基，仍應(yīng)用上述規(guī)定，但省去α和β定義。正如二價可變基可定義為兩個獨立的一價可變?nèi)〈粯?，兩個獨立的一價可變?nèi)〈部啥x為一起形成二價可變基。例如，在式-C1(Ri)H-C2(Ri)H-(隨意分別規(guī)定C1和C2是第一個和第二個碳原子)中，Ri和Rj可被規(guī)定為一起形成(1)C1和C2之間的第二個鍵或者(2)一個二價基如氧雜(-O-)，于是該式描述環(huán)氧化物。當Ri和Rj一起形成更復(fù)雜的整體如基團-X-Y-時，則該整體的取向應(yīng)使上式中的C1連在X上，而C2連在Y上。于是，按規(guī)定“…Ri和Rj一起形成-CH2-CH2-O-CO-…”表示內(nèi)酯，其中羰基連在C2上。但是，當定義“…Rj和Ri一起形成-CO-O-CH2-CH2-”時，則習(xí)慣上表示內(nèi)酯，其中羰基連在C1上?？勺?nèi)〈奶荚雍恳匀缦聝煞N方法之一表示。第一種方法應(yīng)用可變基全稱的詞頭，例如“C1-C4”，其中“1”和“4”是表示可變基中最少和最多碳原子數(shù)的整數(shù)。用間隔將詞頭與可變基分開。例如，“C1-C4烷基”表示1～4個碳原子的烷基，(除非給出與之相反的表示法，否則還包括其異構(gòu)形式)。每當給出該單一詞頭，該詞頭表示定義的可變基全部碳原子含量。于是“C2-C4烷氧基羰基”描述了基團CH3-(CH2)n-O-CO-，其中n是0、1或2。第二種方法是，只單獨指出各定義部分的碳原子含量，即用括號將“Ci-Cj”這一定義括起來并將它緊接(無間隔)在所下的定義部分前面。按該任選的慣例，“(C1-C3)烷氧基羰基”與“C2-C4烷氧基羰基”意義相同，因為“C1-C3”只指烷氧基的碳原子含量。類似地，雖然“C2-C6烷氧基烷基”和“(C1-C3)烷氧基(C1-C3)烷基”都定義含2～6個碳原子的烷氧基烷基，但這兩個定義不同，因為前一個定義可使烷氧基或烷基部分單獨含4或5個碳原子，但后一個定義將這兩個基團的每一個都限制在3個碳原子。當權(quán)利要求中含相當復(fù)雜的(環(huán)狀)取代基時，則在命名/定義該具體取代基的詞語之后將用括號給出注釋，該注釋相應(yīng)于還將示出該具體取代基的化學(xué)結(jié)構(gòu)式的圖中之一的相同名稱/定義。Ⅱ-定義所有溫度都以攝氏度表示。THF指四氫呋喃。DMSO指二甲亞砜。LDA指二異丙基氨化鋰。TEA指三乙胺。DMF指二甲基甲酰胺。鹽水指飽和氯化鈉水溶液。色譜(柱色譜和急驟色譜)指以(載體、洗脫劑)表達的化合物的純化/分離。應(yīng)懂得將適當級分匯集并濃縮可得所需化合物。NMR指核(質(zhì)子)磁共振譜，以四甲基硅烷的低場ppm(δ)報道化學(xué)位移。-φ指苯基(C6H5)。MS指質(zhì)譜，以m/e、m/z或質(zhì)量/電荷單位表達。[M+H]+指母體加氫原子的正離子。EI指電子轟擊。CI指化學(xué)電離。FAB指快速原子轟擊。HRMS指高分辨率質(zhì)譜。醚指乙醚?！八幬锷峡山邮艿摹敝笍乃幚韺W(xué)/毒理學(xué)角度考慮病人可接受的性能和/或物質(zhì)，還指制藥藥劑師從物理/化學(xué)角度考慮關(guān)于組合物、制劑、穩(wěn)定性、患者可接受性和生物可用度是可接受的。當應(yīng)用溶劑對時，應(yīng)用的溶劑比是體積/體積比(v/v)。當應(yīng)用固體在溶劑中的溶解度時，固體與溶劑的比是重量/體積(wt/v)?！?”表示連接基有2種可能的取向(1)與甾族環(huán)連接時的α或β，以及(2)與雙鍵碳原子連接時的順式或反式。UC####指Upjohn培養(yǎng)號abcd。實施例不用進一步詳細闡述，相信本領(lǐng)域技術(shù)人員能應(yīng)用前述說明最大程度地實施本發(fā)明。如下詳細的實施例描述了如何制備本發(fā)明的各種化合物和/或?qū)嵤┍景l(fā)明的各種方法，應(yīng)將這些實施例看成只是闡述性的，不管怎樣不是以任何方式對前述公開說明的限制。本領(lǐng)域技術(shù)人員即刻將認識到關(guān)于反應(yīng)物以及關(guān)于反應(yīng)條件和技術(shù)的適當變更形式。制備例116-碘-17-氰基馬可福胺A非對映體混合物(式5)將固體碘化氰(11-7g,76-5mmol)加入馬可福胺A(10-5g,22mmol)于氰仿(150mL)中的溶液，在回流下加熱該反應(yīng)混合物直至全部馬可福胺A被耗用(約5hr)。冷卻所得混合物至20～25℃，用二氯甲烷(100mL)稀釋，用飽和碳酸氫鈉溶液洗滌，再用亞硫酸鈉溶液洗滌。分離有機相，在硫酸鎂上干燥后濃縮至干。用色譜法(硅膠；乙酸乙酯/己烷，3/2)處理所得粗固體物而得標題化合物。制備例216,17-脫氫-17-氰基馬可福胺A(式6)將16-碘-17-氰基馬可福胺A(制備例1,9.5g,15mmol)溶于甲醇(150mL)，添加氫氧化鉀水溶液(45％,3mL)。在20～25℃下攪拌該反應(yīng)混合物達2hr。添加水，過濾收集形成的沉淀，用水洗滌，在減壓下干燥過夜得標題化合物。制備例317-酮基馬可福胺A(式7)將二氧化硒(2.9g,26mmol)加入16,17-脫氫-17-氰基馬可福胺A(制備例2,6.0g,10mmol)于95％乙醇(100mL)的溶液中，在20～25℃下攪拌該反應(yīng)混合物達2hr。添加飽和碳酸氫鈉(100mL)使反應(yīng)驟停。用二氯甲烷(2×200mL)提取所得混合物。合并提取液，干燥(硫酸鎂)，濃縮得粗產(chǎn)物。用色譜法(硅膠；乙酸乙酯)純化該材料得標題化合物，HRMS(FAB,M/Z,[M+H]關(guān)于C28H33N3O5+H的計算值=492.2498，實測值=492.2478。備擇地，且更優(yōu)選地，可應(yīng)用對-甲苯磺酸合成標題化合物。這樣，將對-甲苯磺酸一水合物(1g)加入16,17-脫氫-17-氰基馬可福胺A(10g)于95％甲醇(50mL)的溶液中，在20～25℃下將該反應(yīng)混合物攪拌1hr。往該混合物中加入三乙胺(2mL)，再蒸發(fā)溶劑。將殘余物與碳酸鈉水溶液(10％,100ml)研磨，過濾出固體，干燥得固態(tài)標題化合物(90％產(chǎn)率)。制備例415,16-脫氫-17-酮基馬可福胺A(式8)從正丁基鋰于己烷中的溶液(1.6M,9.9mL,15.4mmol)和二異丙胺(2.2mL,15.7mmol)制備二異丙基氨化鋰的溶液。用無水四氫呋喃(THF,20mL)稀釋，再冷卻至-78℃。滴加17-酮基馬可福胺A(制備例3,2.0g,4.1mmol)于無水THF(20mL)中的溶液，在1hr期間使反應(yīng)混合物暖至-40℃。再將該混合物冷卻至-78℃，再用苯基氯化硒(19mg,5.2mmol)的THF(10mL)溶液滴加處理。5分鐘后用飽和碳酸氫鈉溶液使反應(yīng)驟停，用二氯甲烷提取，干燥(硫酸鎂)，濃縮得固體物，未進一步純化將它直接應(yīng)用。將該物質(zhì)溶于THF(150mL)，在0℃下用過氧化氫(30％,1.5mL)處理。移去冷卻浴，在20～25℃下攪拌該反應(yīng)混合物達30分鐘。添加氫氧化鈉(1N,100mL)使反應(yīng)驟停。用二氯甲烷(2×200mL)提取該混合物。合并提取液，干燥(硫酸鎂)后濃縮得粗產(chǎn)物。用色譜法(硅膠；乙酸乙酯)純化得標題化合物，HRMS(FAB,M/Z,[M+H]關(guān)于C28H31N3O5+H的計算值=490.2342，實測值=490.2345。制備例514α-羥基-15,16-脫氫-17-酮基馬可福胺A(式9a)，應(yīng)用氧雜氮丙啶(Oxaziridine)化學(xué)在-78℃下將二(三甲基甲硅烷基)氨化鉀于甲苯中的溶液(0.5M,1mL,0.5mmol)滴加到15,16-脫氫-17-酮基馬可福胺A(制備例4,66mg,0.14mmol)的THF(2mL)溶液中。在1hr期間使所得混合物暖至-40℃。將該反應(yīng)混合物冷卻至-78℃，攪拌15分鐘，然后通過滴加2-苯基磺酰-3-苯基氧雜氮丙啶(42mg,0.16mmol)的THF(2mL)溶液進行處理。將該混合物攪拌5分鐘，然后添加碳酸氫鈉使反應(yīng)驟停。用二氯甲烷(2×25mL)提取該混合物。合并提取物，干燥(硫酸鎂)后濃縮得粗物質(zhì)。通過制備性薄層色譜法(硅膠；乙酸乙酯)純化得標題化合物，HRMS(FAB,M/Z[M+H])關(guān)于C28H31N3O6+H的計算值=506.2291，實測值=506.2280。還得14,15-脫氫-16-羥基-17-酮基馬可福胺A(14mg,20％)。制備例614α-羥基-15,16-脫氫-17-酮基馬可福胺A(式9a),15,16-脫氫-14,17-二酮基馬可福胺A(式11)和14,15-脫氫-16,17-二酮基馬可福胺A(式24)，應(yīng)用二氧化硒將15,16-脫氫-17-酮基馬可福胺A(制備例4,1.29g,2.6mmol)溶于對-二噁烷(30mL)，用二氧化硒(390mg)處理。將該混合物回流1hr，在減壓下蒸除溶劑。將殘余物與二氯甲烷(30mL)研磨，再過濾。濃縮濾液，用色譜法(硅膠；甲醇/乙酸乙酯，1/20)處理殘余物而得14α-羥基-15,16-脫氫-17-酮基馬可福胺A(430mg,32％)固體物。還從色譜處理得15,16-脫氫-14,17-二酮基馬可福胺A(式11,212mg,16％)和14,15-脫氫-16,17-二酮基馬可福胺A(式24,106mg,8％)。制備例715,16-脫氫-14,17-二酮基馬可福胺A(制備例11)將14α-羥基-15,16-脫氫-17-酮基馬可福胺A(制備例6,60mg，式9a)溶于二氯甲烷(10mL)，用二氧化錳(60mg)處理。在20～25℃下將該混合物攪拌1hr后濃縮。用制備性薄層色譜法(硅膠；二氯甲烷/乙酸乙酯，50/50)純化殘余物得標題化合物。制備例814α-羥基馬可福胺A(式10)將14α-羥基-15,16-脫氫-17-酮基馬可福胺A(制備例6,20mg,0.040mmol)溶于THF(5mL)，在0°下用氫化鋁鋰(1M,0.11mL,0.11mmol)的THF溶液處理。在0°下攪拌該混合物達0.5hr，然后添加碳酸氫鈉的溶液(10％)。用二氯甲烷(2×10mL)提取該混合物。合并提取液，干燥(硫酸鎂)，在減壓下除去溶劑。制備性薄層色譜(硅膠；甲醇/乙酸乙酯，10/90)處理得標題化合物，HRMS(FAB,M/Z,[M+H])關(guān)于C28H35N305+H的計算值=494.2655，實測值=494.2653。制備例914α-羥基-17-酮基馬可福胺A(式12a)將14α-羥基-15,16-脫氫-17-酮基馬可福胺A(式9a，制備例6,50mg,0.1mmol)溶于THF(5mL)，在-78℃下用三乙基硼氫化鋰的THF溶液(1M,0.7mL)處理。在-78℃下將該混合物攪拌0.5hr。添加甲醇(1mL)驟停反應(yīng)，濃縮該混合物。用色譜法(硅膠；甲醇/二氯甲烷，1/20)處理生成的固體得標題化合物，HRMS(FAB,M/Z,[M+H])關(guān)于C28H33N3O6+H的計算值=508.2447，實測值=508.2437。制備例10從15,16-脫氫-14,17-二酮基馬可福胺A(式11)制備14α-羥基-17-酮基馬可福胺A(式12a)和14β-羥基-17-酮基馬可福胺A將15,16-脫氫-14,17-二酮基馬可福胺A(式11，制備例6,470mg,0.93mmol)溶于THF，在20～25℃下用硼氫化鋰的THF溶液(1M,2mL)處理。將該混合物攪拌2hr，然后添加碳酸氫鈉溶液(10％)。用二氯甲烷(2×20mL)提取該混合物。合并提取物，干燥(硫酸鎂)，蒸除溶劑。殘余物含易于通過色譜法(硅膠；甲醇/乙酸乙酯，1/20)分離的兩種差向異構(gòu)體混合物，即14α-羥基-17-酮基馬可福胺A(90mg,19％)和14β-羥基-17-酮基馬可福胺A(94mg,20％)。制備例11從14α-羥基-17-酮基馬可福胺A(式12a)制備14α-羥基馬可福胺A(式10)將14α-羥基-17-酮基馬可福胺A(式12a，制備例10,413mg,0.81mmol)溶于THF(20mL)，在0℃下用甲硼烷THF復(fù)合物的THF溶液(1M,2.43mL)處理。將該混合物攪拌2.25hr。將混合物攪拌0.5hr后添加甲醇(3mL)。蒸除溶劑后，用色譜法(硅膠；甲醇/乙酸乙酯，1/16)處理殘余物得標題化合物。制備例1214,17-二酮基馬可福胺A(式13)在-78℃下用二甲亞砜(45μl)處理草酰氯(40μl)的無水二氯甲烷(5mL)溶液。在-78℃下攪拌該混合物達1hr。滴加14α-羥基-17-酮基馬可福胺A(制備例11,27mg)的二氯甲烷(2mL)溶液。在-78℃下攪拌該反應(yīng)混合物20分鐘。將三乙胺(0.3mL)加入該反應(yīng)混合物，然后在20分鐘內(nèi)使反應(yīng)混合物暖至20～25℃。將該混合物在碳酸鈉(10％,10mL)和二氯甲烷(10mL)之間分配。分離有機層，干燥(硫酸鎂)，濃縮。用色譜法(硅膠；甲醇/二氯甲烷，1/20)處理殘余物得標題化合物。HRMS(FAB,M/Z,[M+H])關(guān)于C28H31N3O6+H的計算值=506.2291，實測值=506.2280。制備例1314α-羥基-14β-甲基-17-酮基馬可福胺A(式14a)在-78℃下用甲基溴化鎂的醚溶液(3M,0-16mL,0.48mmol)處理-78℃下的14,17-二酮基馬可福胺A(制備例12,16mg,0.032mmol)于二氯甲烷(5mL)中的溶液。在-78℃下攪拌形成的混合物達0.5hr。添加碳酸鈉(10％，數(shù)滴)使反應(yīng)驟停。用二氯甲烷(10mL)稀釋該混合物，干燥(硫酸鎂)后濃縮。用色譜法(硅膠；甲醇/二氯甲烷，1/20)處理殘余物而得14α-羥基-14β-甲基-17-酮基馬可福胺A(8mg,50％,Rf=0.25),HRMS(FAB,M/Z,[M+H])關(guān)于C29H35N3O6+H的計算值=522.2604，實測值=522.2620。從該層還得14β-羥基-14α-甲基-17-酮基馬可福胺A(1.2mg,7％,Rf=0.4),HRMS(FAB,M/Z,[M+H])關(guān)于C29H35N3O6+H的計算值=522.2604，實測值=522.2630。當應(yīng)用THF代替二氯甲烷作為反應(yīng)溶劑時，使這樣得到的產(chǎn)物6∶1比率增大到50∶1以上，產(chǎn)率增大到80％。制備例1414α-羥基-14β-甲基馬可福胺A(式15)在0°下用氫化鋁鋰的THF溶液(1M,0.03mL,0.03mmol)處理14α-羥基-14β-甲基-17-酮基馬可福胺A(制備例13,5mg,0.01mmol)于THF(5mL)中的溶液。在0°下攪拌該混合物達0.5hr，然后添加碳酸氫鈉溶液(10％)。用二氯甲烷(2×5mL)提取該混合物。合并提取物，干燥(硫酸鎂)后蒸除溶劑。制備性TLC(硅膠；甲醇/二氯甲烷，1/20)處理后得標題化合物，HRMS(FAB,M/Z,[M+H])關(guān)于C29H37N3O5+H的計算值=508.2811，實測值=508.2816。制備例1514-酮基馬可福胺A(式16)在-78℃下用DMSO(170μl)處理草酰氯(150μl)于無水二氯甲烷(20mL)中的溶液。在-78℃下攪拌該混合物達1hr。滴加14α-羥基馬可福胺A(制備例11,110mg)于二氯甲烷(5mL)中的溶液。在-78℃下將該反應(yīng)混合物攪拌20分鐘。在反應(yīng)混合物中加入TEA(1mL)，在20分鐘期間使該反應(yīng)混合物暖至20～25℃。在碳酸鈉(10％,20mL)和二氯甲烷(20mL)之間分配該混合物。分離有機層，干燥(硫酸鎂)后濃縮。用色譜法(硅膠；甲醇/二氯甲烷，1/25)處理殘余物得標題化合物，HRMS(FAB,M/Z,[M+H])關(guān)于C28H33N3O5+H的計算值=492.2498，實測值=492.2510。制備例1614β-羥基馬可福胺A(式17)在0°下用硼氫化鈉(5mg)處理14-酮基馬可福胺A(制備例15,10mg)于甲醇(2mL)中的溶液。在0°下攪拌該混合物達0.5hr，然后添加碳酸氫鈉溶液(10％)。用二氯甲烷(2×10mL)提取該混合物。合并提取物，干燥(硫酸鎂)后蒸除溶劑。用制備性TLC(硅膠，甲醇/乙酸乙酯，1/16)處理得標題化合物，HRMS(FAB,M/Z,[M+H])關(guān)于C28H35N3O5+H的計算值=494.2655，實測值=494.2653。制備例1714α-羥基馬可福胺AN-氧化物(式18)在0°下用間-氯過苯甲酸(15mg)處理14α-羥基馬可福胺A(制備例11,15mg)于二氯甲烷(3mL)中的溶液。在0°下攪拌該混合物0.5hr，然后用TEA(30μl)處理，濃縮。用制備性TLC(硅膠；甲醇/二氯甲烷，1/8)處理得標題化合物，HRMS(FAB,M/Z,[M+H])關(guān)于C28H35N3O6+H的計算值=510.2604，實測值=510.2615。制備例1814α-羥基-14β-乙基馬可福胺A(式19)在-78℃下用乙基溴化鎂的醚溶液(3M,0.15mL,0.45mmol)處理-78℃的14-酮基馬可福胺A(制備例15,25mg,0.05mmo1)的THF(5mL)溶液。在-78℃下攪拌所得混合物達0.5hr。在20分鐘期間使反應(yīng)混合物暖至20～25℃。添加碳酸鈉(10％，數(shù)滴)使反應(yīng)驟停。用二氯甲烷(10mL)稀釋該混合物，干燥(硫酸鎂)后濃縮。用色譜法(硅膠；甲醇/二氯甲烷，1/20)處理殘余物得標題化合物，HRMS(FAB,M/Z,[M+H])關(guān)于C30H39N3O5+H的計算值=522.2968，實測值=522.2983。制備例19從14α-羥基-14β-甲基馬可福胺A制備14β-甲基馬可福胺A在-78℃下將二(三甲基甲硅烷基)氨化鉀的甲苯溶液(0.5M,1mL,0.5mmol)滴加到14α-羥基-14β-甲基馬可福胺A(式15，制備例14,66mg,0.14mmol)的THF(2mL)溶液中。在1hr期間使形成的混合物暖至-40℃。將該反應(yīng)混合物冷卻至-78℃，攪拌15分鐘，然后通過滴加氯代硫羰甲酸苯酯(0.094mL,0.7mmol)的THF(2mL)溶液進行處理。10分鐘后移去干冰浴。進一步反應(yīng)3hr后添加碳酸氫鈉使反應(yīng)驟停。用二氯甲烷(2×25mL)提取該混合物。合并提取液，干燥(硫酸鎂)后濃縮得粗物質(zhì)。用制備性TLC(硅膠，乙酸乙酯)純化而得14α-O-苯氧基硫羰基-14β-甲基馬可福胺A。向14α-O-苯氧基硫羰基-14β-甲基馬可福胺A(64mg,0.1mmol)于甲苯(5mL)的溶液中加入AIBN(2,2′-氮雜二異丁腈，3.3mg)，接著添加三丁基氫化錫(54μl,0.2mmol)。將該混合物回流3hr。蒸除溶劑后，通過制備性TLC(硅膠；乙酸乙酯)純化殘余物得14β-甲基馬可福胺A。制備例2017-酮基馬可福胺A(式7)的另一合成法在回流下、一小時期間，往馬可福胺A(65g,0.136mol)和碳酸氫鈉(137g,1.63mol)于四氫呋喃(THF,2L)和水(1.25L)的溶液中滴加碘(206g,0.81mol)于THF(1.25L)中的溶液。(也可在20～25℃下將該混合物攪拌16小時)。任其緩慢冷卻至20～25℃(2.5hr)后，用飽和硫代硫酸鈉溶液(1.5L)使反應(yīng)驟停，再用乙酸乙酯(2×1L)提取。合并有機層，用飽和硫代硫酸鈉(1L)溶液洗滌，干燥(硫酸鎂)，過濾，蒸發(fā)，然后在真空干燥箱(65℃)中干燥一夜，得62g粗制17-酮基馬可福胺A(式7)，NRM(300MHz,CDCl3)7.68,6.80,6.70,6.32,4.90,3.75,3.23,3.09,2.80,2.65,2.49-2.21,2.08,1.98-1.45,1.46,1.44,1.09和0.90δ。也可應(yīng)用一氯化碘(ICl)代替碘。制備例2116-二硫苯基-17-酮基馬可福胺A(式20)在-78℃下通過套管將粗制17-酮基馬可福胺A(制備例20,5g,10.2mmol)于THF(150mL)中加入LDA溶液，該LDA溶液是通過在0°下的THF(100mL)中將正丁基鋰(1.6M,24.8mL,0.04mmol)滴加到二異丙胺(5.7mL,0.041mol)中而制備的。在1hr中讓反應(yīng)混合物緩慢地暖至-50℃。然后用二硫二苯(4.4g,0.02mol)處理形成的混合物。立刻用飽和碳酸氫鈉溶液(100mL)使反應(yīng)驟停，再用二氯甲烷(300mL)提取。干燥(硫酸鎂)有機相，濃縮(8g)，用色譜法(硅膠，120g；乙酸乙酯/己烷，60/40)處理得標題化合物，MS(FAB)=708(M++H)；NMR(300MHz,CDCl3)7.74,7.71,7.64,7.45-730,6.81,6.72,6.32,4.91,3.70,3.16,3.01,2.75,2.53,2.35,2.15-1.50,1.47,1.45,1.06和0.82δ。制備例2216-苯硫基-16-苯亞磺?；?sulfoxyphenyl)-17-酮基馬可福胺A(式21)在-78℃下氮氣氣氛中，往16-二硫苯基-17-酮基馬可福胺A(制備例21,10g,14mmol)于二氯甲烷(250mL)的溶液中滴加間-氯過苯甲酸(64％,4.2g,15.5mmol)的二氯甲烷(200mL)溶液達15分鐘。立刻用飽和硫代硫酸鈉(200mL)使反應(yīng)驟停，用飽和碳酸氫鈉(200mL)稀釋，再用二氯甲烷(200mL)提取。干燥(硫酸鎂)，接著在減壓下濃縮得標題化合物，NMR(300MHz,CDCl3)8.0-7.29,6.80,6.70,6.31,4.90,3.68,3.41,3.14,3.07,2.82,2.80-2.65,2.16,2.05-1.1,1.47,1.43,0.96和0.83δ。制備例2316-苯硫基-15,16-脫氫-17-酮基馬可福胺A(式22)將粗的16-苯硫基-16-苯亞磺?；?17-酮基馬可福胺A(式21，制備例22,11g)在甲苯(250mL)中回流45分鐘，冷卻至20～25℃，用飽和碳酸氫鈉(300mL)稀釋，再用乙酸乙酯(300mL)提取。將有機層干燥(硫酸鎂)，濃縮得標題化合物，MS(FAB)=598(M++H)；HRMS(M/Z,M++H)C34H35N3O5S+H1，計算值=598.2376，觀測值=598.2387；NMR(300MHz,CDCl3)8.18,7.55-7.45,7.29-7.45,6.83,6.70,6.34,5.92,4.91,3.87,3.30,3.21,3.08,2.80,2.35,2.10,2.03,1.78,1.46,1.44,1.11和0.88δ。制備例2416-苯亞磺酰基-15,16-脫氫-17-酮基馬可福胺A(式23)在-78℃下，往粗的16-苯硫基-15,16-脫氫-17-酮基馬可福胺A(式22，制備例23,10.6g)于二氯甲烷(300mL)的溶液中滴加間-氯過苯甲酸(64％,2.8g)的二氯甲烷(125mL)溶液。用飽和硫代硫酸鈉(300mL)和飽和碳酸氫鈉(300mL)使反應(yīng)驟停，然后提取入二氯甲烷(300mL)。將有機層干燥(硫酸鎂)，過濾后濃縮得標題化合物，NMR(300MHz,CDCl3)7.75-7.3,6.81,6.75-6.6,6.31,4.90,3.78-3.58,3.22,2.98,2.88-2.45,2.12-1.55,1.46,1.44,1.12和0.88δ。制備例2514α-羥基-15,16-脫氫-17-酮基馬可福胺A(式9a)往粗的16-苯亞磺?；?15,16-脫氫-17-酮基馬可福胺A(式23，制備例24,13g)的甲醇水溶液(10/1,300mL)中加入二乙胺(15mL)?；亓?.5hr后使反應(yīng)混合物冷卻至20～25°，用水(450mL)稀釋，提取入二氯甲烷(500mL)。干燥(硫酸鎂)，接著濃縮，用色譜法(硅膠，130g；丙酮/二氯甲烷30/70)處理得標題化合物。制備例2614α-羥基-14β-乙烯基馬可福胺A(式30)在-78°下用乙烯基溴化鎂的THF溶液(1M,4.0mL,4mmol)處理-78°的14-酮基馬可福胺A(式16，制備例15,200mg,0.4mmol)于THF(5mL)中的溶液。在-78°下攪拌形成的混合物達2hr，再暖至20～25°。在20～25°下攪拌2hr。添加碳酸鈉(10％,3mL)使反應(yīng)驟停。用二氯甲烷(30mL)稀釋該混合物，用飽和氯化銨溶液洗滌，干燥(硫酸鎂)后濃縮。用色譜法(硅膠；己烷/丙酮，6/4)處理殘余物而得標題化合物，NMR(300MHz,CDCl3)7.86,6.78&6.67,6.32,6.58,5.43,5.18,4.89,3.7,3.11,2.95,2.8-1.5,1.44,1.08和0.82δ；MS(FAB,M/Z,[M+H])=520。制備例2714α-羥基-14β-甲基馬可福胺AN-氧化物(式32)在0°下，用間-氯過苯甲酸(20mg)處理14α-羥基馬可福胺A(制備例11,30mg)于二氯甲烷(3mL)中的溶液。攪拌該混合物0.5hr，然后在碳酸氫鈉水溶液(5％,10mL)和二氯甲烷(20mL)之間分配。分層后，用二氯甲烷(10mL)提取水層。合并后的有機提取液用硫酸鎂干燥，過濾，在0°和減壓下蒸發(fā)，用三乙胺(30μl)處理，濃縮得標題化合物，NMR(300MHz,CD3OD)6.91&6.70,6.36,4.91,4.08&3.76,3.5-3.1,3.12,2.8-1.6,1.46&1.44,1.50和0.93(s,3H)δ。制備例2814α-羥基-15α-甲基馬可福胺A(式35)將14α-羥基-15α-甲基-17-酮基馬可福胺A(制備例32,90mg,0.18mmol)溶于THF(10mL)，在0°下用甲硼烷甲硫醚復(fù)合物(12M,0.18mL)處理。在0°下攪拌該混合物達2hr，然后添加甲醇(0.4mL)，又攪拌1hr。蒸去溶劑后，用色譜法(硅膠；丙酮/二氯甲烷，30/70)處理殘余物得標題化合物，NMR(300MHz,CDCl3)8.39,6.79&6.70,6.36,4.91,3.81,3.67,3.03,3.11,2.68&1.86,2.7-1.2,1.44,1.02,1.11和0.85δ；HRMS(FAB,M/Z,[M+H])關(guān)于C29H37N3O5+H的計算值=508.2811,實測值=508.2840。制備例2914,17-二酮基-15α-甲基馬可福胺A(式36)在-78℃下用DMSO(45μl)處理草酰氯(40μl)于無水二氯甲烷(5mL)中的溶液。在-78℃下攪拌該混合物達1hr。滴加14α-羥基-15α-甲基-17-酮基馬可福胺A(制備例33,27mg)于二氯甲烷(2mL)中的溶液。在-78°下攪拌該反應(yīng)混合物20分鐘。向該反應(yīng)混合物中添加TEA(0.3mL)，在20分鐘內(nèi)讓該反應(yīng)混合物暖至20～25°。將該混合物在碳酸鈉(10％,10mL)和二氯甲烷(10mL)之間分配。將有機層干燥(硫酸鎂)后濃縮。用色譜法(硅膠；甲醇/二氯甲烷，1/20)處理殘余物得標題化合物，HRMS(FAB,M/Z,[M+H])關(guān)于C28H31N3O6+H的計算值=506.2291,實測值=506.2280。制備例3014α-羥基-14β-甲基-15α-甲基-17-酮基馬可福胺A(式37)在-78°下，用甲基溴化鎂的醚溶液(3M,0.2mL,0.6mmol)處理-78°的14,17-二酮基-15α-甲基馬可福胺A(制備例29,25mg,0.05mmol)于二氯甲烷(5mL)中的溶液。在-78°下攪拌形成的混合物達0.5hr。添加碳酸鈉(10％，數(shù)滴)使反應(yīng)驟停。用二氯甲烷(10mL)稀釋該混合物，干燥(硫酸鎂)后濃縮。用色譜法(硅膠；甲醇/二氯甲烷，4/96)處理殘余物而得標題化合物，NMR(300MHz,CDCl3)8.13,6.78,6.70,6.33,4.91,3.75,3.16,3.05,2.78,2.68-2.57,2.42-2.0,1.64,1.45,1.44,1.11,1.04和0.92δ。制備例3114α-羥基-14β-甲基-15α-甲基馬可福胺A(式38)將14α-羥基-14β-甲基-15αα-甲基-17-酮基馬可福胺A(制備例30,15mg,0.028mmol)溶于THF(10mL)，接著在0°下用甲硼烷甲硫醚復(fù)合物(10M,0.02mL)處理。在0°下攪拌該混合物達2hr，然后添加甲醇(0.4mL)，又攪拌1hr。蒸去溶劑后，用色譜法(硅膠；丙酮/二氯甲烷，30/70)處理殘余物得標題化合物，NMR(300MHz,CDCl3)7.82,6.79,6.67,6.33,4.90,3.65,3.09,2.98,2.69,2.60-2.22,2.06,1.87,1.85-1.75,1.44,1.43,1.10,0.94和0.86δ。制備例3214α-羥基-15α-甲基-17-酮基馬可福胺A(式34)在20～25°下，用甲基溴化鎂溶液(3M,1.0mL,5當量)處理14α-羥基-15,16-脫氫-17-酮基馬可福胺A(式9a,300mg)于THF(12mL)中的混合物。將形成的混合物回流1.5hr，然后冷卻至20～25°。添加飽和氯化銨(3mL)使反應(yīng)驟停。用二氯甲烷(30mL)稀釋該混合物，用飽和氯化銨溶液洗滌，在硫酸鎂上干燥后濃縮。將該濃縮物用色譜法(硅膠；甲醇/二氯甲烷，1/20)處理得標題化合物，NMR(300MHz,CDCl3)7.90,6.80&6.70,6.32,4.89,4.36,3.74,3.20,3.06,2.78&2.10,2.5-1.8,1.46&1.44,1.13,1.12和0.88δ。也可應(yīng)用二甲基銅鋰試劑制備標題化合物。往0°下的碘化銅(0.4g,0.002mol)/THF中滴加甲基鋰(1.4M,9mL,0.013mol)。將形成的混合物攪拌15分鐘，然后在0°下滴加14α-羥基-15,16-脫氫-17-酮基馬可福胺A(式9a,0.Sg,0.001mol)于THF(12mL)中的溶液進行處理。將該混合物攪拌15分鐘后，用飽和氯化銨(25mL)驟停反應(yīng)，再提取入乙酸乙酯(30mL)。在硫酸鎂上干燥有機提取物，過濾后濃縮得粗物質(zhì)，用色譜裝置(4mm板；甲醇/二氯甲烷，4/96)純化得標題化合物。制備例3314,17-二酮基-15α-甲基馬可福胺A(式36)在-78°下用DMSO(45μl)處理草酰氯(40μl)于無水二氯甲烷(5mL)中的混合物。在-78°下攪拌該混合物達1hr。滴加14α-羥基-15α-甲基-17-酮基馬可福胺A(制備例33,27mg)于二氯甲烷(2mL)中的溶液。在-78℃下將該反應(yīng)混合物攪拌20分鐘。向反應(yīng)混合物中添加三乙胺(0.3mL),在20分鐘內(nèi)使該反應(yīng)混合物暖至20～25°。在碳酸鈉(10％,10mL)和二氯甲烷(10mL)之間分配該混合物。進行相分離，將有機層在硫酸鎂上干燥后濃縮。用色譜法(硅膠；甲醇/二氯甲烷，1/20)處理該濃縮物而得標題化合物，HRMS(FAB,M/Z,[M+H]關(guān)于C28H31N3O6+H的計算值=506.2291，實測值=506.2280。實施例124,25,26,27,28-五去甲馬可福胺A(Ⅱ)將馬可福胺A(I,8.5g,0.018mol)溶于甲酸(95％的純度,100mL)。在20～25°下將該混合物攪拌16hr。除去揮發(fā)性組分，將殘余物重溶于甲醇(100mL)。濃縮該混合物，通過色譜法(硅膠；甲醇/二氯甲烷，10/90)純化殘余物得標題化合物，選擇的NMR(300MHz,CDCl3+CD3OD)0.80,1.09,1.4～2.0,2.2～2.8,3.10,3.87,6.52和6.61δ；MS(FAB,M/Z,[MtH+])=412。實施例27-O-異戊烯基(Prenyl)-24,25,26,27,28-五去甲馬可福胺A(Ⅲ)往已在丙酮(40mL)中攪拌了5分鐘的4-溴-2-甲基-2-丁烯(1.0ml,8.7mmol)和碘化鉀(1.44g,8.7mmol)中加入碳酸鉀(1.6g,11.7mmol)，接著滴加24,25,26,27,28-五去甲馬可福胺A(Ⅱ，實施例1,1.2g,0.0029mol)于丙酮/水(10mL/6mL)中的混合液。將該反應(yīng)混合物攪拌0.25hr，用飽和亞硫酸鈉溶液(100mL)使反應(yīng)驟停，再提取入乙酸乙酯(100mL)。在硫酸鎂上干燥有機層，過濾后減壓濃縮而得標題化合物，NMR(400MHz,CDCl3)7.90,6.79,6.57,5.50,4.49,3.70,3.10,2.99,2.66,1.83,2.55-2.5,2.39,2.29,2.14,1.95-1.30,1.76,1.61,1.10和0.81δ。實施例37-O-(2′,3′-環(huán)氧-3′-甲基)丁基-24,25,26,27,28-五去甲馬可福胺A(Ⅳ)在20～25°下往7-異戊烯基-24,25,26,27,28-五去甲馬可福胺A(Ⅲ，實施例3,1.4g,2.9mmol)于二氯甲烷(30mL)的溶液中一次性加入3-氯過苯甲酸(2.4g,8.3mmol)。攪拌0.5hr后，添加亞硫酸氫鈉(6g，于50mL水中)，繼續(xù)攪拌0.5hr。用碳酸氫鈉(飽和，100mL)使反應(yīng)驟停，提取入乙酸乙酯(100mL)。分離有機提取物，在硫酸鎂上干燥，過濾后濃縮得非對映體混合物形式的標題化合物，未進一步純化而應(yīng)用該化合物，NMR(400MHz,CDCl3)8.52,8.44,6.82,6.59,4.56-4.47,3.92-3.84,3.69,3.26-3.14,3.11,3.01,2.70-2.55,3.39,2.30,2.15,1.98-1.50,1.41,1.40-1.20,1.10,0.82和0.81δ。實施例425-羥基-24,25-二氫馬可福胺A(Ⅴ)在20～25°下的氮氣氣氛中，往7-O-(2′,3′-環(huán)氧-3＇-甲基)-丁基-24,25,26,27,28-五去甲馬可福胺A(Ⅳ,1.2g,2.4mmol)于THF(30mL)的混合液中滴加氯化錫(Ⅳ)(0.2mL)。攪拌0.25hr后，用氟化鉀(10％水溶液，50mL)使反應(yīng)驟停，提取入乙酸乙酯(100mL)。分離有機提取物，在硫酸鎂上干燥，過濾后濃縮得非對映體混合物形式的標題化合物，未進一步純化而應(yīng)用該化合物。選擇的NMR(400MHz,CDCl3)8.17,7.87,6.80-6.45,4.40,4.25,4.05-3.90和3.15δ。實施例524,25-二氫-25-氧代馬可福胺A(Ⅵ)在-78°下，往草酰氯(0.045mL)的二氯甲烷(5mL)溶液中緩慢滴加DMSO(0.06mL)的二氯甲烷(1mL)溶液。在-78°下攪拌0.25hr后，滴加25-羥基-24,25-二氫馬可福胺A(Ⅴ，實施例4,60mg,0.12mmol)于二氯甲烷(1mL)中的溶液。將該反應(yīng)混合物攪拌0.25hr，然后用TEA(0.25mL)使反應(yīng)驟停，再在20～25°下攪拌0.25hr。在碳酸氫鈉(飽和，25mL)和乙酸乙酯(25mL)之間分配該反應(yīng)混合物。分離有機提取物，在硫酸鎂上干燥，過濾，濃縮后用色譜法(硅膠；甲醇/二氯甲烷(5/95))處理得標題化合物，NMR(400MHz,CDCl3)7.45,6.77,6.64,4.89,3.70,3.11,3.02,2.70,1.85,2.65,2.40,2.31,2.15,1.95-1.85,1.80-1.0,1.53,1.51,1.13和0.85δ；HRMS(FAB,M/Z,[M+H])關(guān)于C28H35N3O5+H的計算值=494.2655,實測值=494.2662。實施例624,25-二氫-25-亞甲基馬可福胺A(Ⅶ)在20～25°下，往甲基三苯基溴化鏻(70mg,0.2mmol)的醚(5mL)溶液中滴加正丁基鋰(1.6M于己烷中，0.13mL,0.2mmol)。在氮氣氣氛和20～25°下將所得混合物攪拌5分鐘，然后滴加24,25-二氫-25-氧代馬可福胺A(Ⅵ，實施例5,25mg,0.05mmol)的THF(5mL)溶液進行處理。將該反應(yīng)混合物攪拌0.25hr，用水(25mL)使反應(yīng)驟停，提取入乙酸乙酯(25mL)。分離有機提取物，在硫酸鎂上干燥，過濾，濃縮后用色譜法(硅膠；丙酮/已烷，40/60)處理得標題化合物，NMR(400MHz,CDCl3)7.67,6.72,6.47,5.24,5.08,4.90,4.77,3.60,2.30,3.04,2.96,2.60&1.78,2.58-2.52,2.23,2.08,1.88-1.20,1.44&1.42和1.10&0.80δ；HRMS(FAB,M/Z,[M+H])關(guān)于C29H37N304+H的計算值=492.2862，實測值=492.2858。實施例724,25-環(huán)氧馬可福胺A(Ⅷ)將馬可福胺A(I,0.25g,0.5mmol)和間-氯過苯甲酸(純度60％,0.4g,1.4mmol)于二氯甲烷(25mL)中的混合物攪拌16hr。用亞硫酸氫鈉(1.1g于15mL水中)處理該反應(yīng)混合物，攪拌0.5hr，用碳酸氫鈉(飽和，100mL)使反應(yīng)驟停，提取入二氯甲烷(25mL)。在硫酸鎂上干燥有機提取物，過濾，濃縮后用色譜法(硅膠；丙酮/二氯甲烷，40/60)得作為不可拆分的非對映體混合物的標題化合物，選擇的NMR(400MHz,CDCl3)8.01&7.86,6.80&6.58,5.36-5.30&3.00-2.97,3.70,3.12,2.69&1.85和2.40δ。實施例824,25-二氫-25-亞甲基帕拉郝金胺A(Ⅶ)按實施例1～6的一般操作并作非關(guān)鍵性變動，但起始用PPPA，得標題化合物。實施例914α-羥基-14β-甲基-24,25-二氫-25-亞甲基馬可福胺A(Ⅶ)按實施例1～6的一般操作并作非關(guān)鍵性變動，但起始用14α-羥基-14β-甲基馬可福胺A，得標題化合物。實施例1014α-羥基-15α-甲基-24,25-二氫-25-亞甲基馬可福胺A(Ⅶ)按實施例1～6的一般操作并作非關(guān)鍵性變化，但起始用14α-羥基-15α-甲基馬可福胺A，得標題化合物。實施例1124,25-環(huán)氧帕拉郝金胺A(Ⅷ)按實施例7的一般操作并作非關(guān)鍵性變化，但起始用帕拉郝金胺A，得標題化合物。實施例1214α-羥基-14β-甲基-24,25-環(huán)氧馬可福胺A(Ⅷ)按實施例7的一般操作并作非關(guān)鍵性變化，但起始用14α-羥基-14β-甲基馬可福胺A，得標題化合物。實施例1314α-羥基-15α-甲基-24,25-環(huán)氧馬可福胺A(Ⅷ)按實施例7的一般操作并作非關(guān)鍵性變動，但起始用14α-羥基-15α-甲基馬可福胺A，得標題化合物。實施例14N-(18a)-脫甲基-2-脫氧帕拉郝金胺A(方法1)按國際公開WO92/00300提出的方法，將N-(18a)-脫甲基帕拉郝金胺A(50mg,0.1mmol)溶于乙二醇二甲醚(甘醇二甲醚，5mL)和水(0.5mL)。然后用硼氫化鋰(0.15g,6.9mmol)處理該混合物，加熱至回流達5hr。用鹽水(25mL)使反應(yīng)混合物驟冷，提取入乙酸乙酯。分離有機相，在硫酸鎂上干燥，過濾后濃縮。用硅膠色譜法純化濃縮物而得N-(18a)-脫甲基-2-脫氧帕拉郝金胺A。實施例15N-(18a)-脫甲基-2-脫氧帕拉郝金胺A(方法2)可這樣制備N-(18a)-脫甲基-2-脫氧帕拉郝金胺A，即起始用帕拉郝金胺A，通過WO97/03988中提出的方法將它轉(zhuǎn)變成2-脫氧帕拉郝金胺A。將2-脫氧帕拉郝金胺A(10mg)的DMF(0.4mL)溶液加到在500mL廣口燒瓶中強烈生長的刺孢小克銀漢霉雅致亞種(Cunninghamellaechinulatasubsp.elegans)(UUC7602)或刺孢小克銀漢霉(C.echinulata)(UC7330)培養(yǎng)物(100mL)中。在28°下進行培養(yǎng)，根據(jù)培養(yǎng)物而定，連續(xù)振蕩1～3天，得N-(18a)-脫甲基-2-脫氧帕拉郝金胺A。通過用二氯甲烷徹底提取，離心，在減壓下除去溶劑而實現(xiàn)分離。通過TLC和HPLC分析殘余物質(zhì)。用各種色譜技術(shù)進行純化，通過NMR和MS完成對結(jié)構(gòu)的確定。表A表A(續(xù))表A(續(xù))表B權(quán)利要求1．式(Ⅶ)的25-亞甲基化合物其中(Ⅰ)馬可福胺A(a)n是1，(b)R14是R14α:R14β，其中R14α是-H，且R14β是-H，(c)R15是R15α:R15β，其中R15α是-H，且R15β是-H；(Ⅱ)帕拉郝金胺A(a)n是0，(b)R14是R14α:R14β，其中R14α是-OH，且R14β是-CH3，(c)R15是R15α:R15β，其中R15α是-H，且R15β是-H；(Ⅲ)14-羥基-14-烷基馬可福胺A(a)n是1，(b)R14是R14α:R14β，其中R14α是-OH，且R14β是C1-C4烷基，(c)R15是R15α:R15β，其中R15α是-H，且R15β是-H；(Ⅳ)14-羥基-15-烷基馬可福胺A(a)n是1，(b)R14是R14α:R14β，其中R14α是-OH，且R14β是-H，(c)R15是R15α:R15β，其中R15α是C1-C4烷基，且R15β是-H及其藥物上可接受的鹽。2．權(quán)利要求1的式(Ⅶ)的亞甲基化合物，其中該藥物上可接受的鹽是選自下列酸的鹽，即甲磺酸、鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、硝酸、苯甲酸、檸檬酸、酒石酸、富馬酸、馬來酸，CH3-(CH2)n-COOH，其中n是0～4,HOOC-(CH2)n-COOH，其中n同上述定義。3．權(quán)利要求1的式(Ⅶ)的亞甲基化合物，其中n1是0。4．權(quán)利要求3的式(Ⅶ)的亞甲基化合物，它是24,25-二氫-25-亞甲基帕拉郝金胺A。5．權(quán)利要求1的式(Ⅶ)的亞甲基化合物，其中n1是1。6．權(quán)利要求5的式(Ⅶ)的亞甲基化合物，它選自下組物質(zhì)24,25-二氫-25-亞甲基馬可福胺A，14α-羥基-14β-甲基-24,25-二氫-25-亞甲基馬可福胺A和14α-羥基-15α-甲基-24,25-二氫-25-亞甲基馬可福胺A。7．權(quán)利要求6的式(Ⅶ)的亞甲基化合物，它是24,25-二氫-25-亞甲基馬可福胺A。8．式(Ⅷ)的24,25-環(huán)氧化合物其中(Ⅰ)馬可福胺A(a)n是1，(b)R14是R14α:R14β，其中R14α是-H，且R14β是-H，(c)R15是R15α:R15β，其中R15α是-H，且R15β是-H；(Ⅱ)帕拉郝金胺A(a)n是0，(b)R14是R14α:R14β，其中R14α是-OH，且R14β是-CH3，(c)R15是R15α:R15β，其中R15α是-H，且R15β是-H；(Ⅲ)14-羥基-14-烷基馬可福胺A(a)n是1，(b)R14是R14α:R14β，其中R14α是-OH，且R14β是C1-C4烷基，(c)R15是R15α:R15β，其中R15α是-H，且R15β是-H；(Ⅳ)14-羥基-15-烷基馬可福胺A(a)n是1，(b)R14是R14α:R14β，其中R14α是-OH，且R14β是-H，(c)R15是R15α:R15β，其中R15α是C1-C4烷基，且R15β是-H及其藥物上可接受的鹽。9．權(quán)利要求8的式(Ⅷ)的24,25-環(huán)氧化合物，其中該藥物上可接受的鹽是選自下列酸的鹽，即甲磺酸、鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、硝酸、苯甲酸、檸檬酸、酒石酸、富馬酸、馬來酸、CH3-(CH2)n-COOH，其中n是0～4,HOOC-(CH2)n-COOH，其中n同上述定義。10．權(quán)利要求8的式(Ⅷ)的24,25-環(huán)氧化合物，其中n1是0。11．權(quán)利要求10的式(Ⅷ)的24,25-環(huán)氧化合物，它是24,25-環(huán)氧帕拉郝金胺A。12．權(quán)利要求8的式(Ⅷ)的24,25-環(huán)氧化合物，其中n1是1。13．權(quán)利要求12的式(Ⅷ)的24,25-環(huán)氧化合物，它選自下組物質(zhì)24,25-環(huán)氧馬可福胺A，14α-羥基-14β-甲基-24,25-環(huán)氧馬可福胺A和14α-羥基-15α-甲基-24,25-環(huán)氧馬可福胺A。14．權(quán)利要求13的式(Ⅶ)的24,25-環(huán)氧化合物，它是24,25-環(huán)氧馬可福胺A。15．N-(18a)-脫甲基-2-脫氧帕拉郝金胺A及其藥物上可接受的鹽。全文摘要本發(fā)明涉及馬可福胺和帕拉郝金胺,其中該7元氧化環(huán)已被改性而生成25－亞甲基化合物(Ⅶ)和24,25－環(huán)氧化合物(Ⅷ),它們都適用作抗內(nèi)寄生物和外寄生物、尤其抗蠕蟲和節(jié)肢動物的抗寄生物劑。文檔編號A61P33/00GK1230188SQ97197774公開日1999年9月29日申請日期1997年9月5日優(yōu)先權(quán)日1996年9月9日發(fā)明者B·H·李,M·F·科洛斯爾申請人:法瑪西雅厄普約翰美國公司