專利名稱：用于治療與凝血酶有關的疾病的肽基雜環(huán)化合物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一系列肽基雜環(huán)化合物、用于制備這類化合物的中間體以及含有這類化合物的醫(yī)藥組合物。這類化合物是絲氨酸蛋白酶的抑制劑，特別是α-凝血酶的抑制劑，它們可以用于各種與凝血酶有關的疾病，例如靜脈血栓形成和動脈血栓形成等。
背景技術：
隨著人口的迅速老化，血管系統(tǒng)的疾病受到我們社會的很大關注。動脈血栓形成是以心臟病發(fā)作和中風的形式引起死亡的主要原因，而靜脈血栓形成則與肺栓塞有關，它主要是在手術之后或長期不發(fā)作之后發(fā)生。
凝血酶是一種多功能的絲氨酸蛋白酶，關于凝血酶在血栓形成和止血方面的作用已有許多報導(概況可見Tapparelli等人，TIPS(1993)，14，366～76)。凝血酶通過血纖維蛋白原的蛋白酶解形成血纖維蛋白而起一種前凝血劑的作用，以及通過蛋白質C途徑的活化作用(接著通過凝血因子V和VIII的減活作用)而起一種抗凝血劑的作用?；罨傅臐舛仁艿桨▋仍匆蜃雍偷鞍踪|在內的許多反饋機制的限制。除了蛋白質C以外，抗凝血酶III是另一種調節(jié)蛋白質，它能與內源肝素形成一種配合物。這種配合物能與活性凝血酶結合，從而使其減活。
現(xiàn)有的抗凝血劑療法包括使用三類化合物，即肝素類、香豆素類和低分子量肝素類。這些藥物起一種間接地限制活性凝血酶濃度的作用。肝素類和低分子量肝素能與抗凝血酶III反應，而香豆素類能抑制大量維生素K依賴性凝血因子。雖然這些藥物被處方用于治療與靜脈血栓形成和動脈血栓形成有關的疾病，但是它們的使用受到限制，因為它們有許多副作用，其治療作用較緩慢，并且只有香豆素是具有口服活性的(丙酮芐羥香豆素和雙香豆素)。
已經證明，與直接凝血酶抑制劑相比，間接凝血酶抑制劑在控制有關疾病方面的效果較差。因此在許多實驗室正在進行有關具有口服活性的直接凝血酶抑制劑的研究。
這些努力的結果找到了許多能夠直接抑制凝血酶的低肽基化合物。PPACK、阿加曲班(argatroban)、(D)-NAPAP和DUP714就是一些令人感興趣的直接凝血酶抑制劑的例子。
遺憾的是，這些化合物中只有少數(shù)幾種具有弱的口服活性，并且其中的大多數(shù)對于凝血酶與其他絲氨酸蛋白酶的選擇性很差。因此，仍有必要尋找一些能夠顯示出對其他絲氨酸白蛋白酶具有良好選擇性并且其本身具有口服活性的直接凝血酶抑制劑。
對本發(fā)明的概述本發(fā)明涉及由通式I表示的化合物或其可藥用的鹽，所說通式I為
式中A選自下列基團C1-8烷基、羧基C1-4烷基、C1-4烷氧基羰基C1-4烷基、苯基C1-4烷基、被取代的苯基C1-4烷基(其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、甲?；1-4烷氧基羰基、C1-12烷基羰基、苯基C1-4烷氧基羰基、C3-7環(huán)烷基羰基、苯基羰基、被取代的苯基羰基(其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、C1-4烷基磺?；?、C1-4烷氧基磺酰基、全氟C1-4烷基磺?；?、苯基磺?；⒈蝗〈谋交酋；?其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、10-樟腦磺?；⒈交鵆1-4烷基磺?；?、被取代的苯基C1-4烷基磺酰基、C1-4烷基亞磺酰基、全氟C1-4烷基亞磺?；?、苯基亞磺?；⒈蝗〈谋交鶃喕酋；?其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、苯基C1-4烷基亞磺?；?、被取代的苯基C1-4烷基亞磺?；?-萘基磺?；?、2-萘基磺?；虮蝗〈妮粱酋；?其中的萘基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、1-萘基亞磺?；?-萘基亞磺?；虮蝗〈妮粱鶃喕酋；?其中的萘基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)；D或L氨基酸，它以它的羧基末端偶合到通式I所示的氮原子上，所說氨基酸選自丙氨酸、天冬氨酸、鈴蘭氨酸、甘氨酸、N-C1-8烷基甘氨酸、脯氨酸、1-氨基-1-環(huán)C3-8烷基羧酸、噻唑烷-4-羧酸、5，5-二甲基噻唑烷-4-羧酸、噁唑烷-4-羧酸、2-哌啶酸、纈氨酸、蛋氨酸、胱氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、正亮氨酸、亮氨酸、叔亮氨酸、異亮氨酸、苯基丙氨酸、1-萘基丙氨酸、2-萘基丙氨酸、2-噻吩基丙氨酸、3-噻吩基丙氨酸、[1，2，3，4]-四氫異喹啉-1-羧酸和[1，2，3，4]-四氫異喹啉-2-羧酸，其中所說氨基酸的氨基末端連接到一個選自下列基團的成員上C1-4烷基、四唑-5-基C1-2烷基、羧基C1-4烷基、C1-4烷氧基羰基C1-4烷基、苯基C1-4烷基、被取代的苯基C1-4烷基(其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、1，1-二苯基C1-4烷基、3-苯基-2-羥基丙酰基、2，2-二苯基-1-羥乙基羰基、[1，2，3，4]-四氫異喹啉-1-羰基、[1，2，3，4]-四氫異喹啉-3-羰基、1-甲氨基-1-環(huán)己烷羰基、1-羥基-1-環(huán)己烷羰基、1-羥基-1-苯乙酰基、1-環(huán)己基-1-羥基乙酰基、3-苯基-2-羥基丙?；?，3-二苯基-2-羥基丙?；?、3-環(huán)己基-2-羥基丙酰基、甲?；?、C1-4烷氧基羰基、C1-12烷基羰基、全氟C1-4烷基C0-4烷基羰基、苯基C1-4烷基羰基、被取代的苯基C1-4烷基羰基(其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、1，1-二苯基C1-4烷基羰基、被取代的1，1-二苯基C1-4烷基羰基(其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、全氟C1-4烷基磺酰基、C1-4烷基磺酰基、C1-4烷氧基磺?；⒈交酋；⒈蝗〈谋交酋；?其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、10-樟腦磺?；⒈交鵆1-4烷基磺?；⒈蝗〈谋交鵆1-4烷基磺?；?、全氟C1-4烷基亞磺酰基、C1-4烷基亞磺酰基、苯基亞磺?；⒈蝗〈谋交鶃喕酋；?其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、苯基C1-4烷基亞磺酰基、被取代的苯基C1-4烷基亞磺酰基(其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、1-萘基磺?；?、2-萘基磺?；?、被取代的萘基磺?；?其中的萘基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、1-萘基亞磺?；?、2-萘基亞磺?；捅蝗〈妮粱鶃喕酋；?其中的萘基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)；或者一種含有兩個氨基酸的多肽，其中的第一氨基酸是一種D或L氨基酸，該氨基酸通過其羧基末端連接到通式I示出的氮原子上，該氨基酸選自下列化合物甘氨酸、N-C1-8烷基甘氨酸、丙氨酸、鈴蘭氨酸、脯氨酸、噻唑烷-4-羧酸、5，5-二甲基噻唑烷-4-羧酸、噁唑烷-4-羧酸、1-氨基-1-環(huán)C3-8烷基羧酸、3-羥基脯氨酸、4-羥基脯氨酸、3-(C1-4烷氧基)脯氨酸、4-(C1-4烷氧基)脯氨酸、3，4-脫氫脯氨酸、2，2-二甲基-4-噻唑烷羧酸、2，2-二甲基-4-噁唑烷羧酸、2-哌啶酸、纈氨酸、蛋氨酸、胱氨酸、天冬氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、亮氨酸、叔亮氨酸、異亮氨酸、苯基丙氨酸、1-萘基丙氨酸、2-萘基丙氨酸、2-噻吩基丙氨酸、3-噻吩基丙氨酸、[1，2，3，4]-四氫異喹啉-1-羧酸、[1，2，3，4]-四氫異喹啉-2-羧酸、天冬氨酸-4-C1-4烷基酯和谷氨酸-5-C1-4烷基酯，和第二D或L氨基酸連接到所說第一氨基酸的氨基末端上，該第二氨基酸選自下列化合物苯基丙氨酸、4-苯甲?；交彼?、4-羧基苯基丙氨酸、4-(羧基C0-2烷基)苯基丙氨酸、被取代的苯基丙氨酸(其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、3-苯并噻吩基丙氨酸、4-聯(lián)苯基丙氨酸、高苯基丙氨酸(homophenylalanine)、八氫吲哚-2-羧酸、2-吡啶基丙氨酸、3-吡啶基丙氨酸、4-噻唑基丙氨酸、2-噻吩基丙氨酸、3-(3-苯并噻吩基)丙氨酸、3-噻吩基丙氨酸、色氨酸、酪氨酸、天冬酰胺、3-三-C1-4烷基甲硅烷基丙氨酸、環(huán)己基甘氨酸、二苯基甘氨酸、苯基甘氨酸、蛋氨酸亞砜、蛋氨酸砜、2，2-二環(huán)己基丙氨酸、2-(1-萘基丙氨酸)、2-(2-萘基丙氨酸)、苯基取代的苯基丙氨酸(其中的取代基選自下列的基團C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、天冬氨酸、天冬氨酸-4-C1-4烷基酯、谷氨酸、谷氨酸-5-C1-4烷基酯、環(huán)C3-8烷基丙氨酸、被取代的環(huán)C3-8烷基丙氨酸(其中的環(huán)上取代基是羧基、C1-4烷基羧基、C1-4烷氧基羰基或氨基羰基)、2，2-二苯基丙氨酸以及所有這些氨基酸的各種α-C1-5烷基衍生物，其中所說第二氨基酸的氨基末端是未取代的或者被下列基團之一進行單取代，所說基團是甲?；?、C1-12烷基、四唑-5-基C1-2烷基、羧基C1-8烷基、烷氧基羰基(carboalkoxy)C1-4烷基、苯基C1-4烷基、被取代的苯基C1-4烷基(其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、1，1-二苯基C1-4烷基、C1-6烷氧基羰基、苯基C1-6烷氧基羰基、C1-12烷基羰基、全氟C1-4烷基C0-4烷基羰基、苯基C1-4烷基羰基、被取代的苯基C1-4烷基羰基(其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、1，1-二苯基C1-4烷基羰基、C1-4烷基磺?；1-4烷氧基磺?；?、全氟C1-4烷基磺?；?、苯基磺?；⒈蝗〈谋交酋；?其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、10-樟腦磺?；?、苯基C1-4烷基磺?；?、被取代的苯基C1-4烷基磺?；?、C1-4烷基亞磺?；⑷鶦1-4烷基亞磺?；⒈交鶃喕酋；⒈蝗〈谋交鶃喕酋；?其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、苯基C1-4烷基亞磺酰基、被取代的苯基C1-4烷基亞磺?；?、1-萘基磺?；?、2-萘基磺?；?、被取代的萘基磺酰基(其中的萘基取代基選自C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、1-萘基亞磺?；?、2-萘基亞磺?；捅蝗〈妮粱鶃喕酋；?其中的萘基取代基選自C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)；R1選自氫原子和C1-5烷基；R2選自下列基團氨基C2-5烷基、胍基C2-5烷基、C1-4烷基胍基C2-5烷基、二C1-4烷基胍基C2-5烷基、脒基C2-5烷基、C1-4烷基脒基C2-5烷基、二C1-4烷基脒基C2-5烷基、C1-3烷氧基C2-5烷基、苯基、被取代的苯基(其中的取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個氨基、脒基、胍基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、鹵素原子、全氟C1-4烷基、C1-4烷基、C1-3烷氧基或硝基)、芐基、苯基、被取代的芐基(其中的取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個氨基、脒基、胍基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、鹵素原子、全氟C1-4烷基、C1-4烷基、C1-3烷氧基或硝基)、羥基C2-5烷基、C1-5烷基氨基C2-5烷基、C1-5二烷基氨基C2-5烷基、4-氨基環(huán)己基C0-2烷基和C1-5烷基；P是0或1；B是
其中，n是0～3，R3是H或C1-4烷基以及B的羰基部分連接到E上；E是一個選自下列的雜環(huán)噁唑啉-2-基、噁唑-2-基、噻唑-2-基、噻唑-5-基、噻唑-4-基、噻唑啉-2-基、咪唑-2-基、4-氧代-2-喹喔啉-2-基、2-吡啶基、3-吡啶基、苯并[b]噻吩-2-基、苯并噁唑-2-基、苯并咪唑-2-基、苯并噻唑-2-基、三唑-4-基、三唑-6-基、四唑-2-基、嘧啶-2-基、喹啉-2-基、吲哚-2-基、吡唑-2-基、4，5，6，7-四氫苯并噻唑-2-基、萘并[2，1-d]噻唑-2-基、萘并[1，2-d]噻唑-2-基、喹喔啉-2-基、異喹啉-1-基、異喹啉-3-基、苯并[b]呋喃-2-基、吡嗪-2-基、喹唑啉-2-基、異噻唑-5-基、異噻唑-3-基、嘌呤-8-基以及一種被取代的雜環(huán)，其中的取代基選自C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基、C1-4烷氧基羰基、羥基或苯基C1-4烷基氨基羰基。在本發(fā)明中所用的術語都是常用的術語并且都是本領域技術人員所熟知的術語。但是下面對一些可能具有其他含義的術語加以說明?！案髯元毩⒌亍笔侵府斁哂幸粋€以上的取代基時，這些取代基可以相互不同。術語“烷基”表示直鏈、環(huán)狀或支鏈狀的烷基，而“烷氧基”表示O-烷基，其中烷基的定義同上。“CBZ”表示芐氧基羰基?！癇OC”表示叔丁氧基羰基，而“Ts”表示甲苯磺?；?、“DCC”表示1，3-二環(huán)己基碳化二亞胺，“DMAP”表示4-N′，N-二甲基氨基吡啶，以及“HOBT”表示1-羥基苯并三唑水合物。“Dansyl”表示5-二甲氨基-1-亞萘基磺酰胺，以及“FMoc”表示N-(9-芴基甲氧基羰基)。
對本發(fā)明的詳細描述本發(fā)明的化合物可以按流程I所示的方法制備。所示的例子制備了這樣一種化合物，其中的A是一種多肽，其中的第一氨基酸是L-脯氨酸，第二氨基酸是N-甲基-D-苯基丙氨酸，R1是氫，R2是脒基C4烷基，p是0以及E是苯并噁唑-2-基。其他可以按此一般流程制備的化合物列于后面并作適當?shù)恼{整。
該流程的出發(fā)點是一種天然的或非天然的氨基酸。化合物Ia按已知的合成方法制備，以獲得一種受保護的氨基酸，其中的α-氨基受CBZ的保護，而ω-氨基受Ts的保護。見Culvenor等人，化學協(xié)會期刊(J.Chem.Soc.D.)1969，19，1091。這些保護基可以不同。在流程I中，所說的α-氨基和ω-氨基保護基必須是一種在中等酸性的條件下穩(wěn)定并用各為專用的方法脫除的保護基。適宜的α-氨基和ω-氨基保護基的例子分別地列出如下FMOC-TS、FMOC-NO2和CBZ-NO2。其他適宜的保護基的例子可以參考Green.Theodora.《有機合成中的保護基團》(Protecting Groups in Organic Synthesis)；John Wiley&Sons.紐約，1981。
流程I
按照Greco等人，美國化學協(xié)會期刊(Journal Of The AmericanChemical Society)，1995，117，1225所記載的方法，在THF中和在0～10℃下將化合物Ia偶合到1，1′-羰基二咪唑上，接著在-42℃用DIBAL/己烷處理以獲得醛Ib。也可以采用在甲苯中在0℃回流的條件下使用雙(N-甲基哌嗪基)氫化鋁將化合物Ia直接轉變成Ib(Hubert等，有機化學雜志(Journal Of Organic Chemistry)1984，49，2279)。使化合物Ia直接轉變成Ib的其他方法是在THF中和在25℃回流的條件下使用甲硼烷-二甲硫來進行，見Brown等，《合成》(Synthesis)1979，704。還有另一種方法是使用三乙胺、BOP和N.O-二甲基羥基胺鹽酸化物將所說羧酸轉變成相應的Weinreb Amide(酰胺)。然后在THF中用LAH將形成的酰胺還原，獲得相應的醛。
氰醇Ic可以通過在室溫下將氰化鉀加入醛Ib在水、甲醇和乙酸乙酯的乳液中而制得?？晒┻x擇地，化合物Ic也可以通過在室溫下將醛Ib、丙酮氰醇和三乙胺合并加入二氯甲烷中而制得。亞氨酸酯Id可通過在甲醇中用氣體氯化氫處理化合物Ic而制得。苯并噁唑If可通過在回流的條件下，在乙醇中加熱化合物Id和Ie而制得。
胺Ig可以通過使化合物If氫解的方法來制備，也就是使用Pd(OH)2/C作為催化劑并使用一種給氫溶劑，在室溫和在大氣壓下或在提高的壓力下進行。在合適的反應條件下也可以使用其他的催化劑，例如鈀/碳或鈀黑。其他可以用來脫除CBZ基的反應試劑包括肼、碘代三甲基硅烷、甲磺酸/茴香醚和三溴化硼。
化合物Ig可以在室溫下用酸Ih HOBT和DCC在CH3CN中進行偶合，從而獲得偶合醇Ii。其他適用的偶合劑包括BOP、BOP-Cl和PyBrOP。
化合物Ii可以使用一種全碘代烷(periodinane)在一種無水的非質子傳遞溶劑中將其氧化成化合物Ij。流程I的最后步驟是在諸如茴香醚、茴香硫醚、五甲苯、二甲硫和甲酚等碳陽離子清除劑的存在下，用HF使化合物Ij脫除保護，接著通過反相色譜法獲得最終產品Ik。
為了獲得一種在化合物中的A是C1-4烷基、苯基C1-4烷基和被取代的苯基C1-4烷基的本發(fā)明的化合物，可以將流程I的原料化合物作一些變化。也就是使用2當量氫化鈉在DMF中的溶液，在0℃至室溫的溫度下處理化合物Ia，接著用烷基鹵處理，獲得N-烷基化羧酸。將這種酸按照與流程I相同條件進行處理，從而獲得在流程IA中示出的所需化合物。
流程IA
如果A是C1-4烷氧基羰基、苯基C1-4烷氧基羰基、C1-4烷基羰基、C3-7環(huán)烷基羰基、苯基羰基和被取代的苯基羰基，則流程I可以再作一次變化。也就是將化合物Ia的CBZ基團脫除，然后將所獲的游離胺與一種適當?shù)聂驶衔锓磻＿@類化合物的例子有苯甲酰氯、丙酰氯、氯甲酸甲酯、環(huán)己烷羰基氯、氯甲酸芐酯等。將這種在流程IB中使用的原料化合物按照與流程IA中所用的相同條件進行處理，獲得所需的化合物。
流程IB
同樣地，如果A是C1-4烷基磺酰基、全氟C1-4烷基磺酰基、苯基磺?；?、被取代的苯基磺酰基、C1-4烷基亞磺酰基、全氟C1-4烷基亞磺酰基、苯基亞磺?；⒈蝗〈谋交鶃喕酋；?-萘基磺?；?-萘基磺?；捅蝗〈妮粱酋；?-萘基亞磺?；?-萘基亞磺?；虮蝗〈妮粱鶃喕酋；?，則所需的化合物可以由它們的相應市售芳基磺酰鹵和芳基亞磺酰鹵，按照流程IB制得。
如果A是一種氨基酸，而其氨基末端連接到另一個基團上，則可以再次使用流程I。將這種N-偶合氨基酸(如有需要可加以保護)代替在使用相同反應條件的流程I中的化合物Ih。在該流程中可以使用丙氨酸、天冬酰胺、鈴蘭氨酸、甘氨酸、脯氨酸、2-哌啶酸、纈氨酸、蛋氨酸、胱氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、亮氨酸、叔亮氨酸和異亮氨酸，而這些氨基酸的氨基連接到下列基團上C1-4烷基、(苯基C1-4烷基)、(被取代的苯基C1-4烷基)、(1，1-二苯基C1-4烷基，3-苯基-2-羥基丙?；?、(2，2-二苯基-1-羥乙基羰基)、([1，2，3，4]-四氫異喹啉-1-羰基)、([1，2，3，4]-四氫異喹啉-3-羰基)、(1-甲氨基-1-環(huán)己烷羰基)、(1-羥基-1-環(huán)己烷羰基)、(1-羥基-1-苯基乙酰基)、1-環(huán)己基-1-羥基乙?；?、3-苯基-2-羥基丙酰基、3，3-二苯基-2-羥基丙?；?-環(huán)己基-2-羥基丙?；?、甲?；?、C1-4烷氧基羰基、C1-4烷基羰基、全氟C1-4烷基C0-4烷基羰基、苯基C1-4烷基羰基、被取代的苯基C1-4烷基羰基、1，1-二苯基C1-4烷基羰基、被取代的1，1-二苯基C1-4烷基羰基、全氟C1-4烷基磺?；?、C1-4烷基磺?；?、苯基磺?；⒈蝗〈谋交酋；?、全氟C1-4烷基亞磺?；1-4烷基亞磺?；⒈交鶃喕酋；⒈蝗〈谋交鶃喕酋；?、1-萘基磺?；?、2-萘基磺?；?、被取代的萘基磺?；?、1-萘基亞磺酰基、2-萘基亞磺?；捅蝗〈妮粱鶃喕酋；?。
如果A是一種二鈦并且其氨基末端連接到另一個基團上，則可以再次使用流程I。其中的一個例子是使用基本上與流程I相同的反應條件，用N-甲基-N-CBZ-D-苯基丙氨酰基-L-鈴蘭氨酸代替化合物Ih，從而獲得相應的最終產品。
為了制備一類在通式中的R1是H以及R2是選自下列基團的化合物，則可以再次使用流程I，所說的基團包括氨基C2-5烷基、胍基C2-5烷基、脒基C2-5烷基、C1-3烷氧基C2-5烷基、苯基、被取代的苯基(其中的取代基選自脒基、胍基、C1-4烷基氨基、鹵素原子、全氟C1-4烷基、C1-4烷基、C1-3烷氧基和硝基)、芐基、芳基取代的芐基(其中的取代基選自脒基、胍基、C1-4烷基氨基、鹵素原子、全氟C1-4烷基、C1-4烷基、C1-3烷氧基和硝基)、(吡啶-4-基)氨基C1-4烷基、(吡啶-3-基)氨基C1-4烷基、C1-5烷基氨基C2-5烷基和C1-5烷基。其中的原料化合物Ia可以用下列市售氨基酸來代替，例如精氨酸、亮氨酸、苯基丙氨酸、賴氨酸、對脒基苯基丙氨酸、甲氧基丙基甘氨酸和2-(3-吡啶基)丙氨酸；其中的α氨基以及任何其他反應性取代基適宜地用CBZ、Ts或FMOC保護起來。假若所需的代替物沒有市售，例如在R2為被取代的苯基和被取代的芐基的情況下，則所需的氨基酸可用公開的化學方法來合成。參見D-A-Evans等[四面體(Tetrahedron)1988，44，5525-5540]。
為了制備通式中的E是4-氧代-2-喹喔啉-2-基、苯并咪唑-2-基和苯并噻唑-2-基的化合物，也可以使用流程I。使用2-氨基苯硫酚代替化合物Ie，按照與流程I相同的反應條件進行反應，即可獲得苯并噻唑衍生物；應予說明，不能使用Pd將CBZ脫除。然而，前面所列的任何其他方法皆可使用。
如果E是5-乙酯基(carboethoxy)噻唑-2-基，則可將流程I按照流程Ic所示作出改變，以便獲得所需的化合物。使用胱氨酸乙酯鹽酸化物代替化合物Ie，使用CH2Cl2作為溶劑，在室溫下進行反應，獲得噻唑啉衍生物Il。在室溫下用MnO2將化合物Il的噻唑啉環(huán)氧化，獲得噻唑Im。將Im的羥基氧化，然后用HF/茴香醚除去氨基的保護基，獲得乙酯基衍生物In。
為了制備化合物In的酯類衍生物，可以用已知化學方法改變在Il、In或Im任一種化合物中的乙酯基。我們可以按此方法制備下列的酯類衍生物羧基、苯基C1-4烷基氨基羰基、酰氨基、甲?；推渌檠趸鵆1-4羰基的基團。
流程IC
用于制備本發(fā)明化合物的另一種方法示于流程II中。所示的例子制備了這樣一種化合物，其中，A是L-脯氨酸，該脯氨酸以其N-末端與(1，1-二苯基C2烷基羰基)相連接，R1是氫原子，R2是胍基C3烷基，p是0以及E是噻唑-2-基。其他可以按照該一般流程制備的化合物經適當調整后列于下面。
流程II
以一種市售的酸IIa作為該流程的起點。通過在-20～0℃的溫度和在一種諸如THF的惰性溶劑中，用DCC和2，4，5-三氯苯酚處理，使所說的酸轉變成活性酯類衍生物IIb。通過使用化合物IIc、三乙胺和4-氮茚來處理化合物IIb，可以獲得脯氨酸衍生物IId?？晒┻x擇地，化合物IId也可以在列于流程I中的任一種肽偶合劑存在的條件下，直接用氨基酸IIc處理酸IIa而制得。
NαBoc-Nω-甲苯磺?；彼岬腤einrab酰胺IIe可以按文獻上的方法由被保護的酸制得[DiMaio等，醫(yī)藥化學雜志(Journal ofMedicinal Chemistry)1992，35，3331]。將這種酰胺在-78℃的THF中用化合物IIf來處理，可以獲得酮IIg?？梢允褂靡环N氫化物還原劑，例如硼氫化鈉，在-20℃至室溫下將所獲的酮還原，然后再在室溫下用TFA處理，即可獲得相應的胺IIh。
在DCC和HOBT的存在下和在室溫的乙腈中使化合物IIh和IId偶合，即可獲得偶合醇IIi?？梢杂糜谠摲磻钠渌念惻己蟿┌ū讲⑷?1-基氧基三(二甲氨基)六氟磷酸鏻、雙(2-氧代-3-噁唑烷基)次膦酰氯、2-二甲氨基異丙基氯的鹽酸化物以及溴代三吡咯烷基六氟磷酸鏻。使用全碘代烷(periodinane)在CH2Cl2中將化合物IIi氧化成酮，然后用HF和茴香醚脫除ω-氨基的保護基，即可獲得所需的產物IIj。
為了制備一類在通式中的A是C1-4烷基、苯基C1-4烷基或被取代的苯基C1-4烷基的本發(fā)明的化合物，可以改變流程II中的原料化合物和使用如圖IIA所示的反應條件。
流程IIA
用于流程IIA的原料化合物可由被保護的Weinrab酰胺IIe制得。將所說的酰胺用TFA脫除保護，再用一種合適的基質和氰硼氫化鈉將其還原烷基化，然后用BOC將其保護，從而獲得該N-烷基化的原料化合物。所示的例子是使用苯甲醛作為用于還原烷基化的基質?？梢允褂门c流程II相同的條件和反應試劑處理所說的烷基化原料，即可獲得所需的化合物。
如果A是甲?；?、C1-4烷氧基羰基、苯基C1-4烷氧基羰基、C1-4烷基羰基、C3-7環(huán)烷基羰基、苯基羰基和被取代的苯基羰基，則可以再次改變流程II。在室溫下用TFA將化合物IIe的BOC基團脫除，然后將所獲的游離胺與一種適宜的市售羰基化合物反應。這類化合物的例子有甲酸/乙酸酐、苯甲酰氯、丙酰氯、氯甲酸甲酯、環(huán)己烷碳酰氯等。將該原料按照與流程IIA相同的條件使用，即可獲得所需的化合物。
同樣地，如果A是C1-4烷基磺酰基、全氟C1-4烷基磺?；⒈交酋；?、被取代的苯基磺酰基、C1-4烷基亞磺?；?、全氟C1-烷基亞磺?；?、苯基亞磺?；?、被取代的苯基亞磺?；?、1-萘基磺?；?、2-萘基磺酰基和被取代的萘基磺?；?-萘基亞磺?；?、2-萘基亞磺?；捅蝗〈妮粱鶃喕酋；?，則所需的化合物可以由它們的相應市售芳基磺酰鹵和芳基亞磺酰鹵，按照流程IIA制得。
如果A是一種氨基酸，而其氨基末端連接到另一個基團上，則可以再次使用流程II。所說的N-偶合氨基酸可以購買或由已知的方法制備。將這種氨基酸代替在流程II中的化合物IId并使用相同的反應條件。在該流程中可以使用丙氨酸、天冬酰胺、鈴蘭氨酸、甘氨酸、脯氨酸、2-哌啶酸、纈氨酸、蛋氨酸、胱氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、亮氨酸、叔亮氨酸和異亮氨酸，而這些氨基酸的氨基連接到下列基團上C1-4烷基、苯基C1-4烷基、被取代的苯基C1-4烷基、1，1-二苯基C1-4烷基，3-苯基-2-羥基丙?；?、2，2-二苯基-1-羥乙基羰基、[1，2，3，4]-四氫異喹啉-1-羰基、[1，2，3，4]-四氫異喹啉-3-羰基、1-甲氨基-1-環(huán)己烷羰基、1-羥基-1-環(huán)己烷羰基、1-羥基-1-苯基乙酰基、1-環(huán)己基-1-羥基乙酰基、3-苯基-2-羥基丙酰基、3，3-二苯基-2-羥基丙酰基、3-環(huán)己基-2-羥基丙?；?、甲?；?、C1-4烷氧基羰基、C1-4烷基羰基、全氟C1-4烷基C0-4烷基羰基、苯基C1-4烷基羰基、被取代的苯基C1-4烷基羰基、1，1-二苯基C1-4烷基羰基、被取代的1，1-二苯基C1-4烷基羰基、全氟C1-4烷基磺?；?、C1-4烷基磺酰基、苯基磺?；?、被取代的苯基磺酰基、全氟C1-4烷基亞磺酰基、C1-4烷基亞磺?；?、苯基亞磺酰基、被取代的苯基亞磺?；?、1-萘基磺?；?-萘基磺?；捅蝗〈妮粱酋；?、1-萘基亞磺酰基、2-萘基亞磺?；捅蝗〈妮粱鶃喕酋；?。
如果A是一種二肽并且其氨基末端連接到另一個基團上，則可以再次使用流程II。其中的一個例子是使用基本上與流程II相同的反應條件，用N-甲基苯基丙氨酸-2-哌啶酸代替化合物IId，從而獲得相應的最終產品。
為了制備一類在通式中的R1是H以及R2是選自下列基團的化合物，則可以再次使用流程II，所說的基團包括氨基C2-5烷基、胍基C2-5烷基、脒基C2-5烷基、C1-烷氧基C2-5烷基、苯基、被取代的苯基(其中的取代基選自脒基、胍基、C1-4烷基氨基、鹵素原子、全氟C1-4烷基、C1-4烷基、C1-3烷氧基和硝基)、芐基、芳基取代的芐基(其中的取代基選自脒基、胍基、C1-4烷基氨基、鹵素原子、全氟C1-4烷基、C1-4烷基、C1-3烷氧基和硝基)、(吡啶-4-基)氨基C1-4烷基、(吡啶-3-基)氨基C1-4烷基、C1-5烷基氨基C2-5烷基和C1-5烷基。使用DiMaio等，醫(yī)藥化學雜志(Journal of Medicinal Chemistry)1992，35，3331的方法，可以制得已知的被保護氨基酸的Weinreb酰胺。這些化合物取代了流程II中的化合物IIe并按照與流程II中所示的相同反應條件進行處理。
為了制備一種E是下列基團的本發(fā)明的化合物，則可以再次使用流程II，所說基團包括噁唑-2-基；噻唑-2-基；噻唑-5-基；噻唑-4-基；1-烷基咪唑-2-基；2-吡啶基；3-吡啶基；4-吡啶基；苯并[b]苯硫-2-基；苯并噁唑-2-基；1-烷基苯并咪唑-1-基；苯并噻唑-2-基；1-烷基吲哚-2-基；4，5，6，7-四氫苯并噻唑-2-基；萘并[2，1-d]噻唑-2-基；萘并[1，2-d]噻唑-2-基；嘧啶-2-基；喹喔啉-2-基；苯并[b]呋喃-2-基；吡嗪-2-基、喹唑啉-2-基、異噻唑-5-基、異噻唑-3-基。當處于1位上的氮原子被一個對堿穩(wěn)定的保護基(例如TMS、Boc、Ts等)保護時，可用流程II來制備如下述限定的本發(fā)明的化合物，也就是其中的E為咪唑-2-基；吡唑-2-基；三唑-2-基；三唑-4-基；三唑-6-基；四唑-2-基；喹啉-2-基；吲哚-2-基；異喹啉-1-基；異喹啉-3-基；和嘌呤-8-基(以位置7代替1作為被保護的位置)。使用所列的任何已知鋰鹽化雜環(huán)化合物代替化合物IIf，可以獲得所需的化合物。
用于制備本發(fā)明化合物的另一種方法示于流程III。所示的例子制備這樣一種化合物，其中的A是一種多肽，其中的第一氨基酸是L-脯氨酸，而第二氨基酸是N-甲基-D-苯基丙氨酸，R1是氫，R2是(胍基C3烷基)，p是1，n是0，R3是H以及E是噻唑-2-基。
流程III
其中E是吡唑-3-基的本發(fā)明的化合物可以通過將重氮酮類1，3-偶極加成至炔類而制得(PadWa等，《1，3-偶極環(huán)加成化學》(1，3-Dipolar Cycloaddition Chemistry)，2卷，Wiley，紐約，1984)，該方法例示于流程IV中。重氮酮中間體IVa(US專利4,318,904)可以與炔IVb在回流的苯中反應而生產吡唑IVc，它可以按上述方法進一步加工成吡唑IVd。
流程IV
其中E是噻唑-2-基和噁唑-2-基的本發(fā)明的化合物也可以按流程V的方法制備。醇Va和Vb用Burgess試劑環(huán)化作用生成相應的噻唑啉和噁唑啉，接著用MnO2或NiO2將其氧化，從而最終生成化合物Vc和Vd(P.Wipf等，四面體通信(Tetrahedorn Letters)，1992，33，6267～6270)。同樣地，醛Ve可以在三乙胺的存在下與三苯膦/碘作用而轉變成化合物Vd(P.Wipf等，有機化學雜志(Journal ofOrganic Chemistry)，1993，58，3604～3603)。
流程V
雖然這些要求保護的化合物都可作為凝血酶和胰蛋白酶的抑制劑，但是通式I的優(yōu)選化合物包括
特別優(yōu)選的“A”有1-萘基磺?；?、2-萘基磺?；捅蝗〈妮粱酋；?其中的取代基選自C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基和C1-4烷氧基羰基)；一種L-氨基酸，例如甘氨酸或脯氨酸，其中的氨基末端是未取代的或者被下述基團之一進行單取代，即I-萘基磺?；?、2-萘基磺酰基和被取代的萘基磺?；?其中的取代基選自C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基和C1-4烷氧基羰基)、甲酰基和苯基羰基；或者一種含有2個氨基酸的多肽，其中的第一氨基酸是L-脯氨酸或L-2-哌啶酸，而第二氨基酸是D-苯基丙氨酸、D-環(huán)己基丙氨酸、D-二苯基丙氨酸或(2，3，4，5，6-五氟苯基)丙氨酸，其中所說第二氨基酸的氨基末端是未取代的或者被C1-5烷基全氟C1-4烷基或甲?；械囊粋€基團進行單取代。特別優(yōu)選的“R1”是氫和甲基。特別優(yōu)選的“R2”選自下列基團氨基C2-5烷基、胍基C2-5烷基、脒基C2-5烷基、C1-5烷基氨基C2-5烷基、C1-5二烷基氨基C2-5烷基、4-氨基環(huán)己基C0-2烷基、3-氨基環(huán)己基C0-2烷基和C1-5烷基。特別優(yōu)選的“E”是一類選自下列基團的雜環(huán)基，即
噻唑-2-基、噻唑-5-基、噻唑-4-基、噻唑啉-2-基、苯并噁唑-2-基、苯并咪唑-2-基、咪唑-2-基、4-氧代-2-喹喔啉-2-基、苯并噻唑-2-基、三唑-4-基、三唑-6-基、四唑-2-基、嘧啶-2-基、喹啉-2-基、吡唑-2-基、[4，5，6，7]-四氫苯并噻唑-2-基、萘并[2，1-d]噻唑-2-基、萘并[1，2-d]噻唑-2-基、喹唑啉-2-基、異噻唑-5-基、異噻唑-3-基、嘌呤-8-基和一種被取代的雜環(huán)基，其中的取代基選自C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基、C1-4烷氧基羰基和羥基。
本發(fā)明的化合物已被試驗過它們對凝血酶催化水解作用的抑制能力。已經進行過體外的酶分析和間接體內實驗。另外，已經在體外試驗過這些化合物對胰蛋白酶的抑制能力，這是它們的選擇性的一種指標。
已經用分光光度法測定過凝血酶催化的水解速率，測定時使用了市售的人類α-凝血酶(American Diagnostica)、一種在水性緩沖液(10mM Tris、10 mM Hepes、150 mM NaCl、0.1％PEG；pH7.4)中的顯色基質[SpectozymeTH(H-D-HHT-Ala-Arg-pNA·2AcOH)，American Diagnostica]和一種微量板讀數(shù)器(Molecular Devices)。在存在和不存在抑制劑的兩種情況下分別加入酶，在37℃30分鐘后，以405 nm波長測定(Softmax，Molecular Devices)吸光度的變化。在固定酶和顯色基質濃度以及變化抑制劑濃度(1nM凝血酶，50μMSpectozymeTH)的條件下測定了IC505。將米凱利斯-門頓動力學應用于初始反應斜率(slope)。在固定酶和抑制劑濃度以及變化顯色基質濃度(1nM凝血酶，5-100μM Spectozyme TH)的條件下測定了抑制常數(shù)(Ki)。將米凱利斯-門頓動力學利用K·Cat程序(BioMetallics Inc.)而用于初始反應斜率。
使用與測定凝血酶相同的方法測定了胰蛋白酶催化的水解速率。使用牛型1胰蛋白酶(Sigma)和SpectrozymeTRY(Cbo-Gly-D-Ala-Arg-pNA·AcOH，American Diagnosties)代替它們的凝血酶對應物，胰蛋白酶的濃度范圍是3.2U/ml，Spectrozyme的濃度范圍是0.1-0.3nM。
對于某些代表性化合物的IC50列于表A中。將某些代表性的KiS列于表中以代替所選化合物的IC50值。將N-Me PPACK醛和阿加曲班用作參考標準并將它們的數(shù)值列于下面。在該表中的化合物編號相當于下文所述實施例的編號。
進行一種間接體內實驗以測定通式I化合物起作用的持續(xù)時間。為了進行靜脈注射實驗，將一些雄性大鼠(Long Evans，350～500g)在麻醉狀態(tài)下(戊巴比妥，腹膜內，35mg/kg)用一根聚四氟乙烯插管通過股動脈插入體內。術后，將這些動物分別地關在一些標準籠中，喂以鼠飼料(Hanlan，#8604)并連續(xù)灌注生理鹽水以維持動脈的開放狀態(tài)(0.5ml/小時，動脈內)，并使用一種彈簧保護的旋轉鏈繩連接到輸液系統(tǒng)上。術后，允許動物恢復至少24小時。
在輸入抑制劑之前15分鐘從這些動物中抽取血樣(將0.25ml血液抽取入一個裝有0.025ml Sigma檸檬酸鈉的注射器中)。將被試化合物分散于水中，然后將其通過股靜脈向動物輸液(0.25ml)。該抑制劑的輸入濃度(mg/ml)相當于在輸液之后5分鐘時能對血漿樣品中的V0產生80％的抑制作用。在給藥后按規(guī)定的時間間隔(5、10、15、30、60和120分鐘)從動脈管抽取血液(血液∶檸檬酸鈉＝0.25/0.025ml)，然后將血液放入一個離心管中。在按10,000rpm的轉速將血液離心5分鐘之后獲得了血漿樣品。利用比色分析法測定該樣品的凝血酶抑制作用，測定方法如下所述。
利用一個微量板讀數(shù)器(Molecular Devices)，在37℃和使用一種水性緩沖液(10mM Tris，10mM Hepes，150mM NaCl，0.1％PEG；pH7.4)，在血漿存在的情況下測定了一種合成肽[50μMSpectozymeTH(H-D-HHT-Ala-Arg-pNA·2AcOH)，AmericanDiagnostica]在405nm波長處的吸光度增加的速率。先將緩沖液(按1∶1)加到血漿樣品中以進行稀釋，然后將其轉移到微量板上(再按1∶5和1∶50稀釋，以使分別獲得最終稀釋比例為1∶10和1∶100的稀釋血漿)，然后再加入酶(1nM人的α凝血酶)。收集在30分鐘期間內的數(shù)據(jù)，然后利用一種分析程序(Softmax，Molecular Devices)計算基質水解的初始速度[V0(mOD/分鐘)]。
使用公式t1/2＝1.6斜率，根據(jù)V0對時間的斜率算出血漿消失一半時所需的時間(t1/2)。這些數(shù)據(jù)列于表A中。
通過間接體內實驗測定生物利用率，該測定方法綜合考慮了靜脈注射和口服兩種給藥方式的水解速率。在該測定方法中將雄性大鼠按上述方法準備，也就是用一根聚四氟乙烯管插入它們的股動脈中。在輸入抑制劑之前15分鐘從這些動物體內抽取血液(將0.25ml血液抽取入一個裝有0.025ml Sigma檸檬酸鈉的注射器中)，以備分析用。將被試化合物分散于水中(最終濃度為0.3～3.0mg/ml)，然后經靜脈注射或經口向動物投藥(0.25ml)。在給藥后按規(guī)定的時間間隔(0.25、0.5、1.0、2.0和3.0小時)從動脈管抽取血液(血∶檸檬酸鈉，0.25/0.025ml)，然后按10,000rpm的轉速將該血液離心5分鐘，從而獲得血漿。利用比色分析法測定該樣品的凝血酶抑制作用，測定方法如下所述。
利用一個微量板讀數(shù)器(Molecular Devices)，在37℃和使用一種水性緩沖液(10mM Tris，10mM Hepes，150mM NaCl，0.1％PEG；pH7.4)，在血漿存在的情況下測定了一種合成肽[50μMSpectozymeTH(H-D-HHT-Ala-Arg-pNA·2AcOH)，AmericanDiagnostica]在405nm波長處的吸光度增加的速率。先將緩沖液(按1∶1)加到血漿樣品中以進行稀釋，然后將其轉移到微量板上(再按1∶5和1∶50稀釋，以使分別獲得最終稀釋比例為1∶10和1∶100的稀釋血漿)，然后再加入酶(1nM人的α凝血酶)。收集在30分鐘期間內的數(shù)據(jù)，然后利用一種分析程序(Softmax，Molecular Devices)計算基質水解的初始速度[V0(mOD/分鐘)]。
標準曲線的制備方法是將藥物或載體(100μl)加入全血(900μl)中，接著保溫(5分鐘)和離心，從而獲得血漿。通過將載體的V0與經藥物處理樣品的V0進行比較來計算凝血酶的抑制百分比。用統(tǒng)計標準程序(SAS)對幾次實驗獲得的數(shù)據(jù)進行歸一化，從而制成標準曲線。
通過把處理前的V0與處理后所獲樣品的V0進行比較來計算在被處理動物體內凝血酶抑制百分比。利用統(tǒng)計標準程序(SAS)將所獲抑制百分比應用于標準曲線(前面制成的)，然后用外推法求出血樣中的藥物量。
把靜脈注射和口服給藥兩種情況下外推獲得的在血樣中的藥物量對時間作圖，然后利用下列公式求得生物利用率，該公式為
％生物利用率＝(靜脈注射給藥劑量/口服給藥劑量)×(口服曲線下方面積/靜脈注射曲線下方面積)表ACpd# Thr IC50(μM) Trp IC50(μM) T1/2(分鐘) 生物利用率(％)1Ki＝0.00023Ki＝0.0031 19 1.22Ki＝0.0009 Ki＝0.01330.011 Ki＝0.022640.019 0.0061650.11 0.28 18642.0 6.34726 5083.51994.00.01210 40.15 7.7411 Ki＝0.42 Ki＝6.0112 0.003 0.0034313 0.0070 0.0022514 0.005 0.003015 0.0070 0.0030 1616 0.6830 0.238017 0.007 0.004818 0.21 0.1319 0.026 0.0051420 0.45 0.05821 0.024 0.051522 1.519 18.40423 0.928 0.23824 0.106 0.01425 0.003 0.0031426 Ki＝38 Ki＝18027 Ki＝1.2Ki＝1228 0.111 1.1991529 0.003 0.002 1430 0.029 0.002 631 50.0 0.080032 0.0020 0.0020 1933 0.0070 0.0020 1834 0.0380 0.0030 2635 0.2010 0.0020 1136 0.001 0.00137 0.0020 0.0010 4238 29.9 38.739 10010040 20.5 7.0141 0.002 0.00142 0.0040 0.002043 0.200 0.002044 50.0 4.3845 0.371 0.00946 0.015 0.00347 0.003 0.00448 1000.68449 12.9 6.8850 0.002 Ki＝0.002051 0.0170 0.0070 1752 0.012 0.005 853 45.5 7.4454 0.11 0.013 1555 0.83 0.008656 21.0 0.0279057 19.6 0.182N-Me PPACK Ki＝0.010 Ki＝0.0039阿加曲班Ki＝0.010 Ki＝2.9
如表A所示，通式I的化合物可以作為藥物組合物，按照類似于已知肝素類和香豆素類藥物的方法，用于治療那些患有血栓形成疾病的患者(人類和其他靈長目動物)。這些化合物可以通過任何非腸道途徑(靜脈注射、腹腔注射、皮下注射、皮膚敷貼)給藥，其中優(yōu)選的途徑是靜脈注射。抑制劑的注射劑量可在約0.1～300μg/kg/分鐘的范圍內，該抑制劑可以與給藥載體混合，持續(xù)數(shù)分鐘至數(shù)日的范圍。所選藥物也可以經口給藥，其劑量范圍是約1～100mg/kg。
該藥物組合物可以使用常規(guī)的藥物賦形劑和配合技術來制備?？诜膭┬涂梢允囚齽?、糖漿劑、膠囊劑、片劑等。其中常用的固體載體是一種惰性物質，例如乳糖、淀粉、葡萄糖、甲基纖維素、硬脂酸鎂、磷酸二鈣、甘露糖醇等；而常用的液體口服賦形劑包括乙醇、甘油、水等。所有賦形劑都可以根據(jù)需要，按照藥劑成型領域的技術人員所熟知的常規(guī)技術，與崩解劑、稀釋劑、粒化劑、潤滑劑、粘合劑等添加物混合。非腸道劑型可以用水或其他無菌載體制備。
通?？蓪⑼ㄊ絀的化合物分離出來或以它們的可藥用鹽的形式使用。這些鹽的例子包括氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、鹽酸鹽、高氯酸鹽、硫酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、蘋果酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、苯甲酸鹽、扁桃酸鹽、甲磺酸鹽、氫化乙磺酸鹽(hydroethanesulfonic)、苯磺酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸(pamoic)鹽、2-萘磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽、環(huán)己烷氨基磺酸鹽和葡糖二酸鹽等。
除了用于治療血栓形成疾病之外，通式I的化合物還可用于防止貯存血液樣品的凝結以及用作諸如移植片固定物和矯形裝置等醫(yī)療裝置的涂覆物。通常這些化合物可用于任何需要抑制凝結的環(huán)境中，其方法是使這些化合物與那些含有凝血酶的介質接觸。使用抗凝劑的老手會發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的凝血酶抑制劑的許多其他用途。這些用途都應被認為屬于本發(fā)明的范圍，因為本發(fā)明本來就考慮將通式I的化合物作為抗凝血酶劑使用。
本發(fā)明化合物還有一種用途是作為胰蛋白酶的抑制劑使用。胰蛋白酶抑制劑已經在臨床上用于治療胰臟疾病，例如胰腺炎。與現(xiàn)有胰臟疾病用藥劑卡莫司他甲磺酸鹽和萘莫司他(IC50分別為1×10-8和1.3×10-8)相比，本發(fā)明化合物的IC50值是較為有利的。通式I的化合物可按相同的方法作為這些疾病的治療藥劑使用。
為了解釋本發(fā)明，下面舉出了實施例。這些實施例不限定本發(fā)明。它們僅僅是建議了一種用于實施本發(fā)明的方法。本領域的普通技術人員還可找到一些對他們來說是顯而易見的用于實施本發(fā)明的其他方法。然而這些方法都應認為屬于本發(fā)明的范圍。
實施例1和2N-甲基-D-苯基丙氨酰基-N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[(苯并噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺化合物#1N-甲基-D-苯基丙氨?；?N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1R-[(苯并噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺化合物#2步驟a
1a將一種由N-CBZ-N-甲基-D-苯基丙氨?；?L-脯氨?；?NG-CBZ-L-精氨酸醛(9.92g，14.5mmol；US4,703,036)、CH2Cl2(48ml)、丙酮氰醇(4.0ml，43.4mmol)和三乙胺(1.2ml，8.7mmol)組成的混合物在室溫下和在氬氣氛中攪拌3小時。向其中加入另一份丙酮氰醇(1.3ml，14.2mmol)并再攪拌1小時。將該混合物在真空中濃縮，然后將其在水和乙酸乙酯二者之間分配。將所獲的有機層用水和鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)并在真空中濃縮。將殘留物用數(shù)份己烷研碎，然后將所獲固體沉淀物在真空中干燥，從而獲得固體狀氰醇中間體1a。
步驟b
在-50至-70℃的溫度和在氬氣氛中，用氣體HCl(51g)向氰醇1a(9.3g，13.1mmol)和MeOH(200ml)的溶液鼓泡1.5小時。將該反應混合物放入一臺處于0℃的冷凍箱中，監(jiān)控(TLC和NMR)3天，然后在氬氣氛中將其轉移入一個分液漏斗中。在0～6℃下將該反應混合物滴加入一份攪拌著的由水(700ml)、乙酸乙酯(250ml)和NaHCO3(159g，1.4mol)組成的混合液中。監(jiān)控猝滅溶液的pH值，不允許其pH值降低至6.8以下。加入另一份水和NaHCO3(由測定的pH值指示)直至反應混合物達到中性為止。將所獲混合物通過過濾劑過濾，留下濾液，用數(shù)份乙酸乙酯洗滌。將合并的有機層用鹽水洗滌，將其干燥(Na2SO4)，在真空中濃縮，獲得了固體狀的亞氨酸(imidate)的鹽酸鹽1b。
步驟c
在室溫下和在氬氣氛中將2-氨基苯硫酚(18.53，18.52mmol)加入一份亞氨酸鹽(imidate)1b(7.23g，9.26mmol)在無水乙醇(290ml)中的脫氣溶液中。將所獲混合物加熱回流4.75小時，冷卻至室溫，在室溫下將其暴露于含氧氣氛中18小時，然后在真空中濃縮。將殘留物用硅膠色譜純化，用CH2Cl2/甲醇(95∶5)洗脫，獲得白色泡沫狀的羥基苯并噻唑中間體1c。
步驟d
在室溫下和在氬氣氛中將Dess-Martin全碘代烷(periodinane)(1.59g，3.76mmol)加入化合物1c(3.08g，3.76mmol)在CH2Cl2(40ml)中的溶液中。將所獲混合物攪拌45分鐘并向其中加入另一份全碘代烷(periodinane)(1.2g，2.83mmol)，接著再攪拌15分鐘。通過加入8ml猝滅溶液(25g Na2S2O3在100ml的飽和NaHCO3水溶液中)以將過剩的全碘代烷(periodinane)消耗掉，然后用乙酸乙酯(300ml)稀釋，再在室溫下攪拌15分鐘。將所獲的水相層分離出來，用數(shù)份乙酸乙酯萃取，然后把合并的有機萃取相順次地用水和鹽水洗滌，然后將其干燥(Na2SO4)并在真空中濃縮，獲得了一種白色泡沫狀的酮1d。
步驟e
在無水條件和冷卻至-78℃的條件下將中間體酮1d(2.97g，3.63mmol)和茴香醚(10ml)裝入一個HF設備的聚四氟乙烯反應管中。將HF(15～20ml)蒸餾入該反應管中，在加料完畢后，讓混合物的溫度上升至0℃。將該混合物攪拌2小時，在真空中濃縮，然后用數(shù)份乙醚將其研碎，獲得一種黃色固體。將該固體用反相高壓液相色譜法(HPLC)純化，用水/乙腈/TFA(70∶30∶0.2)洗脫，獲得化合物1和2。將每種非對映體凍干，從而獲得所需的白色泡沫狀產品，其中化合物1占收集物料的91.5％。
化合物1(L-精氨酸非對映體)FAB-MS m/Z 550(MH+)；[α]D20＝-72.5°，(c1.00，MeOH)分析計算C28H35N7O3S·2.75TFA·0.5H2O計算值C，46.12；H，4.47；N，11.24；H2O，1.03實測值C，46.13；H，4.37；N，11.35；H2O，1.27化合物2(D-精氨酸非對映體)FAB-MS m/Z 550(MH+)；[α]D20＝-67.5°，(c0.67，MeOH)分析計算C28H35N7O3S·3TFA·2H2O計算值C，44.01；H，4.56；N，10.57；H2O，3.88實測值C，44.11；H，4.34；N，10.96；H2O，3.80實施例3步驟a
在氬氣氛和-20℃下將二環(huán)己基碳化二亞胺(18.24g，88.4mmol)在THF(35ml)中的溶液滴加到一份攪拌著的由3，3-二苯基丙酸(20.0g，88.4mmol)、2，4，5-三氯苯酚(17.45g，88.4mmol)和THF(50ml)組成的溶液中。將反應混合物在-20℃下攪拌2.5小時，將其置于冷凍箱中在0℃下保持16小時，通過過濾劑過濾。將母液在真空中濃縮，然后在乙醇中重結晶，獲得了固體狀的活性酯3a。
步驟b
在5℃和氬氣氛中將活性酯3a(15.0g，37.0mmol)加入到一份由L-脯氨酸(4.26g，37.0mmol)、三乙胺(5.15ml)和吡啶(45ml)組成的混合物中。讓反應混合物慢慢升溫至室溫，攪拌76小時，然后在真空中濃縮。向所獲殘留物中加入NaHCO3的水溶液(3.42g/130ml)和乙醚(100ml)，將所獲混合物在室溫下攪拌45分鐘。將有機層用水萃取數(shù)次。將合并的水層用2份乙醚萃取，用1N HCl酸化后再用數(shù)份乙酸乙酯萃取。將合并的乙酸乙酯萃取液用鹽水洗滌，然后將其干燥(MgSO4)并在真空中濃縮，獲得了固體狀的脯氨酸中間體3b。
步驟c
在-78℃和氬氣氛中將1.6M正丁基鋰/己烷(16ml，25.6mmol)加入到一份由苯并噻唑(3.7ml，33.9mmol)和無水THF(114m1)形成的溶液中。在-78℃下將反應混合物攪拌15分鐘，然后在保持溫度低于70℃的條件下通過一根插管向其中加入一種由N-α-Boc-NG-甲苯磺?；?L-精氨酸N，O-二甲酰胺(800mg，1.69mmol；DiMaio等，醫(yī)藥化學雜志(Journal of Medicinal Chemistry)，1992，35，3331)和THF(43ml)形成的溶液。將所獲混合物在-78℃下攪拌1.66小時，然后將其倒入飽和的NH4Cl水溶液(600m1)中，猛烈攪拌15分鐘，然后用幾份乙酸乙酯萃取。將合并的乙酸乙酯層順次地用水和鹽水洗滌，將其干燥(Na2SO4)并在真空中濃縮。將殘留物用硅膠柱色譜純化，用乙酸乙酯/己烷(5∶2)洗脫，獲得了油狀的苯并噻唑衍生物3c。
步驟d
在-20℃和氬氣氛中將硼氫化鈉(63.8mg，1.69mmol)滴加入一份苯并噻唑2c(307mg，0.563mmol)在MeOH(10ml)的溶液中。將該混合物在約-20℃下攪拌40分鐘并慢慢地加入丙酮(2ml)。讓混合物在1.25小時內慢慢升溫至室溫，在真空中濃縮，然后將其在乙酸乙酯和水之間分配。將水層用數(shù)份乙酸乙酯萃取。將合并的乙酸乙酯層用鹽水洗滌，將其干燥(Na2SO4)，然后在真空中濃縮，獲得了一種淡黃色泡沫狀的醇3d。
步驟e
在室溫和氬氣氛中將醇3d(0.27g，0.49mmol)在10ml TFA
在室溫和氬氣氛中將醇3d(0.27g，0.49mmol)在10ml TFA/CH2Cl2(1∶4)中的溶液攪拌1.5小時。將所獲的混合物在真空中濃縮，獲得油狀的TFA鹽3e。
步驟f
將一種由胺3e的TFA鹽(0.49mmol)、三乙胺(0.25m1)、中間體3b(158mg，0.49mmol)、羥基苯并三唑水合物(111mg，0.54mmol)在乙腈(10ml)中形成的溶液用DCC(73mg，0.54mmol)處理，同時在室溫和氬氣氛中攪拌20小時。將所獲混合物過濾，將固體用數(shù)份乙腈洗滌。將濾液和洗滌液合并，在真空中濃縮，然后將其在乙酸乙酯和水之間分配。將有機層順次地用1N HCl、水、飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌；將其干燥(Na2SO4)和在真空中濃縮。將殘留物用一種硅膠薄層制備色譜(TLC)純化，用CHCl3/MeOH洗脫，獲得苯并噻唑3f，這是一種發(fā)粘的固體。
步驟g
在室溫和氮氣氛中將化合物3f(7.2mg，0.0096mmol)、CH2Cl2(1ml)和Dess-Martin全碘代烷(periodinane)(8.1mg，0.019mmol)混合物攪拌1小時，用4ml猝滅溶液(25g Na2S2O3在100ml飽和NaHCO3水溶液中)處理，然后用水和CH2Cl2稀釋。將所獲的有機層用水洗滌，將其干燥(Na2SO4)，在真空中濃縮，獲得了泡沫狀的酮3g。
步驟h
化合物3將茴香醚(1ml)和酮3g(137mg，0.17mmol)的混合物裝入一個附設在HF設備上的聚四氟乙烯反應管中并將其冷卻至-78℃。將HF(5ml)蒸餾入反應管中，然后在0℃將所獲混合物攪拌3小時。在真空中除去HF，然后用3份乙醚將混合物研碎。將所獲沉淀過濾，用空氣干燥，將其溶解于乙腈/水(1∶1)中并用反相HPLC純化，用CH3CN+2％TFA/H2O+0.016％TFA作為洗脫液。將所需的級分在真空中濃縮，然后將其凍干，獲得了化合物2，這是一種D與L精氨酸非對映體1∶3的混合物；IR(KBr，cm-1)1674，1450，1204，1135；[α]D19＝-74.0(c0.60，MeOH)；mp＝106～120℃。分析計算C33H36N6O3S·1.75TFA·0.33H2O計算值C，52.96；H，5.02；N，10.15；H2O＝3.81實測值C，53.27；H，5.13；N，10.34；H2O＝3.86
實施例4步驟a
在0℃和氬氣氛中將1，1′-羰基二咪唑(0.65g，4.05mmol)加入N-α-Boc-NGNG′-二-CBZ-L-精氨酸(92.0g，3.69mmol)和THF的混合物中，然后將所獲混合物在0℃下攪拌1小時。將該混合物冷卻至-48℃，然后向其中加入1M DIBAL/己烷的溶液(10.3ml，10.3mmol)，其加入速度以能夠使反應溫度保持在-48℃至-42℃之間為準。將所獲混合物在-48℃下再攪拌15分鐘，然后在-40℃至-28℃之間的溫度加入KHSO4的水溶液(1.4g/5.0ml)。讓該混合物慢慢升溫至室溫，加入CH2Cl2，將產生的固體濾出并用另一份CH2Cl2洗滌。將收集的濾液用水洗滌，將其干燥(MgSO4)并在真空中濃縮。將殘留物在異丙醇(i-PrOH)和己烷中結晶純化，獲得了醛4a的固體。
步驟b
在室溫和氬氣氛中將醛4a(0.765g，1.36mmol)、CH2Cl2(5ml)和2-(三甲基甲硅烷基)噻唑(1.07g，6.8mmol)的混合物攪拌16小時。將反應混合物在真空中濃縮，獲得了油狀的化合物4b。
步驟c
在室溫和氬氣氛中將三氟乙酸(6ml)慢慢地加入到攪拌著的噻唑(1.36mmol)和CH2Cl2(30ml)的混合物中。將反應混合物攪拌6小時，然后在真空中濃縮。將殘留物用硅膠快速色譜法純化，用CH2Cl2/MeOH/NH4OH(95∶4.5∶0.5)作為洗脫液，獲得一種單獨的非對映體。將分離出的產品溶解于CH2Cl2中，將其干燥(K2CO3)，過濾并在真空中濃縮，獲得一種透明油狀的醇4c。
步驟d
在室溫下將DCC(0.079g，0.38mmol)加入到一種由醇4c(0.18g，0.35mmol)、(CBZ)-N-甲基-D-苯基丙氨?；?L-脯氨酸(0.14g，0.35mmol；US4,703,036)、羥基苯并三唑水合物(0.053g，0.38mmol)和CH3CN(4.5ml)組成的混合物中。將該反應混合物攪拌3.5小時，將所獲固體沉淀用數(shù)份CH3CN洗滌。將合并的濾液在真空中濃縮，然后將其在乙酸乙酯和水之間分配。將有機層順次地用水和鹽水洗滌，將其干燥(MgSO4)，然后在真空中濃縮。將殘留物用色譜法(硅膠，CH2Cl2/MeOH(95/5))純化，獲得白色泡沫狀的醇4d。
步驟e
在室溫下將一種醇4d(0.14g，0.15mmol)和CH2Cl2(3ml)的溶液一次性地加入到Dess-Martin全碘代烷(periodinane)(76mg，0.179mmol)和CH2Cl2(4ml)的混合物中。將反應混合物攪拌35分鐘，然后再加幾毫克的Dess-Martin全碘代烷(periodinane)。將所獲混合物再攪拌10分鐘，然后加入10ml猝滅溶液(25g Na2S2O3在100ml飽和NaHCO3水溶液中)并再攪拌10分鐘。將所獲混合物在乙酸乙酯和水之間分配，再攪拌5分鐘。將有機層用數(shù)份水和鹽水洗滌，將其干燥(MgSO4)，然后在真空中濃縮，獲得一種無色玻璃狀的酮4e。
步驟f
化合物4(RWJ50026)在無水條件下將酮4e(0.13g，0.144mmol)和茴香醚(1ml)加入一個HF設備的聚四氟乙烯反應管中，并將其冷卻至-78℃。將HF(5～10ml)直接蒸餾入該燒瓶中，讓該混合物的溫度上升至0℃并將此混合物攪拌1.5小時。在真空中除去HF，然后將殘留物用數(shù)份乙醚研碎，獲得一種固體產品，將此固體用反相HPLC純化，用水/乙腈/TFA(50∶50∶0.2)洗脫，然后在真空中濃縮。將殘留物溶于水中并用新漂洗過的AmberlitIRA-400(OH-)離子交換樹脂和0.1MTFA水溶液將其pH值調節(jié)至6.48。用過濾法分離固體沉淀并將濾液凍干，獲得了白色固體狀的化合物4。分析計算C24H33N7O3·2C2HF3O4·0.2H2O計算值C，44.88；H，5.03；N，13.08；H2O，2.88實測值C，44.49；H，4.93；N，12.98；H2O，2.64實施例5步驟a
在0～10℃的溫度下將1，1′-羰基二咪唑(9.89g，0.053mmol)一次性地加入一份攪拌著的由N-α-CBZ-NG-甲苯磺?；?L-精氨酸(25.2g，mmol)和THF(160ml)形成的溶液中。1小時后，將反應混合物冷卻至-42℃并在30分鐘內加入1M DIBAL/己烷(130ml，130mmol)。將所獲混合物在-42℃下再攪拌30分鐘。通過慢慢地加入1.2M HCl(365ml)使反應猝滅，然后使反應溫度升至室溫。將該混合物用0.6M HCl(360ml)和CHCl3(400ml)處理并在室溫下攪拌2.5小時。將水相用數(shù)份CHCl3洗滌，然后將合并的有機萃取液接連地用數(shù)份水洗滌，將其干燥(Na2SO4)，然后在真空中濃縮，獲得固體狀的醛5a；FAB-MS m/z 447(MH)+
步驟b
在攪拌下將KCN(6.0g，92mmol)加入一份攪拌的由醛4a(22.0g，49mmol)在MeOH(60ml)中的溶液、H2O(60ml)和乙酸乙酯(110ml)組成的混合物中并在22℃下攪拌16小時。將所獲的水層用數(shù)份乙酸乙酯萃取，然后將合并的有機萃取液用水洗滌，將其干燥(Na2SO4)，在真空中濃縮，獲得了泡沫狀的腈5b；FAB-MS m/z474(MH)+步驟c
在-78℃用無水HCl(氣)向腈5b(8.0g，16.9mmol)和無水MeOH(162ml)的混合液中鼓泡，鼓泡速度以溫度不超過-40℃為準。在加入反應物之后，將反應物在0℃下攪拌30分鐘。在猛烈攪拌下將反應混合物加入飽和的NaHCO3水溶液中，同時將pH值維持在6以上。在中和之后，用冰醋酸將pH值調節(jié)至4.0，然后向其中加入乙酸乙酯(350ml)。將混合物攪拌4小時，分相，將水相用乙酸乙酯萃取3次。將合并的乙酸乙酯萃取相用水、飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，將其干燥(Na2SO4)并在真空中濃縮，獲得一種白色固體狀的亞氨酸酯(imidate)5c；FAB-MS m/z 507(MH)+
步驟d
將亞氨酸酯5c(1.00g，1.84mmol)、2-氨基苯酚(0.22g，2.03mmol)和無水乙醇(40ml)在N2氣氛中加熱回流24小時，然后在真空中濃縮。將所獲殘留物用硅膠色譜法純化，用CH2Cl2/MeOH(955)洗脫，獲得一種白色泡沫狀的苯并噁唑5d；mp.81～91℃；[α]D25-2.9(c，0.68，CHCl3)。分析計算C28H31N5O6S·0.6H2O計算值C，58.34；H，5.14；N，12.15；H2O，1.87實測值C，58.32；H，5.14；N，11.97；H2O，1.67步驟e
將一種由化合物5d(0.87g，1.53mmol)，20％Pd(OH)4/C(0.21g)和無水乙醇(19ml)組成的混合物裝入一個常壓氫化器中，在氫氣氛中攪拌16小時。將所獲混合物通過過濾劑過濾并在真空中濃縮，獲得一種黃色泡沫狀的游離胺5e。
步驟f
在N2氣氛中將DCC(0.25g，1.1mmol)和CH3CN(1ml)的混合液滴加到由1-羥基苯并三唑水合物(0.16g，1.2mmol)、胺5e(0.47g，1.1mmol)、CBZ N-甲基-苯基丙氨?；?脯氨酸(0.44g，1.1mmol)和CH3CH(15ml)組成的溶液中。將反應混合物攪拌3.5小時，過濾，然后將所獲濾餅用數(shù)份CH3CN洗滌。將合并的濾液在真空中濃縮，將殘留物溶解于乙酸乙酯中，順次地用水和鹽水洗滌，將其干燥(MgSO4)并真空中濃縮。將殘留物用硅膠柱色譜法純化，用CH2Cl2/MeOH(93∶7)洗脫，獲得一種黃色玻璃狀的偶合醇5f。
步驟g
在室溫和在氬氣氛中將一種醇5f(0.45g，0.56mmol)和無水CH2Cl2(5ml)的溶液加入一種攪拌著的由Dess-Martin全碘代烷(periodinane)(300mg，0.73mmol)和無水CH2Cl2(20ml)組成的混合物中。將反應混合物再攪拌30分鐘，加入另一份Dess-Martin全碘代烷(periodinane)(50mg，0.12mmol)，接著在室溫下再攪拌10分鐘。在攪拌下向反應混合物中加入30ml猝滅溶液(25gNa2S2O3在100ml飽和NaHCO3水溶液中)并接著加入另一份乙酸乙酯。將所獲有機層順次地用飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，將其干燥(MgSO4)，在真空中濃縮，獲得一種泡沫狀的酮5g；FAB-MS m/z882(MH)+。
步驟h
化合物5在無水條件下將酮5g(0.45g，0.54mmol)和茴香醚(約2.0ml)裝入一個HF設備的聚四氟乙烯反應管中，并將其冷卻至-78℃。將HF(0.5～1.0ml)直接蒸餾入該燒瓶中，讓該混合物的溫度上升至0℃，然后將此混合物在0℃下攪拌4小時。在真空中除去HF，將殘留物用數(shù)份乙醚研碎，獲得一種黃色固體，將其用反相HPLC純化，用水/乙腈/TFA(70∶30∶0.2)洗脫。把含有所需產物的級分在真空中濃縮并將其凍干，獲得一種粉末狀的化合物5；mp.81～91℃；[α]D25-63.3(c，0.58，MeOH)；FAB-MS m/z 534(MH)+。分析計算C28H35N7O4·4·(C2HF3O2)·2.5H2O計算值C，41.97；H，4.25；N，9.52；H2O，3.93實測值C，42.26；H，4.42；N，9.87；H2O，4.27
實施例6步驟a
在0℃和氬氣氛中將1，1-羰基二咪唑(1.8g，11.0mmol)加入一種由N-α-Fmoc-NG-甲苯磺酰基-L-精氨酸(6.0g，10.0mmol)在無水THF(30ml)中形成的溶液中，在0℃下攪拌1.5小時。將反應混合物冷卻至-48℃，在20分鐘內向其中滴加1M DIBAL(28ml，28mmol)。將所獲混合物再攪拌1.5小時，然后在攪拌下加入1.2N HCl(67ml)。讓混合物升溫至室溫并將其在0.6N HCl(65ml)和氯仿之間進行分配。將所獲水相層用數(shù)份氯仿洗滌。將合并的有機萃取相順次地用水和鹽水洗滌，將其干燥(Na2SO4)并在真空中濃縮，獲得了醛6a，這是一種白色的片狀固體。
步驟b
將KCN(1.44g，22mmol)和H2O(125ml)形成的溶液加入一種醛6a(5.9g，11.0mmol)在乙酸乙酯(250ml)中形成的溶液中，將所獲混合物在室溫和氬氣氛中攪拌40小時。分離出有機相，將水相層用3份乙酸乙酯洗滌。將合并的乙酸乙酯萃取相用鹽水洗滌，將其干燥(Na2SO4)，在真空中濃縮并在氬氣氛下貯存于冷凍箱中。將殘留物在乙酸乙酯(100ml)和飽和NaHCO3水溶液(200ml)之間分配并通過加入固體NaHCO3將pH值維持在7.0。用過濾法除去固體NaHCO3，將所獲的水相層用數(shù)份乙酸乙酯洗滌。將合并的有機相用鹽水洗滌2次，將其干燥(MgSO4)，在真空中濃縮，獲得一種白色固體狀的氰醇6b；FAB-MS m/z 562(MH)+。
在-40℃以下溫度的氬氣氛中將HCl(21g)向一種由腈6b(3.0g，5.34mmol)和甲醇(53ml)組成的溶液鼓泡20分鐘。在氮氣氛中將反應容器關閉，將其放入冷凍箱中在-15℃下保持46小時，然后將其在室溫下的真空中濃縮。將殘留物在飽和NaHCO3水溶液(250ml)和乙酸乙酯之間分配。將有機層用2份鹽水洗滌，將其干燥(MgSO4)，在真空中濃縮，獲得固體狀的亞氨酸酯6c。
步驟d
將半胱氨酸乙酯鹽酸化物(1.97g，10.6mmol)加入一份由亞氨酸酯6c(3.30g，5.3mmol)和CH2Cl2(100ml)組成的溶液中，將所獲混合物在氬氣氛中和室溫下攪拌3小時。用過濾法除去固體沉淀，將濾液在真空中濃縮。將殘留物用HPLC純化，用CH2Cl2/甲醇(97∶3)作為洗脫液，獲得一種固體狀的噻唑啉衍生物6dFAB-MSm/z 694(MH)+。
步驟e
在-5℃和攪拌下將二乙胺(2.5ml，24.2mmol)滴加入一份由衍生物6d(2.20g，3.17mmol)在無水乙腈(50ml)形成的溶液中，讓反應物在18小時內升溫至室溫。將殘留物在真空中濃縮，將其溶解于無水CH2Cl2中，再次將其在真空中濃縮。將殘留物用數(shù)份己烷研碎并在真空中濃縮，獲得一種油狀的胺6e；FAB-MS m/z 472(MH)+。
步驟f
在-5℃的氬氣氛下向胺6e(2.21g，3.1mmol)和CH2Cl2的溶液中加入丹酰氯(890mg，3.3mmol)。在加料完畢后，將反應混合物在室溫下攪拌1小時。將所獲混合物在真空中濃縮，然后將其在CHCl3與飽和NaHCO3水溶液之間分配。將有機層用鹽水洗滌，將其干燥(K2CO3)并在真空中濃縮。將殘留物用硅膠色譜法純化，用CH2Cl2/MeOH(97∶3)洗脫，獲得了被保護的胺6f；FAB-MS m/z705(MH)+。
步驟g
向胺6f(0.70g，1.49mmol)和CH2Cl2(25ml)形成的溶液中加入活性MnO2(0.75g)并將所獲混合物在室溫下攪拌過夜。加入另一份MnO2(0.75g)并將此混合物在室溫下攪拌4小時。然后再加入一份MnO2(0.75g)并將所獲混合物在室溫下攪拌16小時。將反應混合物一次性地通過過濾劑并接著通過一個尼龍66過濾器(0.45μm)過濾，用CHCl3/MeOH洗滌濾餅。將合并的濾液干燥(Na2SO4)并在真空中濃縮。將殘留物用硅膠HPLC純化，用CHCl3/MeOH(97∶3)作為洗脫液，獲得固體狀的噻唑6a；FAB-MS m/z 701(MH)+。
步驟h
化合物6在無水條件下將噻唑6g(141mg，0.20mmol)和茴香醚的溶液加入一個HF設備的反應器中并將其冷卻至-78℃。將無水HF(4.5-6.0ml)蒸餾入反應器中，讓反應混合物升溫至5℃并在5℃下攪拌3.5小時。在真空中除去HF，將所獲殘留物用數(shù)份乙醚研碎，獲得一種固體。將該固體用反相色譜法純化，用H2O/CH3CN/TFA(30∶20∶0.2)洗脫，獲得一種油狀物。將該油狀物溶解在蒸餾水中并通過加入AmbeliteIRA 400(OH-)樹脂將溶液中和至pH6.20。將該溶液過濾并凍干，獲得固體狀化合物6；mp 90～98℃；FAB-MS m/z 547(MH)+。
實施例7步驟a
在室溫和氬氣氛下向2-(三甲基硅烷基)噻唑(2.03g，11.0mmol)中加入(±)-N-叔丁氧基羰基-2-哌啶甲醛[2.13g，10.0mmol；Hassner等，《有機化學雜志)》(Journal of Organic Chemitry)1991，56，2775]。將反應混合攪拌6小時，然后用無水THF(100ml)和5ml的1.0M四丁基氟化銨/THF稀釋，再攪拌40分鐘然后在真空中濃縮。將殘留物溶解于乙酸乙酯中并用飽和NaHCO3水溶液洗滌，將其干燥(Na2SO4)并在真空中濃縮，獲得一種固體狀的噻唑7a；FAB-MS m/z 299(MH)+。
步驟b
在氬氣氛中和室溫下將噻唑7a(3.22g，9.0mmol)、CH2Cl2(100ml)和TFA(20ml)形成的溶液攪拌3小時并在真空中濃縮。將殘留物在CHCl3(100ml)和50％NaOH水溶液(20ml)之間分配，并在氬氣中和室溫下攪拌。然后加入另一份CHCl3(100ml)并再次攪拌混合物。除去有機層并將所獲的水層用數(shù)份CHCl3洗滌。將合并的有機洗滌液干燥(K2CO3)并在真空中濃縮。將殘留物用硅膠色譜純化，用EtOAc/MeOH/NH4OH(97∶3∶1)洗脫，獲得作為單一非對映體的哌啶衍生物7b。
步驟c
在-20℃下將N-甲基嗎啉(0.48g，4.68mmol)加入一種由N-α-Boc-NG-硝基-L-精氨酸·2/3 Et2O·1/4 EtOAc和無水THF(20ml)組成的混合物中。在-15至-20℃下向該混合物中滴加氯甲酸異丁酯，將所獲混合物攪拌35分鐘。在氬氣氛中和-20℃下加入哌啶衍生物7b(0.85g，4.2mmol)和無水THF(30ml)的混合液。將此混合物在-15℃下攪拌45分鐘，讓其在3小時內升溫至室溫并將其置于冷凍箱中在0℃下存放16小時。將反應混合物過濾并將濾液在真空中濃縮。將殘留物溶解于CHCl3中，將有機層順次地用飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，將其干燥(Na2SO4)并在真空中濃縮，獲得固體狀的精氨酸衍生物7c；FAB-MS m/z 500(MH)+。
步驟d
在氬氣氛中和室溫下將6N HCl/EtOH(40ml)加入由精氨酸衍生物7c(1.75g，3.5mmol)和無水THF形成的溶液中。將反應混合物攪拌1小時，再加入一份6N HCl/EtOH(10ml)并再攪拌(2小時)。再加入一份6N HCl/EtOH(10ml)并再攪拌1小時。將反應混合物在真空中濃縮并將其用THF研碎，獲得一種固體。將一份這種固體(1.26g，2.30mmol)與無水THF(45ml)和三乙胺(0.75ml)一起攪拌。加入丹酰氯(0.63g，2.33mmol)并將該反應混合物在室溫下攪拌3小時。再加入另一份三乙胺(0.25g)和丹酰氯(0.20g)并在室溫下再攪拌1小時。將反應混合物過濾，在真空中濃縮，然后用數(shù)份乙醚將其研碎，獲得一種固體。將該固體用硅膠柱色譜純化，用EtOAc/MeOH/NH4OH(96∶3∶1)洗脫，獲得固體狀的化合物7d；FAB-MS m/z 633(MH)+。
步驟e
在室溫和氬氣氛中將Dess-Martin全碘代烷(periodinane)加入一份攪拌著的由衍生物7d(0.19g，0.30mmol)和CH2Cl2(10ml)形成的溶液中。將反應混合物攪拌1.5小時，然后用30ml猝滅溶液(25g Na2S2O3在100ml飽和NaHCO3水溶液中)處理。將所獲的有機層用鹽水洗滌，將其干燥(Na2SO4)并在真空中濃縮。將殘留物裝入HF設備內裝有茴香醚的反應器中，然后將其冷卻至-78℃。將HF蒸餾入反應器中，讓反應器溫度升至5℃并在此溫度下維持40分鐘。將混合物在真空中濃縮并用乙醚將其研碎，獲得一種粘性的固體。將該固體用反相HPLC純化，用H2O/CH3CN/TFA(60∶40∶0.2)洗脫，獲得一種作為非對映體混合物的化合物7；mp 85～100℃；[α]D25+60.4(c 0.95，CH3OH)；FAB-MS m/z 586(MH)+。分析計算C27H35N7O4S2·C2HF3O2·0.2H2O計算值C，44.44；H，4.53；N，11.52；H2O，1.05實測值C，44.36；H，4.44；N，11.54；H2O，0.92實施例8步驟a
在室溫和氬氣氛中將甲基(三苯基正膦基二烯(phosphoranylidiene))乙酸酯(4.89g，114.6mmol)分批地加入由(±)-N-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-甲醛(3.12g，14.6mmol)和無水THF(30ml)形成的溶液中。將反應混合物在室溫下攪拌16小時，然后在真空中濃縮。將殘留物用乙醚(25ml)處理，然后過濾除去產生的沉淀。將濾液在真空中濃縮，將殘留物用硅膠色譜純化，使用己烷/乙醚(4∶1)作為洗脫液，獲得一種油狀的酯衍生物8a。
步驟b
將氯化鋰(1.04g，24.5mmol)加入酯8a(2.20g，8.2mmol)和無水THF(24ml)的混合液中。向該混合物中加入硼氫化鈉(0.93g，24.5mmol)，接著加入無水乙醇(29ml)，將所獲混合物在室溫下攪拌48小時。將混合物冷卻至0℃，然后加入10％的檸檬酸水溶液以將pH值調節(jié)至4。將所獲混合物在真空中濃縮，再將其溶解于H2O(40ml)中并用10％的檸檬酸水溶液將其pH值調節(jié)至4。將水層用數(shù)份CH2Cl2萃取，將合并的有機萃取相用鹽水洗滌，將其干燥(Na2SO4)，然后在真空中濃縮，獲得一種油狀的醇衍生物8bGC/MS(El)m/z 227(M)+。
步驟c
在室溫下將醇8b(2.06g，8.2mmol)和CH2Cl2(20ml)的溶液在2分鐘內加入一種氯鉻酸吡啶鎓鹽(2.64g，12.3mmol)和CH2Cl2的混合物中。將混合物攪拌30分鐘，加入乙醚(200ml)并將產生的固體沉淀過濾除去。將固體物用數(shù)份乙醚/CH2Cl2(2∶1)洗滌，將濾液和有機洗滌液合并并通過硅膠過濾。將有機溶液干燥(Na2SO4)并在真空中濃縮，獲得一種油狀的醛衍生物8c。
步驟d
在氬氣氛中和室溫下將2-三甲基甲硅烷基噻唑(1.63g，8.8mmo1)加入醛8c(1.93g，8.0mmol)中。將所獲反應混合物攪拌3.25小時，用無水THF和1.0M四丁基氟化銨/THF(4.0ml)稀釋，攪拌30分鐘，然后在真空中濃縮。將殘留物溶解于乙酸乙酯中，用飽和NaHCO3水溶液洗滌，將其干燥(Na2SO4)并在真空中濃縮，獲得一種油狀的噻唑衍生物8d。
步驟e
在室溫和氬氣氛下將三氟乙酸(16ml)加入噻唑衍生物8d(2.48g，7.6mmol)和CH2Cl2(50ml)的溶液中。將反應混合物攪拌2小時，在真空中濃縮然后溶解于CHCl3(60ml)中。將該溶液用50％的NaOH水溶液(20ml)堿化，將水層用數(shù)份CHCl3/2-丙醇(20∶1)洗滌。將合并的有機萃取液干燥(K2CO3)并在真空中濃縮，獲得一種油狀物。將該油狀物用硅膠色譜法純化，用乙酸乙酯/MeOH/NH4OH(97∶3∶1至90∶7∶3)洗脫，獲得脫保護的噻唑8e；FAB-MSm/z 227(MH)+。
步驟f
在-20℃和氬氣氛下將氯甲酸異丁酯(0.39g，2.87mmol)滴加入一份由N-α-Boc-NG-硝基-L-精氨酸·2/3 Et2O·1/4EtOAc(1.12g，2.87mmol)、N-甲基嗎啉(0.32g，3.20mmol)和無水THF(20ml)形成的溶液中。在-5℃至-10℃下將反應混合物攪拌30分鐘然后將其冷卻至-20℃。在2～3分鐘內滴加入一種由噻唑衍生物8e(0.65g，2.87mmol)和THF(20ml)形成的溶液，將所獲混合物在-15℃至-10℃攪拌45分鐘，然后在室溫下攪拌16小時。按上述方法制備另一份N-α-Boc-NG-硝基-L-精氨酸·2/3 Et2O·1/4 EtOAc(0.56g，1.44mmol)、N-甲基嗎啉(0.16g，1.6mmol)和氯甲酸異丁酯(0.195g，1.44mmol)并在-15℃至-10℃攪拌1小時，然后將其加入最初的反應混合物中。將所獲混合物在-15至-10℃攪拌1小時，然后在室溫下攪拌16小時。將反應混合物過濾，在真空中濃縮并溶解于CHCl3中。將有機溶液順次地用飽和的NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，將其干燥(Na2SO4)并在真空中濃縮。將殘留物用HPLC純化，用乙酸乙酯/MeOH/NH4OH(30∶3∶1)洗脫，獲得固體狀的精氨酸衍生物8f。
步驟g
在室溫和氬氣氛下將6N HCl的乙醇溶液(20ml)慢慢地加入攪拌著的精氨酸衍生物8f(0.87g，1.65mmol)和無水THF(15ml)的溶液中。將反應混合物攪拌45分鐘，在真空中濃縮然后將其溶解于THF(20ml)中。加入三乙胺(0.75g，7.4mmol)，接著加入丹酰氯(0.46g，1.70mmol)，然后將所獲混合物在室溫和氬氣氛下攪拌18小時。加入另一份三乙胺(0.50g，4.9mmol)，接著再加入丹酰氯(0.23g，8.5mmol)，將所獲混合物攪拌24小時。將該混合物過濾，將濾液在真空中濃縮，用數(shù)份乙醚將其研碎，獲得固體狀的丹酰衍生物8g，該產品不經進一步純化即直接使用；FAB-MS m/z661(MH)+。
步驟h
在5℃和氬氣氛下將Dess-Martin全碘代烷(periodinane)(0.72g，1.70mmol)分批地加入攪拌著的由丹酰衍生物8f(1.20g，1.36mmol)和無水CH2Cl2(40ml)形成的混合物中。讓反應混合物升溫至室溫，攪拌1.5小時，用100ml猝滅溶液(25g Na2S2O3在100ml飽和NaHCO3水溶液中)處理，然后用CHCl3(50ml)萃取，將所獲水層用數(shù)份CHCl3洗滌。將合并的有機萃取相用鹽水洗滌，將其干燥(Na2SO4)并在真空中濃縮。將殘留物用(硅膠)色譜純化，用乙酸乙酯/MeOH/NH4OH(95∶5∶1)洗脫。將所需級分在真空中濃縮，將其溶解于CH2Cl2中，將其干燥(Na2SO4)并在真空中濃縮，獲得一種固體狀的酮衍生物8h；FAB-MS m/z 882(MH)+。
步驟i
化合物8將酮衍生物8h(160mg，0.2mmol)裝入一個HF設備的反應器中，向其中加入無水茴香醚(2ml)，將該混合物冷卻至-78℃。將HF(5ml)蒸餾入反應器中，使反應混合物升溫至0℃。1小時之后，在真空中除去HF，向殘留物中加入乙醚(25ml)，將所獲混合物貯存于冷凍箱中，在0℃和氬氣氛中保持16小時。除去乙醚，然后將固體殘留物用數(shù)份乙醚研碎，將其分離并在真空中干燥。將殘留物用柱色譜(反相)純化，用CH3CN/H2O/TFA(93∶7∶0.2)洗脫，獲得一種以1∶1非對映體混合物形式存在的化合物8；mp 65～70℃；[α]D25+35.6(c 0.52，MeOH)；FAB-MS m/z 614(MH)+。分析計算C29H39N7O4S2·3.5C2HF3O2·0.5H2O計算值C，42.71；H，4.29；N，9.59；H2O，0.88實測值C，42.76；H，4.44；N，9.67；H2O，0.81實施例9步驟a
在室溫下向攪拌著的甘氨酸(1.5g，20mmol)和1N NaOH(40ml)的溶液中加入2-萘磺酰氯(4.52g，20mmol)和乙醚(50ml)的溶液。將該混合物攪拌6小時，分離出乙醚層并將水層用數(shù)份乙醚洗滌。將水層用1N HCl將pH值調節(jié)至1，用H2O(50ml)稀釋。將生成的固體沉淀物過濾分離并在真空中干燥，獲得固體狀的酸9a。
步驟b
在氬氣氛下將DCC(0.55g，2.67mmol)和CH3CN(10ml)的溶液滴加入一份由1-羥基苯并三唑水合物(0.49g，3.64mmol)、胺6e的D-精氨酸差向異構體(1.43g，2.43mmol)、酸9a(0.64g，2.43mmol)和CH3CN(20ml)形成的溶液中。將該混合物在室溫下攪拌2小時，過濾，然后在真空中濃縮。將殘留物溶解于水中，順次地用飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，將其干燥(Na2SO4)并在真空中濃縮。將殘留物用色譜法純化，用乙酸乙酯/MeOH/NH4OH(95∶5∶1)作為洗脫劑。將所需的級分合并，干燥(Na2SO4)并在真空中濃縮，獲得一種作為非對映體混合物的偶合中間體9b；FAB-MSm/z 719(MH)+。
步驟c
在室溫和攪拌下將活性MnO2(0.90g，10.4mmol)加入中間體9b(0.85g，1.18mmol)和CH2Cl2(35ml)的溶液中。將反應混合物在室溫下攪拌48小時，將其通過尼龍66過濾器(0.45μm)過濾，然后在真空中濃縮。將殘留物用硅膠色譜純化，用乙酸乙酯/MeOH(95∶5)作為洗脫劑。將所需級分合并，將其溶解于CH2Cl2中，將其干燥(Na2SO4)并在真空中濃縮，獲得一種作為非對映體混合物的噻唑衍生物9c；FAB-MS m/z 717(MH)+。
步驟d
在室溫和攪拌下將Dess-Martin全碘代烷(periodinane)(105mg，0.248mmol)加入噻唑9c(160mg，0.0246mmol )和CH2Cl2(5ml)的溶液中。將反應混合物在室溫下攪拌1小時。加入5ml猝滅溶液(25g Na2S2O3在100ml飽和NaHCO3水溶液中)使反應混合物猝滅，再加入乙酸乙酯(20ml)并接著攪拌40分鐘。分離出有機層并將水層用數(shù)份乙酸乙酯洗滌。將合并的有機萃取相順次地用飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，將其干燥(Na2SO4)并在真空中濃縮，獲得一種作為非對映體混合物的酮9d；FAB-MS m/z 715(MH)+。
步驟e
化合物9將酮9d(190mg，0.26mmol)和茴香醚(2ml)合并裝入一個聚四氟乙烯反應管中并將其安裝在HF設備上。將HF(10ml)蒸餾入-78℃的燒瓶中，將所獲混合物升溫至0℃并在0℃下攪拌3小時。在真空中除去HF，加入乙醚(25ml)，然后將蓋嚴的燒瓶放入冷凍箱中保存16小時。將所獲固體沉淀物過濾分離，用數(shù)份乙醚洗滌然后在氮氣流中干燥。將該固體用反相HPLC純化，用H2O/CH3CN/TFA(60∶40∶0.2)洗脫，獲得一種固體。將該固體凍干，獲得一種固體狀的化合物9mp105～110℃；分析計算C24H28N6O6S2·C2HF3O2·H2O計算值C，45.08；H，4.51；N，12.13；H2O，2.60實測值C，44.96；H，4.26；N，11.97；H2O，2.99實施例10步驟a
在0℃的氬氣氛中和在30分鐘內向一份攪拌著的(±)-2-哌啶乙醇(12.9g，0.10mol)和CH2Cl2(200ml)的溶液中滴加一種由雙碳酸二叔丁酯(21.8g，0.10mol)和無水CH2Cl2(200ml)形成的溶液。讓反應物升溫至室溫并攪拌5小時。將反應混合物用1N HCl萃取2次，用飽和NaHCO3水溶液萃取1次，再用鹽水萃取1次，將其干燥(Na2SO4)并在真空中濃縮，獲得一種被保護的胺10a，呈油狀。
步驟b
在室溫下將一份由胺10a(10.3g，45mmol)和CH2Cl2(100ml)形成的溶液在15分鐘內加入攪拌著的氯鉻酸吡啶鎓鹽(14.5g，67.5mmol)溶液中。將所獲混合物攪拌4小時，然后用乙醚(600ml)稀釋。用過濾劑將全部反應混合物過濾，然后在真空中濃縮，獲得一種油狀的醛10b。
步驟c
在室溫和氬氣氛下將甲基三苯基(正膦基二烯)乙酸酯(13.46g，40.3mmol)分批地加入一份由醛10b(9.14g，40.3mmol)和THF(100ml)形成的溶液中。將反應混合物攪拌16小時然后在真空中濃縮。將殘留物用數(shù)份乙醚研碎。將合并的醚萃取液干燥(Na2SO4)并在真空中濃縮，獲得一種油狀的酯10c。
步驟d
將一份由酯10c(7.75g，27.3mmol)和LiCl(3.49g，82mmol)在無水THF(80ml)中形成的溶液用NaBH4(3.12g，82mmol)處理，同時在室溫和氬氣氛中攪拌。加入EtOH(97ml)并在室溫下將所獲的混合物攪拌62小時。將所獲的混合物冷卻至0℃，然后用10％檸檬酸水溶液將其pH值調節(jié)至4。將該混合物在真空中濃縮，獲得一種含水層。用10％的檸檬酸水溶液將此水層的pH值調節(jié)至4，在室溫下攪拌30分鐘然后用CH2Cl2萃取數(shù)次。將合并的有機萃取相用鹽水洗滌，將其干燥并在真空中濃縮，獲得一種油狀的醇10d。
步驟e
將醇10d(6.06g，23.5mmol)和CH2Cl2(50ml)的溶液在10分鐘內加入氯鉻酸吡啶鎓鹽(7.60g，35.3mmol)和CH2Cl2(150ml)的混合物中，將所獲混合物在室溫下攪拌2小時。加入乙醚(250ml)，然后將所獲混合物通過一個硅膠過濾，接著用CH2Cl2/Et2O(1∶1)洗滌。將濾液干燥(Na2SO4)并在真空中濃縮，將殘留物用硅膠色譜純化，用乙酸乙酯/己烷洗脫，獲得了油狀的醛10e。
步驟f
在室溫和氬氣氛下將2-(三甲基甲硅烷基)噻唑(1.70g，9.2mmol)加入醛10e(2.07g，8.1mmol)中。將反應混合物攪拌4小時，用THF(60ml)和1.0M四丁基氟化銨/THF稀釋，接著再攪拌15分鐘。將所獲的混合物在真空中濃縮，用乙酸乙酯稀釋，然后順次地用飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，將其干燥(Na2SO4)并在真空中濃縮，獲得了油狀的噻唑衍生物10f。
步驟g
在室溫和氬氣氛下將三氟乙酸加入一份攪拌著的噻唑10f(2.90g，8.0mmol)和CH2Cl2(90ml)的溶液中。將該混合物攪拌1小時，在真空中濃縮，然后用CH2Cl2(150ml)稀釋。將所獲混合物中和(K2CO3)，過濾并在真空中濃縮。將殘留物用硅膠色譜純化，用乙酸乙酯/MeOH/NH4OH(95∶5∶2)洗脫。將所需的級分在真空中濃縮，溶解于CH2Cl2中，將其干燥(K2CO3)并在真空中濃縮，獲得一種作為非對映體混合物存在的胺10g。
步驟g
在-20至-15℃和氬氣氛下將氯甲酸異丁酯(0.55g，4.0mmol)加入一份正在攪拌著的由N-α-Boc-NG-硝基-L-精氨酸·2/3 Et2O·1/4 EtOAc(1.56g，4.0mmol)、4-甲基嗎啉(0.44g，4.4mmol)和無水THF(25ml)形成的混合物中，然后在1.5小時內將反應溫度維持在-15至-10℃的范圍內。在-10℃下和在60秒內加入由胺10f(0.85g，3.54mmol)和THF(5ml)形成的溶液。將反應混合物在-10℃下攪拌1小時，使其升溫至室溫并攪拌16小時。加入1滴DMF，將所獲混合物在室溫下再攪拌2小時，然后將其過濾。將濾液在真空中濃縮，然后將其溶解于CHCl3中。將有機層順次地用飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，將其干燥(Na2SO4)并在真空中濃縮，獲得一種固體狀的偶合衍生物10g。
步驟h
在室溫和氬氣氛下將6N HCl的乙醇溶液加入一份由衍生物10g(1.60g，2.95mmol)和THF(30ml)形成的溶液中。將所獲混合物攪拌2.5小時，在真空中濃縮，溶解于THF(25ml)中并再次濃縮，獲得一種油狀物。將此殘留物與三乙胺(15mmol)一起溶解于THF(40ml)中，然后用丹酰氯(0.84g，3.1mmol)處理。將此混合物在室溫和氬氣氛下攪拌16小時。將所獲混合物過濾，將濾液在真空中濃縮，然后用乙醚研制二次，獲得了一種白色固體狀的丹酰衍生物10h，此丹酰衍生物不經純化即用于下一步驟。
步驟i
在室溫和氬氣氛下將Dess-Martin全碘代烷(periodinane)(0.90g，2.1mmol)加入一份攪拌著的由衍生物10h(1.02g，1.5mmol)和CH2Cl2(30ml)形成的溶液中。將該混合物在室溫下攪拌1.5小時，用50ml猝滅溶液(25g Na2S2O3在100ml飽和NaHCO3水溶液中)處理，攪拌40分鐘。將有機層分離，將水層用CH2Cl2萃取2次。將合并的CH2Cl2萃取相用鹽水洗滌，將其干燥(Na2SO4)并在真空中濃縮。將殘留物溶解在乙酸乙酯(10ml)和MeOH(3ml)中，用硅膠色譜純化，用乙酸乙酯/MeOH/NH4OH(95∶5∶1)洗脫。將所需級分合并溶解于CH2Cl2中，干燥(Na2SO4)并在真空中濃縮，獲得了一種固體狀的酮10i。
步驟f
在無水條件下將酮10i(0.32g，0.47mmol)和茴香醚(5ml)裝入一個HF設備的聚四氟乙烯反應管中并冷卻至-78℃。將HF(20ml)直接蒸餾入該燒瓶中并且使該混合物升溫至0℃。將混合物攪拌1小時，在真空中除去HF并將殘留物溶解于乙醚(25ml)中，然后在無水條件下將其置于冷凍箱中貯存過夜。除去乙醚層，將所獲殘留物用數(shù)份乙醚研碎，獲得一種固體。將此固體用反相HPLC純化，用H2O/CH3CN/TFA(60∶40∶0.2)洗脫，獲得一種作為非對映體混合物的化合物10mp 81～91℃；[α]D25+25.9(c0.26，MeOH)；FAB-MSm/z 628.9(MH)+。分析計算C30H41N7O4S2·3C2HF3O2·H2O計算值C，43.77；H，4.69；N，9.92；H2O，1.82實測值C，43.77；H，4.56；N，10.00；H2O，1.82實施例11N-甲基-D-苯基丙氨?；?N-[5-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1s-[(苯并噻唑-2-基)羰基]苯基]-L-脯氨酰胺步驟a
將一種L-Cα-甲基鳥氨酸·2HCl[7.03g，35mmol；Zhenping，Edwards，P.；Roeske，R.W.，肽蛋白研究雜志(Int.J.Peptide Protein Res.)1992，40，119～126]在60ml水中的懸浮液冷卻至5℃并用3 N NaOH將其pH值調節(jié)至11.0。在4小時內滴加入氯甲酸芐酯(6.00ml，42mmol)，同時在氬氣氛和5℃下攪拌。讓反應混合物在16小時內慢慢地溫熱至22℃，然后用乙醚萃取3次。將水層冷卻至5℃，用3N HCl將pH調節(jié)至2.0，用3份乙酸乙酯萃取。3N NaOH將冷的酸性水層調節(jié)至pH11.0，然后用175ml二噁烷稀釋。在5℃下將雙碳酸二叔丁酯(38.2g，175mmol)一次性地加入，同時在氬氣中攪拌。讓反應混合物在16小時內慢慢地升溫至22℃，用3N NaOH將pH值調節(jié)至11.0，加入另一份雙碳酸二叔丁酯(38.2g，175mmol)，同時在22℃下攪拌24小時。在40℃和真空中除去二噁烷，用3N NaOH將反應混合物的pH調節(jié)至11，用乙醚萃取3次，冷卻至5℃并用NaCl飽和。加入乙酸乙酯(100ml)并用25％檸檬酸水溶液將水層調節(jié)至pH4.0(當心放出CO2)同時在5℃下攪拌。分相，酸性水相層再用5份乙酸乙酯萃取。將合并的乙酸乙酯干燥(MgSO4)，通過Celatom FW-14過濾并在40℃下真空濃縮，獲得3.70g(56％)的化合物11a，呈透明玻璃狀FAB-MS m/z381(MH)+。
步驟b
將化合物11a(6.86g，18mmol)溶解于l80ml甲醇中并將其與1.37g的20％Pd(OH)2/C合并，然后將其置于一臺Parr氫化設備中在60psig H2壓力的條件下保持18小時。將反應混合物過濾，將濾餅用4份各150ml的熱甲醇提取(當心)。將合并的甲醇提取液通過Celatom FW-14過濾，然后在40℃下和在真空中濃縮，獲得3.50g(79％)的化合物11b，呈白色固體狀；FAB-MS m/z 247(MH)+。
步驟c
將化合物11b(3.40g，13.8mmol)與三乙胺(5.77ml，41.4mmol)在DMF(75ml)中的溶液合并，向所獲懸浮液中加入N，N′-雙(芐氧基羰基)-s-甲基異硫脲(7.42g，20.7mmol；同上)。將所獲混合物在22℃和氮氣氛中攪拌40小時，用三乙胺(2.0ml，14.4mmol)和N，N′-雙(芐氧基羰基)-s-甲基異硫脲(0.78g，2.2mmol)處理，攪拌24小時，再用三乙胺(2.0ml，14.4mmol)和N，N，′-雙(芐氧基羰基)-s-甲基異硫脲(1.48g，4.1mmol)處理一次，在22℃下攪拌3天。將粗反應混合物通過Celatom FW-14過濾，在真空中于40℃除去DMF。將該油狀殘留物在200ml的0.1 NNaOH和200ml乙醚之間分配。將堿性水層用乙醚萃取4次，冷卻至5℃，用乙酸乙酯分層，用檸檬酸將pH值調節(jié)至3.5。分相，將酸性水層用乙酸乙酯萃取4次。將合并的乙酸乙酯萃取液干燥(Na2SO4)，通過Celatom FW-14過濾，在40℃的真空中濃縮。將殘留物用硅膠HPLC純化，用CH2Cl2/MeOH(95∶5)洗脫，獲得5.94g(77％)的化合物11c，呈白色泡沫狀；FAB-MS m/z 557(MH)+。
步驟d
向一份由化合物11c(5.86g，10.5mmol)在210ml甲醇中形成的溶液中加入20％Pd(OH)2/C(1.47g)，然后將該混合物在60psig的氫氣壓下裝入一臺Parr氫化設備中。24小時之后，加入另一份20％Pd(OH)2/C(0.74g)，然后將該反應混合物在60psig的氫壓力下放置6小時。將粗反應混合物通過Celatom FW-14過濾，然后在真空中濃縮，獲得一種白色泡沫狀的化合物11d 3.03g(100％)；FAB-MS m/z 289(MH)+。
步驟e
將化合物11d(519mg，1.80mmol)溶解于2.7ml的4N KOH中，以9.0ml丙酮稀釋，然后將其冷卻至-18℃。在15分鐘內向該溶液中加入一份對甲苯磺酰氯(686mg，3.6mmol)在3.6ml丙酮中的溶液，同時猛烈地攪拌。在-18至-15℃的溫度下保持1小時之后，在2.5小時內使反應混合物慢慢升溫至22℃。在20℃的真空中除去丙酮，將此水性殘留物用25ml水稀釋并用乙醚萃取3次。將水層用NaCl飽和，用乙酸乙酯分層，將水層冷卻至5℃并用1N HCl調節(jié)至pH3.5。將酸性水層再用乙酸乙酯萃取4次，將合并的乙酸乙酯萃取液用鹽水洗滌2次，將其干燥(Na2SO4)并在真空中濃縮，獲得白色泡沫狀的化合物11e 720 mg(90％)；FAB-MS m/z 443(MH)+。
步驟f
將攪拌著的化合物11e在29ml CH2Cl2/MeOH(9∶1)中的溶液冷卻至5℃，然后在10分鐘內向其中滴加2M(三甲基甲硅烷基)重氮甲烷在己烷(4.3ml，8.63mmol)中的溶液。在10分鐘后，將反應混合物在22℃的真空中濃縮，將殘留物用硅膠HPLC純化，用乙酸乙酯/己烷(3∶2)洗脫，獲得一種白色泡沫狀的化合物11f 1.06g(81％)；FAB-MS m/z 457(MH)+。
步驟g
將苯并噻唑(2.63g，19.5mmol)在20ml THF中的溶液冷卻至-75℃，同時在氮氣氛中攪拌。在-75至-65℃的溫度下和在15分鐘內滴加正丁基鋰(1.6 M在己烷中，9.46ml，15.1mmol)，然后在-75至-65℃攪拌15分鐘。在-75至-70℃的溫度下和在15分鐘內向該溶液中滴加化合物11f(461mg，1.0mmol)在10ml THF中的溶液。將該反應混合物在-75℃下攪拌2小時，用160ml被NaCl飽和過的NH4Cl飽和水溶液將反應猝滅，然后用乙酸乙酯萃取3次。將合并的乙酸乙酯萃取液用鹽水洗滌3次，將其干燥(Na2SO4)并在真空中濃縮。將殘留物用己烷研碎3次，然后將其溶解于150ml乙酸乙酯/己烷(3∶2)中，將其通過Celatom FW-14過濾，然后用硅膠HPLC純化，用乙酸乙酯/己烷(3∶2)洗脫，獲得一種透明玻璃狀的化合物11g 0.42g(74％)；FAB-MS m/z 560(MH)+。
步驟h
將化合物11g(0.389g，693mmol)溶解于14ml的CF3CO2H/CH2Cl2(1∶4)中，在22℃的氮氣氛中攪拌2小時，在10℃的真空中濃縮。將殘留物在20ml由NaCl預飽和過的1N NaOH水溶液與20mlCH2Cl2之間分配。將堿性的水層用CH2Cl2萃取3次以上，將合并的CH2Cl2萃取液用鹽水洗滌，將其干燥(Na2SO4)，然后在真空中濃縮，獲得一種褐色非晶態(tài)固體狀的化合物11h 319mg(100％)；FAB-MS m/z 462(MH)+。
步驟i
將一種(CBZ)-N-甲基-D-苯基丙氨酰基-L-脯氨酸(0.309g，0.753mmol；US4,703,036)和二異丙基乙胺(132μl，0.758mmol)在10ml無水CH2Cl2中的溶液冷卻至5℃，同時在氬氣氛中攪拌。加入雙(2-氧代-3-噁唑烷基)次膦酰氯(BOP-Cl；0.193g，0.758mmol)并將反應混合物攪拌15分鐘。在5℃下和10分鐘內加入化合物10h(0.316g，0.685mmol)和二異丙基乙基胺(119μl，0.684mmol)在10ml無水CH2Cl2中的溶液，然后讓反應混合物在4.5小時內升溫至22℃。將反應混合物在40℃和真空下濃縮，然后將殘留物在乙酸乙酯與1M KHSO4水溶液之間分配。將有機層再用1M KHSO4水溶液萃取2次，用飽和的NaHCO3水溶液萃取3次，再用鹽水萃取2次，將其干燥(Na2SO4)并在40℃和真空中濃縮。將殘留物用硅膠色譜純化，用乙酸乙酯/己烷(4∶1)洗脫，獲得一種白色泡沫狀的化合物11i 0.381g(65％)；FAB-MS m/z 855(MH)+。
步驟j
將化合物11j(0.359g，0.420mmol)溶解于6ml的無水CH2Cl2中。加入Dess-Martin全碘代烷(periodinane)(0.304g，0.717mmol)并將反應混合物在22℃氬氣氛中攪拌3小時。加入20ml的猝滅溶液(25g Na2S2O3在100ml飽和NaHCO3水溶液中)以消耗掉剩余的peridinane，然后用乙酸乙酯(60ml)稀釋并在室溫下攪拌15分鐘。分出所獲的水層并用數(shù)份乙酸乙酯萃取，將合并的有機萃取液順次地用水和鹽水洗滌，將其干燥(Na2SO4)并在真空中濃縮，獲得一種白色泡沫狀的酮11j 0.336g(94％)；FAB-MS m/z 853(MH)+。
步驟k
化合物11將化合物11j(0.336g，0.394mmol)溶解于3ml無水茴香硫醚中，然后在無水條件下將其裝入一個HF設備的聚四氟乙烯反應管中并將其冷卻至-78℃。將無水HF(3～4ml)蒸餾入該反應管中，在加料操作結束后讓混合物的溫度升至0℃。將該混合物在0℃下攪拌4小時，在真空中濃縮，然后用數(shù)份乙醚研碎，獲得了一種白色固體。將該固體用反相HPLC純化，用H2O/乙腈/TFA(60∶40∶0.2)純化。把合有化合物10的各級分合并，在真空中濃縮并將其凍干，獲得一種白色固體狀的化合物11 0.094g(28％)；mp 122～130℃；[α]D25-85.3(c0.26，MeOH)；FAB-MS m/z 853(MH)+。分析計算C29H37N7O3S·2.3TFA·1.9H2O計算值C，46.92；H，5.05；N，11.40；F，15.24；H2O，3.98實測值C，46.59；H，5.00；N，11.17；F，15.16；H2O，3.40實施例12N-甲基-D-苯基丙氨?；?N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-2S-[(6-甲氧基羰基苯并噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺化合物#12步驟a
在-78℃和氮氣氛下將1.6M正丁基鋰(80.3ml，128.4mmol)滴加入一份攪拌著的由苯并噻唑-6-羧酸(11.5g，64.17mmol)在THF(100ml)中形成的溶液中，滴加速度以能將反應溫度維持低于-70℃為準。在滴加結束后，將反應混合物在-78℃下攪拌30分鐘，然后加入一種N-α-Boc-NG-甲苯磺?；?L-精氨酸N，O-二甲基酰胺[800mg，1.69mmol；DiMaio等，《醫(yī)藥化學雜志》(Journal of Medicinal Chemistry)1992，35，3331](2.52g，5.35mmol)在THF(150ml)中的溶液，加入速度以能將反應溫度維持低于70℃為準。將所獲混合物在-78℃下攪拌2小時，使其升溫至-20℃，然后以飽和NH4Cl水溶液(700ml)稀釋。將所獲的有機層分離，將水層用數(shù)份EtOAc洗滌。將合并的有機萃取液用水、鹽水洗滌，將其干燥(Na2SO4)并在真空中濃縮。將粗混合物用硅膠色譜純化，用CH2Cl2/MeOH(8∶1)洗脫，獲得一種固體狀的偶合苯并噻唑衍生物12a。
步驟b
在-25至-20℃的溫度下將硼氫化鈉(1.42g，37.6mmol)一次性地加入一份由化合物12a(3.5g，5.9mmol)在MeOH(130ml)中形成的溶液中，將反應混合物攪拌40分鐘。加入丙酮(20ml)，使混合物升溫至室溫并在真空中濃縮。將殘留物溶解于水中，用乙酸酸化(pH3～4)，然后用數(shù)份EtOAc萃取。將合并的萃取液用水和鹽水洗滌，將其干燥(Na2SO4)并在真空中濃縮。將殘留物溶解于CH2Cl2/MeOH(6∶1)并冷卻至0℃。在5分鐘內滴加入三甲基甲硅烷基重氮甲烷(2M在己烷中)直至出現(xiàn)的黃色不消失為止，然后將反應混合物再攪拌25分鐘。將所獲的混合物在真空中濃縮，用柱色譜純化，用EtOAc/己烷(3∶1至6∶1)洗脫，獲得一種固體狀的醇12b。
步驟c
將化合物12b(3.1g，4.56mmol)、TFA(26ml)在CH2Cl2(104ml)中的溶液在室溫下攪拌1小時，然后在真空中濃縮。將殘留物用CH2Cl2稀釋并在高真空中濃縮，獲得一種油狀的粗產品12c。
步驟d
在N2中將化合物12c(2.3g，4.56mmol)和HOBT(1.32g，9.12mmol)在CH3CN(210ml)中的溶液用三乙胺(約5ml)中和。向所獲溶液中一次性地加入DCC(1.41g，6.84mmol)和N-甲基-N-CBZ-D-苯基丙氨酸-L-脯氨酸，將該混合物在室溫下攪拌2小時，然后將其過濾。將濾液在真空中濃縮，然后將其溶解于EtOAc中。將該有機溶液用飽和NaHCO3水溶液、水和鹽水洗滌，將其干燥(Na2SO4)并在真空中濃縮，獲得一種固體狀的偶合產品12d。
步驟e
在室溫和氮氣氛中將Dess-Martin全碘代烷(periodinane)(680mg，1.60mmol)加入一份化合物12d(720mg，3.76mmol)在CH2Cl2(40ml)的溶液中，將所獲混合物攪拌25分鐘。將30ml猝滅溶液(25g Na2S2O3在100ml飽和NaHCO3水溶液中)加入攪拌著的反應混合物中以消耗掉過剩的全碘代烷(periodinane)。將所獲水層分離并用數(shù)份CH2Cl2萃取，將合并的有機萃取液順次地用水和鹽水洗滌，將其干燥(Na2SO4)并在真空中濃縮，獲得一種固體狀的酮12e。
步驟f
化合物12在無水條件下將中間體酮12e(730mg，0.81mmol)和茴香醚(3ml)裝入一個HF設備的聚四氟乙烯反應管中并將其冷卻至-78℃。將HF(15～20ml)蒸餾入該反應管中，在加料完畢后，使混合物的溫度提高至0℃。將該混合物攪拌3.5小時，在真空中濃縮并用數(shù)份乙醚將其研碎，獲得一種固體。將該固體用反相HPLC純化，用水/乙腈/TFA(70∶30∶0.2)洗脫，獲得一種固體狀的化合物12mp.125℃；[α]D25-82.6(c0.5，MeOH)；FAB-MS m/z 608.3(MH)+。分析計算C30H37N7O5S·2.5 CF3CO2H·1.7H2O計算值C，45.53；H，4.68；F，15.43；N，10.62；H2O，3.32實測值C，45.51；H，4.53；F，15.19；N，10.54；H2O，3.32實施例13N-甲基-D-苯基丙氨?；?N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[(6-羧基苯并噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺
通過實施例12的變化方案來制備化合物13。在室溫下將一份無水LiOH(400mg，16.7mmol)在水(12ml)中的溶液加入一份攪拌著的化合物12d(5.0g，5.57mmol)在二噁烷(100ml)中的溶液中。將混合物攪拌4小時，再加入一份LiOH(300mg，12.5mmol)在水(7ml)中的溶液，接著再攪拌3小時。將所獲混合物用HOAc(pH3～4)酸化并用EtOAc萃取數(shù)次。將合并的有機萃取液用水和鹽水洗滌，將其干燥(Na2SO4)并進行濃縮，獲得6-羧基苯并噻唑衍生物。接著通過實施例12的步驟e(用25％的Na2S2O3水溶液猝滅)和步驟f將所說的衍生物轉變成所需的化合物，獲得了一種固體狀的化合物13；mp.125℃；[α]D25-79.6(c1.0，MeOH)；FAB-MS m/z594.4(MH)+。分析計算C29H35N7O5S·2.5CF3CO2H·H2O計算值C，45.54；H，4.44；F，15.89；N，10.93；H2O，2.01實測值C，45.59；H，4.59；F，15.60；N，10.76；H2O，2.09實施例14N-甲基-D-苯基丙氨?；?N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[(6-羧基酰氨基苯并噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺
化合物14通過實施例12的變化方案來制備化合物14。在室溫和N2中將HOBT(138mg，0.102mmol)和DCC(14mg，0.068mmol)加入一份攪拌著的化合物12c(30mg，0.034mmol)在CH2Cl2/DMF(4∶1，2ml)中的溶液中。將反應混合物攪拌30分鐘，然后加入29％的NH4OH水溶液(50μl，0.38mmol)。將混合物攪拌5小時，再加入一份HOBT(7mg)、DCC(7mg)和29％的NH4OH(20μl)水溶液。在攪拌2小時之后，將混合物用CH2Cl2稀釋。將所獲有機層順次地用水和鹽水洗滌，將其干燥(Na2SO4)并進行濃縮，獲得了相應的6-羧基酰氨基苯并噻唑衍生物。通過實施例12的步驟e和f將所說衍生物轉變成所需的化合物，獲得一種固體狀的化合物14；mp.130～143℃；[α]D25-76.0(c 0.3，MeOH)；FAB-MS m/z593(MH)+。分析計算C29H36N8O4S·2.9CF3CO2H·3.2H2O計算值C，42.61；H，4.65；F，16.85；N，11.42；H2O，5.87實測值C，42.16；H，4.35；F，16.19；N，11.45；H2O，5.37實施例15和16N-甲基-D-苯基丙氨酰基-N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[(6-羥甲基苯并噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺化合物#15N-甲基-D-苯基丙氨?；?N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1R-[(6-羥甲基苯并噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺化合物#16步驟a
通過實施例12的變化方案來制備化合物15。在-78℃和N2中將1.0M DIBAL(10ml，10mmol)滴加入一份攪拌著的化合物12c(1.5g，1.67mmol)在無水CH2Cl2(160ml)中的溶液中。在加料的過程中將反應物的溫度保持在-74℃以下。將該混合物攪拌45分鐘，然后用一份濃的NH4OH水溶液(50ml)將反應猝滅。加入一份1N HCl以促進水層和有機層的分相，將所獲水層用CH2Cl2洗滌。將合并的有機萃取液順次地用飽和的NaHCO3水溶液、水和鹽水洗滌，將其干燥(Na2SO4)和濃縮，獲得了化合物15a和相應的亞甲基衍生物15e的混合物，該混合物不進行純化即加以使用。
步驟b
在0℃和N2中將DMAP(61.2mg，0.50mmol)和三乙胺(140μl，1.00mmol)加入一份攪拌著的化合物15a和15e(9.2mg)的溶液中。一次性地加入一份叔丁基三甲基甲硅烷基氯化物(45.3mg，0.30mmol)在CH2Cl2(15ml)中的溶液，讓反應混合物升溫至室溫并攪拌8小時。將所獲混合物用CH2Cl2稀釋并依次地用10％的檸檬酸、飽和的NaHCO3水溶液、水和鹽水洗滌。將所獲有機層干燥(Na2SO4)并在真空中濃縮，獲得化合物15b和相應的亞甲基衍生物15f的混合物，該混合物不進行純化即加以使用。
步驟c
在室溫和氮氣氛下將Dess-Martin全碘代烷(periodinane)(142mg，0.334mmol)加入一份化合物15b和15f(160mg)在CH2Cl2(20ml)中的溶液中，然后將所獲混合物攪拌30分鐘。通過向攪拌著的反應混合物中加入10ml猝滅溶液(25g Na2S2O3在100ml飽和NaHCO3水溶液中)來消耗掉過剩的全碘代烷(periodinane)。將所獲水層分離并用數(shù)份CH2Cl2萃取，將合并的有機萃取液依次地用飽和NaHCO3水溶液、鹽水洗滌，于燥(Na2SO4)并在真空中濃縮，獲得酮15c和相應的亞甲基衍生物15g的固體狀混合物。
步驟d
在無水條件下將中間體與化合物15c和15g(170mg，0.17mmol)和茴香醚(2.5ml)裝入一個HF設備的聚四氟乙烯反應管中并將其冷卻至-78℃。將HF(5ml)蒸餾入該反應管中并在加料完畢后使混合物的溫度升至0℃。將該混合物攪拌3.5小時，在真空中濃縮，用數(shù)份乙醚將其研碎，獲得一種固體。將此固體用反相HPLC純化，用水/乙腈/TFA(70∶30∶0.2)洗脫，獲得純的固體化合物15和16
化合物15FAB-MS m/z 580(MH)+化合物16mp 75～85℃；[α]D25＝-82.6(c＝0.32，MeOH)；FAB-MS m/z 580(MH)+。分析計算C30H37N7O5S·2.5CF3CO2H·1.7H2O計算值C，43.74；H，4.85；N，10.09實測值C，43.96；H，4.76；N，9.95實施例17和18N-甲基-D-苯基丙氨?；?N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[(6-氟代苯并噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺化合物#17N-甲基-D-苯基丙氨?；?N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[(6-氟代苯并噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺化合物#18
通過實施例12的變化方案來制備化合物17和18。使用6-氟苯并噻唑代替實施例12步驟A中的原料物苯并噻唑，流程中的其余步驟照樣進行，只是作了很小的變化。6-氟苯并噻唑的制備方法如下。在-10℃下將亞硝酸鈉(24.6g，35.7mmol)在水(80ml)中的溶液滴加入一份攪拌著的2-氨基-6-氟苯并噻唑(10.0g，59.5mmol)在85％H3PO4中的溶液中，以保證反應溫度不超過-4℃。將該混合物在-8℃下保持1小時，然后將其倒入在0℃下的50％的H3PO4中，使其溫度在2小時內升高至室溫。加入水以使其總體積達到3升，將所獲混合物用Na2CO3中和。將水層和固體沉淀一起用數(shù)份CHCl3/EtOAc(1∶1)萃取，將合并的有機萃取液用鹽水洗滌，將其干燥(Na2SO4)并在真空中濃縮，獲得固體狀的6-氟苯并噻唑。
化合物17mp 65～80℃；[α]D25＝-72.9(c＝0.32，MeOH)；FAB-MS m/z 568(MH)+。分析計算C28H34FN7O3S·3.0CF3CO2H·1.1H2O計算值C，43.94；F，20.44；H，4.25；N，10.55；H2O，2.13實測值C，43.96；F，20.57；H，4.22；N，10.82；H2O，2.22化合物18mp 85～100℃；[α]D25＝-61.6(c＝0.85，MeOH)；FAB-MS m/z 568(MH)+。分析計算C28H34FN7O3S·2.7CF3CO2H·0.9H2O計算值C，44.99；F，19.39；H，4.35；N，10.99；H2O，1.82實測值C，45.01；F，19.61；H，4.24；N，11.15；H2O，1.84實施例19和20N-甲基-D-苯基丙氨?；?N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[(4-乙氧基羰基噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺化合物#19N-甲基-D-苯基丙氨?；?N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[(4-乙氧基羰基噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺化合物#20
通過實施例9方法的變化方案來制備化合物19和20。用N-CBZ-N-甲基-D-苯基丙氨?；?L-脯氨酸代替中間體9a，反應流程的其余反應步驟使用相應的精氨酸差向異構體進行，只是作了很小的變化，獲得了固體狀的標題化合物化合物19mp 85～100℃；[α]D25＝-61.6(c＝8.5，MeOH)；FAB-MS m/z 572(MH)+。分析計算C27H37N7O5S·2.3CF3CO2H·1.5H2O計算值C，44.08；H，4.95；N，11.39；H2O，3.14實測值C，44.25；H，4.68；N，11.29；H2O，3.29化合物20mp 85～100℃；[α]D25＝-61.6(c＝0.85，MeOH)；FAB-MS m/z 572(MH)+。分析計算C27H37N7O5S·2.75CF3CO2H·2.0H2O·0.2C2H3N計算值C，42.51；H，4.81；N，10.85；H2O，3.88實測值C，42.17；H，4.66；N，10.88；H2O，4.21實施例21
化合物21通過實施例5的變化方法來制備化合物21。使用1，2-苯二胺代替在該實施例步驟d中的2-氨基苯酚，獲得相應的苯并咪唑衍生物。使用該衍生物進行其余的步驟，只作了很小的改變，獲得了固體狀的標題化合物mp 70～80℃；[α]D25＝-63.1(c＝1.00，H2O)；FAB-MSm/z 533(MH)+。分析計算C28H36N8O3·3.75CF3CO2H·H2O計算值C，43.59；H，4.30；N，11.45；H2O，1.84實測值C，43.66；H，4.37；N，11.45；H2O，1.84
實施例22
化合物22通過實施例12的一般方法來制備化合物22。使用N-甲基咪唑代替步驟a中的苯并噻唑，獲得一種與中間體12a相類似的咪唑。用該中間體進行其余步驟，獲得一種固體狀的化合物22mp 85～100℃；[α]D25＝-61.6(c＝0.85，MeOH)；FAB-MS m/z 497(MH)+。分析計算C28H34FN7O3S·2.7CF3CO2H·0.9H2O計算值C，44.99；F，19.39；H，4.35；N，10.99；H2O，1.82實測值C，45.01；F，19.61；H，4.24；N，11.15；H2O，1.84實施例23
化合物23按照實施例12的方法制造化合物23。使用2-溴吡啶代替苯并噻唑-6-羧酸，獲得一種固體狀的標題化合物mp 40～68℃；FAB-MS m/z 494(MH)+；分析計算C28H34FN7O3S·2.7CF3CO2H·0.9H2O計算值C，44.99；F，19.39；H，4.35；N，10.99；H2O，1.82實測值C，45.01；F，19.61；H，4.24；N，11.15；H2O，1.84
實施例24
化合物24按照實施例5的方法來制備化合物24。使用氨茴酸代替2-氨基苯酚，獲得了固體狀的標題化合物mp 122～138℃；FAB-MS m/z561(MH)+；分析計算C29H36N8O4·2.6C2H2O4·3.0H2O計算值C，45.08；H，4.93；N，12.30；H2O，5.93實測值C，45.05；H，4.79；N，12.57；H2O，5.99實施例25N-甲基-D-苯基丙氨酰基-N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[(6-羥基苯并噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺
化合物25按照實施例12的方法制備化合物25，使用5-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)苯并噻唑代替苯并噻唑-6-羧酸，獲得一種固體mp118.128℃；FAB-MS m/z 566(MH)+；分析計算C28H35N7O4S·2C2H2O4·1.5H2O計算值C，46.83；H，4.79；N，11.95；H2O，3.29實測值C，46.79；H，4.79；N，12.15；H2O，3.29
實施例26
化合物26化合物26的制備方法是使用反相HPLC將化合物8進一步分離成單獨的非對映體，獲得固體狀的標題化合物mp 90～110℃；FAB-MSm/z 614(MH)+。
實施例27
化合物27化合物27的制備方法是使用反相HPLC將化合物8進一步分離成單獨的非對映體，獲得固體狀的標題化合物mp 60～75℃；FAB-MSm/z 614(MH)+。
實施例28
化合物28按照實施例12的方法制備化合物28，使用1-甲基苯并咪唑代替苯并噻唑-6-羧酸，獲得一種固體mp118～128℃；FAB-MS m/z566(MH)+；[α]D25＝-57.8(c1.0，MeOH)；分析計算C29H38N8O3·3.2C2H2O4·1.1H2O計算值C，45.65；F，19.58；H，4.70；N，12.03；H2O，2.13實測值C，45.66；F，19.19；H，4.51；N，12.02；H2O，1.77實施例29N-甲基-D-環(huán)己基丙氨?；?N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[(苯并噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺
化合物29按照實施例12的一般方法制備化合物29。在步驟a中使用苯并噻唑代替苯并噻唑-6-羧酸以及在步驟d中使用N-Boc-N-甲基-D-環(huán)己基丙氨?；?L-脯氨酸代替N-CBZ-N-甲基-D-苯基丙氨?；?L-脯氨酸，獲得一種固體狀的標題化合物mp 90～100℃；[α]D25＝-40.96(c＝0.708，MeOH)；FAB-MS m/z497(MH)+；分析計算C28H41N7O3S·3CF3CO2H·0.75H2O計算值C，44.81；F，18.76；H，4.35；N，10.76；H2O，1.48實測值C，44.92；F，18.83；H，5.03；N，10.80；H2O，1.37實施例30
化合物30按照實施例12的一般方法制備化合物30。使用N-Boc-N-甲基-D-(五氟苯基)丙氨?；?L-脯氨酸代替N-CBZ-N-甲基-D-苯基丙氨?；?L-脯氨酸，獲得一種固體狀的標題化合物mp 98～125℃；FAB-MS m/z 640(MH)+；分析計算C28H30F5N7O3S·2.25CF3CO2H·1.25H2O計算值C，42.48；F，24.29；H，3.81；N，10.67；H2O，2.45實測值C，42.75；F，24.12；H，3.85；N，10.66；H2O，2.61實施例31
化合物31按照實施例12的方法制備化合物31。使用苯并噻唑代替苯并噻唑-6-羧酸以及使用環(huán)戊烷羧酸代替N-CBZ-N-甲基-D-苯基丙氨?；?L-脯氨酸，獲得固體狀的標題化合物mp 60～70℃；[α]D20＝-+5.1(C＝0.68，MeOH)；FAB-MS m/z 388(MH)+；分析計算C19H25N5O2S·1.25CF3CO2H·0.75H2O計算值C，47.50；F，13.10；H，5.14；N，12.88；H2O，2.48實測值C，47.50；F，13.19；H，4.99；N，13.19；H2O，2.37實施例32N-甲基-D-(4-氟苯基)丙氨?；?N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[(苯并噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺
化合物32按照實施例12的方法制備化合物32。使用苯并噻唑代替苯并噻唑-6-羧酸以及使用N-Boc-N-甲基-D-(4-氟苯基)丙氨?；?L-脯氨酸代替N-CBZ-N-甲基-D-苯基丙氨酰基-L-脯氨酸，獲得固體狀的標題化合物mp 70～125℃；[α]D25＝-79.7(C＝1.0，MeOH)；FAB-MS m/z 568(MH)+；分析計算C28H34N7O3S·2.1CF3CO2H·1.1H2O計算值C，46.77；F，16.77；H，4.67；N，11.86；H2O，2.40實測值C，46.42；F，16.69；H，4.67；N，11.82；H2O，2.54實施例33和34N-甲基-D-苯基甘氨酰基-N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[(苯并噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺化合物#33化合物#34
化合物33和34按照實施例12的方法制備化合物33。使用苯并噻唑代替苯并噻唑-6-羧酸以及使用N-Boc-N-甲基-D，L-苯基甘氨酰基-L-脯氨酸代替N-CBZ-N-甲基-D-苯基丙氨?；?L-脯氨酸，獲得了非對映體33和34，利用反相HPLC將該混合物分離化合物33mp 60(s)～125℃；[α]D20＝-43.0(C＝1.0，MeOH)；FAB-MS m/z 536(MH+)。分析計算C27H33N7O3S·2.1CF3CO2H·1.9H2O計算值C，46.30；F，14.78；H，4.84；N，12.11；H2O，4.23實測值C，46.52；F，15.09；H，4.84；N，12.29；H2O，4.53化合物34mp 65(s)～125℃；[α]D20＝-1.3(C＝1.0，MeOH)；FAB-MS m/z 536(MH+)。分析計算C27H33N7O3S·2.25CF3CO2H·1.75H2O計算值C，45.93；F，15.57；H，4.74；N，11.90；H2O，3.83實測值C，46.21；F，15.67；H，4.90；N，12.09；H2O，4.22實施例35N-甲基-D-(二苯基)丙氨?；?N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[(苯并噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺
化合物35按照實施例12的方法制備化合物35。使用苯并噻唑代替苯并噻唑-6-羧酸以及使用N-乙?；?D-苯基丙氨?；?L-脯氨酸代替N-CBZ-N-甲基-D-苯基丙氨酰基-L-脯氨酸，獲得了固體狀的標題化合物mp 65～125℃；FAB-MS m/z 578(MH+)。分析計算C29H35N7O4S·1.4CF3CO2H·H2O計算值C，50.57；F，10.56；H，5.12；N，12.98；H2O，2.38實測值C，50.77；F，10.39；H，5.03；N，13.17；H2O，2.70實施例36
化合物36按照實施例12的方法制備化合物36。使用N-Boc-N-甲基-D-二苯基丙氨酰基-L-脯氨酸代替N-CBZ-N-甲基-D-苯基丙氨?；?L-脯氨酸以及使用苯并噻唑代替苯并噻唑-6-羧酸，獲得了固體狀的標題化合物mp 65～125℃；FAB-MS m/z578(MH+)。分析計算C29H35N7O3S·2.25CF3CO2H·1.9H2O計算值C，50.45；F，13.99；H，4.95；N，10.69；H2O，3.73實測值C，50.20；F，10.70；H，4.78；N，13.62；H2O，3.34
實施例37N-甲基-D-環(huán)己基甘氨?；?N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[(苯并噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺
化合物37按照實施例12的方法制備化合物37。使用N-Boc-N-甲基-D-環(huán)己基甘氨?；?L-脯氨酸代替N-CBZ-N-甲基-D-苯基丙氨酰基-L-脯氨酸以及使用苯并噻唑代替苯并噻唑-6-羧酸，獲得了固體狀的標題化合物mp 65～125℃；FAB-MS m/z542(MH+)。分析計算C27H39N7O3S·2.0CF3CO2H·2.0H2O計算值C，46.21；F，14.15；H，5.63；N，12.17；H2O，4.47實測值C，45.96；F，14.39；H，5.71；N，12.07；H2O，4.41實施例38
化合物38按照實施例12的方法制備化合物38。在步驟a中使用N-Boc-L-苯基丙氨酸N，O-二甲酰胺代替N-α-Boc-NG-甲苯磺?；?L-精氨酸N，O-二甲酰胺以及使用苯并噻唑代替苯并噻唑-6-羧酸。該流程的其余步驟照樣進行，只是作了很小的改變，獲得了固體狀的標題化合物mp 74～95℃；[α]D25＝-45.3(C＝1.00，MeOH)；FAB-MS m/z 541(MH+)。分析計算C31H32N4O3·1.5CF3CO2H·0.7H2O計算值C，56.38；F，11.8； H，4.86；N，7.73；H2O，1.74實測值C，56.62；F，11.48；H，4.48；N，7.61；H2O，1.76實施例39
化合物39按照實施例12的方法制備化合物39。在步驟a中使用N-Boc-L-正亮氨酸N.O-二甲酰胺代替N-α-Boc-NG-甲苯磺?；?L-精氨酸N，O-二甲酰胺以及使用苯并噻唑代替苯并噻唑-6-羧酸。該流程的其余步驟照樣進行，只是作了很小的改變，獲得了固體狀的標題化合物[α]D25＝-80.7(C＝1.0，MeOH)；FAB-MS m/z507(MH+)。分析計算C28H34N4O3·1.5CF3CO2H·0.3H2O計算值C，54.51；F，12.52；H，5.33；N，8.2； H2O，0.79實測值C，54.6； F，12.28；H，5.38；N，8.18；H2O，0.60實施例40
化合物40按照實施例12的方法制備化合物40。在步驟a中使用N-α-Boc-N-α-甲基-NG-甲苯磺?；?L-精氨酸N.O-二甲酰胺代替N-α-Boc-NG-甲苯磺?；?L-精氨酸N，O-二甲酰胺以及使用苯并噻唑代替苯并噻唑-6-羧酸，以及照樣進行步驟b和c。步驟d要求使用雙(2-氧代-3-噁唑烷基)膦酰氯(BOP-Cl)作為偶合劑。該流程的其余步驟照樣進行，只是作了很小的改變，獲得了一種固體狀的標題化合物[α]D25＝-91.3(C＝1.00，MeOH)；FAB-MS m/z 564(MH+)。分析計算C29H37N7O3S·2.3CF3CO2H·1.1H2O計算值C，47.72；F，15.5； H，4.95；N，11.59；H2O，2.34實測值C，47.58；F，15.69；H，4.89；N，11.58；H2O，2.36實施例41D-苯基丙氨?；?N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[(苯并噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺
化合物41按照實施例12的方法制備化合物41。使用N-CBZ-D-苯基丙氨?；?L-脯氨酸代替N-CBZ-N-甲基-D-苯基丙氨?；?L-脯氨酸以及使用苯并噻唑代替苯并噻唑-6-羧酸，獲得了固體狀的標題化合物FAB-MS m/z 540(MH+)；分析計算C27H33N7O3S·2.4CF3CO2H·0.9H2O計算值C，46.27；F，16.57；H，4.54；N，11.8； H2O，1.96實測值C，46.22；F，16.01；H，4.59；N，12.02；H2O，1.6實施例42N-甲基-D-苯基丙氨?；?N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[(苯并噻唑-2-基)羰基]丁基]-2S-哌啶羧酰胺
化合物42按照實施例12的方法制備化合物42。在步驟a中使用苯并噻唑代替苯并噻唑-6-羧酸以及在步驟d中使用N-Boc-N-甲基苯基丙氨?；?L-高脯氨酸(homoproline)代替N-CBZ-N-甲基-D-苯基丙氨?；?L-脯氨酸，獲得了固體狀的標題化合物FAB-MS m/z 564(MH+)；分析計算C29H37N7O3S·2.4CF3CO2H·1.3H2O計算值C，47.16；F，15.89；H，4.92；N，11.39；H2O，2.72實測值C，46.76；F，15.62；H，4.95；N，11.39；H2O，2.28實施例43
化合物43按照實施例12的方法制備化合物43。在步驟a中使用苯并噻唑代替苯并噻唑-6-羧酸以及在步驟d中使用N-Boc-N-甲基-D-纈氨?；?L-脯氨酸代替N-CBZ-N-甲基-D-苯基丙氨酰基-L-脯氨酸，獲得了固體狀的標題化合物FAB-MS m/z552(MH+)；分析計算C28H37N7O3S·2.3CF3CO2H·H2O計算值C，47.06；F，15.76；H，5.00；N，11.78；H2O，2.16實測值C，46.89；F，16.22；H，5.06；N，12.11；H2O，2.76實施例44
化合物44化合物44的制備方法是通過加熱回流甲酸乙酯來處理中間體3e，然后將所獲產品用Dess Martin全碘代烷(periodinane)氧化，接著用HF來脫除酮產品的保護基，獲得了固體狀的標題化合物FAB-MS m/z560(MH+)；分析計算C14H17N5O2S·1.32CF3CO2H·0.71H2O計算值C，41.39；F，15.60；H，4.12；N，14.50；H2O，2.66實測值C，41.04；F，15.49；H，3.97；N，14.84；H2O，2.26實施例451-(N-甲基氨基)-1-環(huán)己基羰基-N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[(苯并噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺
化合物45按照實施例12的方法制備化合物45。在步驟a中使用苯并噻唑代替苯并噻唑-6-羧酸以及在步驟d中使用1-(N-Boc-N-甲氨基)-1-環(huán)己烷羰基-L-脯氨酸代替N-CBZ-N-甲基-D-苯基丙氨?；?L-脯氨酸。在流程中的其余步驟照樣進行，只是作了很小的修改，獲得了固體狀的標題化合物FAB-MS m/z 528(MH+)；分析計算C26H37N7O3S·2.3CF3CO2H·1.8H2O計算值C，44.69；F，15.94；H，5.26；N，11.92；H2O，3.94實測值C，44.37；F，15.8； H，4.89；N，11.75；H2O，3.11實施例462，2-二苯基甘氨?；?N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[(苯并噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺
化合物46按照實施例12的方法制備化合物46。在步驟a中使用苯并噻唑代替苯并噻唑-6-羧酸以及在步驟d中使用N-CBZ-二苯基甘氨?；彼岽鍺-CBZ-N-甲基-D-苯基丙氨酰基-L-脯氨酸，獲得固體狀的標題化合物FAB-MS m/z 598(MH+)；分析計算C32H35N7O3S·2.6CF3CO2H·1.2H2O計算值C，48.79；F，16.18；H，4.40；N，10.71；H2O，2.36實測值C，48.70；F，15.78；H，4.22；N，10.63；H2O，1.37實施例47α-甲基-D-苯基丙氨酰基-N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[(苯并噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺
化合物47
按照實施例12的方法制備化合物47。在步驟a中使用苯并噻唑代替苯并噻唑-6-羧酸以及在步驟d中使用N-Boc-α-甲基-D-苯基丙氨?；彼岽鍺-CBZ-N-甲基-D-苯基丙氨酰基-L-脯氨酸，獲得固體狀的標題化合物FAB-MS m/z 550(MH+)；分析計算C28H35N7O3S·2.6CF3O2H·1.5H2O計算值C，45.67；F，16.97；H，4.69；N，11.23實測值C，45.28；F，16.91；H，4.46；N，11.00實施例48
化合物48按照實施例12的方法制備化合物48。在步驟a中使用苯并噻唑代替苯并噻唑-6-羧酸以及在步驟d中使用N-Boc-L-脯氨酸代替N-CBZ-N-甲基-D-苯基丙氨?；?L-脯氨酸，獲得固體狀的標題化合物FAB-MS m/z 389(MH+)；分析計算C18H24N6O2S·1.9CF3CO2H·0.9H2O計算值C，42.14；F，17.43；H，4.49；N，13.53；H2O，2.58實測值C，42.30；F，17.69；H，4.20；N，13.18；H2O，2.61實施例49
化合物49
按照實施例12的方法制備化合物49。在步驟a中使用苯并[b]噻吩代替苯并噻唑-6-羧酸，在流程中的其余步驟照樣進行，只是作了很小的改變，獲得固體狀的標題化合物[α]D25＝-78.3(C＝1.00，MeOH)；FAB-MS m/z 549(MH+)；分析計算C29H36N6O3S·2.4CF3CO2H·1.5H2O計算值C，47.80；F，16.10；H，4.91；N，9.89；H2O，3.18實測值C，47.68；F，15.81；H，4.82；N，9.74；H2O，3.18實施例50N-甲基-苯基丙氨?；?N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[(6-甲氧基苯并噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺
化合物50按照實施例12的方法制備化合物50。在步驟a中使用6-甲氧基苯并噻唑代替苯并噻唑-6-羧酸。在流程中的其余步驟照樣進行，只是作了很小的改變，獲得固體狀的標題化合物[α]D25＝-76.6(C＝0.73，MeOH)；FAB-MS m/z 549(MH+)；分析計算C29H37N7O4S·2.3CF3CO2H·1.75H2O計算值C，47.80；F，16.10；H，4.91；N，9.89；H2O，3.18實測值C，47.68；F，15.81；H，4.82；N，9.74；H2O，3.18實施例51N-甲基-D-苯基丙氨酰基-N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[(4，5，6，7-四氫苯并噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺
化合物51按照實施例12的方法制備化合物51。在步驟a中使用4，5，6，7-四氫苯并噻唑代替苯并噻唑-6-羧酸，流程中的其余步驟照樣進行，獲得固體狀的標題化合物mp 50～60℃；FAB-MS m/z 554(MH+)；分析計算C28H39N7O3S·2.6CF3CO2H·1.4H2O計算值C，45.55；F，16.93；H，5.11；N，11.20；H2O，2.88實測值C，45.71；F，17.16；H，5.31；N，11.34；H2O，2.96實施例52N-甲基-D-苯基丙氨?；?N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[(萘并[2，1-D]噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺
化合物52按照實施例12的方法制備化合物52，不同之處是使用萘并[2，1-d]噻唑代替6-羧基苯并噻唑，獲得了一種固體[α]D25＝-103.0(C＝1.00，MeOH)；FAB-MS m/z 560(MH+)；分析計算C32H37N7O3S·3.46CF3CO2H·1.3H2O計算值C，45.93；F，19.38；H，4.26；N，9.36；H2O，2.30實測值C，45.60；F，19.06；H，4.03；N，9.70；H2O，1.96
實施例53步驟a
將一種由5-甲氧基戊酸(6.80g，0.052mol；kirmse，K.；Jansen，U.Chem.Ber.1985，118，2607～2625)和三乙胺(6.80g，0.067mol)在100ml無水THF中形成的溶液冷卻至-78℃，同時在氬氣氛中攪拌。在-78℃和15分鐘內向反應混合物中加入新戊酰氯(6.80g，0.057mol)。在15分鐘后，將反應混合物升溫至0℃，攪拌1.5小時，然后再冷卻至-78℃。
另一方面，將正丁基鋰(1.6M丁基鋰的己烷溶液58ml，0.093mol)在30分鐘內滴加入一份(4S，5R)-(-)-4-甲基-5-苯基-2-噁唑烷酮(16.4g，0.093mol)在100ml無水THF中的溶液中，同時在氬氣氛中和-78℃下攪拌。15分鐘后，將此反應混合物慢慢地加入上述無水反應混合物中，同時在氬氣中和-78℃下攪拌。將反應混合物在18小時內慢慢地升溫至室溫，用1N的KHSO4水溶液將反應猝滅，然后在真空中和40℃下除去溶劑。將殘留物在水和CH2Cl2之間分配，將水層用CH2Cl2萃取3次。將合并的CH2Cl2萃取液用鹽水洗滌2次，然后用無水Na2SO4干燥并在真空中和40℃濃縮。將殘留物用硅膠色譜純化，用CH2Cl2/EtOAc(95∶5)濃縮，獲得一種白色固體狀的化合物53a 8.2g(55％)；FAB-MS m/z 292(MH+)。
步驟b
根據(jù)D.A.Evan等[四面體(Tetrahedron)1988，44，5525～5540]的方法使化合物53a(3.81g，0.013mol)與偶氮二羧酸二叔丁酯(0.48g，0.015mol)反應，獲得化合物53b的粗產品。將此粗產品用硅膠色譜純化，用CH2Cl2/己烷/乙腈(70∶30∶7)洗脫，獲得白色固體狀的純化合物53b(2.33g，33％)；FAB-MS m/z 522(MH+)。
步驟c
將化合物53b(2.33g，0.0045mol)溶解于18ml THF中，將其冷卻至0℃，然后用一份LiOH·H2O(0.46g，0.0107mol)在9ml H2O中的溶液處理。加入H2O2的水溶液(濃度為30％的溶液1.1ml，0.010mol)并將反應混合物在0℃下攪拌3小時。將反應混合物在1N HCl水溶液與CH2Cl2之間分配，將酸性水層用CH2Cl2萃取。將合并的CH2Cl2萃取液用鹽水洗滌，用無水MgSO4干燥并在真空中和40℃下濃縮。將殘留物用硅膠色譜純化，用EtOAc/己烷/HOAc洗脫，獲得一種白色固體狀的化合物53c；FAB-MS m/z 363(MH+)。
步驟d
將化合物53c(2.15g，0.0593mol)溶解于215ml的TFA/CH2Cl2(1∶4 v/v)中并在室溫和氬氣氛下攪拌1.5小時。在真空中和20℃下除去溶劑，獲得化合物53d(2.07g)；FAB-MS m/z 163(MH+)。
步驟e
將化合物53d溶解于無水乙醇(100ml)中，將其與PtO2(0.300g)合并，然后裝入一臺Parr氫化設備中并在氫氣氛(55psig壓力)和室溫下保持24小時。將該混合物用過濾劑過濾并在真空中濃縮。將殘留物溶解于甲醇(50ml)中，然后用Et3N約2ml將其pH值調節(jié)至8。將該溶液冷卻至0℃，用雙碳酸二叔丁酯(2.0g，0.009mol)處理，并在20小時內讓其緩慢地升溫至室溫。將反應混合物在真空中和40℃下濃縮，然后將其在EtOAc(50ml)與冷的(5℃)1N HCl水溶液(50ml)之間分配。將有機萃取液用冷的1N HCl水溶液(50ml)萃取，用鹽水洗滌，然后用無水Na2SO4干燥并在真空中和40℃下濃縮，獲得一種白色固體狀的化合物53e(2.15g)；FAB-MS m/z248(MH+)。
步驟f
將化合物53e(1.48g，0.0060mol)溶解于70ml無水CH2Cl2中，將其與N，O-二甲基羥胺鹽酸化物(0.878g，0.0090mol)合并。用Et3N將所獲混合物的pH值調節(jié)至8，然后用雙(2-氧代-3-噁唑烷基)膦酰氯(BOP-Cl；2.29g，0.0090mol)處理，同時在室溫和氬氣氛中攪拌。2小時后，將反應混合物在CH2Cl2和冷的1N HCl水溶液之間分配。將有機層用飽和的NaHCO3水溶液、鹽水萃取，用無水MgSO4干燥并在真空中濃縮。將殘留物部分地溶解在甲醇中，不溶解的部分用過濾法除去。將濾液在真空中濃縮，獲得一種白色固體狀的化合物53f(1.00g，57％)；FAB-MS m/z 291(MH+)。
步驟g
化合物53按照實施例3的一般方法將酰胺53f轉變成化合物53。按照制備化合物3c的方法將化合物53f與2-鋰苯并噻唑反應。將所獲的酮中間體按照制備化合物3d和3e的方法處理，然后將所獲的氨基醇通過步驟3f與(CBZ)-N-甲基-D-苯基丙氨?；?L-脯氨酸偶合。將該中間體相似地通過實施例3的其余步驟處理，獲得化合物53，將該化合物用反相HPLC純化，用H2O/乙腈/TFA(50∶50∶0.2)洗脫，獲得白色固體狀的化合物53；[α]D25-85.3(c0.26，MeOH)；FAB-MSm/z 853(MH+)；分析計算C28H34N4O4S·2.15TFA·1.1H2O計算值C，51.12；H，5.33；N，7.85；F，11.98；H2O，2.77實測值C，51.16；H，5.17；N，7.87；F，11.58；H2O，2.45實施例54N-甲基-D-苯基丙氨酰基-N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[(4-羧基噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺步驟a
將一種中間體1b(5.09g，6.52mmol)和L-胱氨酸乙酯·HCl(2.42g，13.05mmol)在無水CH2Cl2(127ml)中的混合物在室溫和氬氣氛中攪拌16小時。用過濾劑將所獲混合物過濾，在真空中濃縮，然后將其在鹽水與乙酸乙酯之間分配。將水層用數(shù)份乙酸乙酯萃取，將合并的有機萃取液干燥(Na2SO4)并在真空中濃縮。將殘留物用硅膠色譜純化，用CH2Cl2∶MeOH∶NH4OH(90∶9∶1)洗脫，獲得一種白色泡沫狀的化合物54a。
步驟b
將化合物54a(1.0g，1.18mmol)和MnO2(1.00g，14.38mmol)在無水CH2Cl2(28ml)的混合物在室溫和氬氣氛中攪拌4.5小時。加入另一份MnO2(0.25g)并將該混合物再攪拌2.5小時。將所獲混合物用過濾劑過濾并在真空中濃縮，獲得一種固體狀的噻唑54b粗產品。
步驟c
將LiOH(65mg，2.64mmol)和H2O(0.1ml)在二噁烷(0.9ml)中的混合物在氬氣氛中攪拌3小時。將所獲混合物用H2O稀釋并用數(shù)份乙醚萃取。將水層分離并用1N HCl將其酸化至pH4，然后用數(shù)份CH2Cl2萃取。將合并的CH2Cl2萃取液用鹽水洗滌，將其干燥(Na2SO4)并在真空中濃縮，獲得一種固體狀的酸54b。
步驟d
將化合物54c(252mg，0.31mmol)和全碘代烷(periodinane)(197mg，0.464mmol)在CH2Cl2(10ml)中的混合物在氬氣氛中和室溫下攪拌1小時。在3小時加入另一份全碘代烷(periodinane)(132mg，0.31mmol)，然后將所獲混合物用Na2S2O3水溶液猝滅。用乙酸將水層酸化至pH3.0，然后用數(shù)份CH2Cl2洗滌。將合并的有機萃取液用鹽水洗滌，將其通過硅藻土過濾并在真空中濃縮。將殘留物用反相HPLC純化，用CH3CN∶H2O∶TFA(50∶50∶0.2)洗脫，獲得固體狀的酮54d。
步驟e
化合物54在無水條件下將中間體酮54d(140mg，0.17mmol)和茴香醚(4ml)裝入一個HF設備的聚四氟乙烯反應管中并將其冷卻至-78℃。將HF(8ml)蒸餾入該反應管中，在加料完畢后，允許混合物的溫度上升至-10℃。將該混合物在-20至-10℃的范圍內攪拌1小時，在真空中濃縮，然后用數(shù)份乙醚研碎，獲得一種固體產品。將此固體用反相HPLC純化，用水/乙腈/TFA(70∶30∶0.2)洗脫，然后將其凍干，獲得一種固體狀的化合物54[α]D25＝-86.5(C＝0.65，H2O)；FAB-MS m/z 860(MH+)；分析計算C25H33N7O5S·2.5CF3CO2H·1.7H2O計算值C，41.93；H，4.56；N，11.41；H2O，3.56實測值C，41.59；H，4.53；N，11.84；H2O，3.40實施例55和56
按照實施例54的變化方法來制備化合物55和56。在5℃和氬氣氛下將BOP-Cl(13mg，0.03mmol)加入一份攪拌著的中間體54c(21.8mg，0.027mmol)、三乙胺(5.6μl，0.077mmol)、DMF(1.5ml)和苯乙胺(5μl，0.041mmol)的混合物中。將所獲混合物攪拌16小時，在真空中濃縮，然后將其在乙酸乙酯與飽和的NaHCO3水溶液中分配。將水層用數(shù)份乙酸乙酯萃取，將合并的有機萃取液干燥(Na2SO4)并在真空中濃縮，獲得一種被保護的酰胺。將該酰胺按照實施例54的方法脫除保護，獲得固體狀相應的標題化合物化合物55[α]D25＝-67.5(C＝0.74，MeOH)；FAB-MS m/z647(MH+)；分析計算C33H42N8O4S·2.6CF3CO2H·1.2H2O計算值C，41.93；H，4.56；N，11.41；H2O，3.56實測值C，41.59；H，4.53；N，11.84；H2O，3.40化合物56FAB-MS m/z 647(MH+)；
實施例57步驟a
將L-4-氰基苯基丙氨酸(36.1g，0.19mol；EP 0513675A1)與Et3N(26ml，0.19mol)合并于550ml的水中。將所獲溶液用雙碳酸二叔丁酯(68.0g，0.31mol)處理，在室溫下攪拌18小時，冷卻至5℃。用濃HCl將pH值調節(jié)至1，將酸性水層用EtOAc(500ml)萃取兩次。將合并的EtOAc層用鹽水(200ml)洗滌2次，用Na2SO4干燥并在真空中濃縮。將殘留物用己烷研碎，獲得一種淺紅色的固體狀化合物57a(50.0g，87％)；mp＝145～147℃(分解)；[α]D25+3.3(C1.0，MeOH)；FAB-MS m/z 291(MH+)。
步驟b
將一份化合物57a(25g，0.086mol)、N，O-二甲基羥胺鹽酸化物(12.7g，0.130mol)在無水DMF(500ml)中的溶液冷卻至0℃，同時在氬氣氛中攪拌并用Et3N(23.3g，0.230mol)處理。在10分鐘內分批地加入苯并三唑-1-基氧基-三(二甲氨基)六氟磷酸鏻(BOP；42.1g，0.095mol)并將反應混合物在0-5℃下攪拌18小時，同時添加Et3N以將pH值維持在8～9。將反應混合物在真空中濃縮，將殘留物在CH2Cl2(500ml)與H2O(250ml)之間分配。將有機層用50ml的5％NaHCO3水溶液、50ml 1N HCl水溶液、100ml水洗滌，用無水Na2SO4干燥，然后在真空中濃縮。將殘留物用硅膠色譜純化，用CHCl3/MeOH(95∶5)洗脫，獲得一種黃色固體狀的化合物57b(22.1g，70％)；FAB-MS m/z 334(MH+)。
步驟c
將化合物57b(28.7g，0.0861mol)和Et3N(100ml，0.72mol)溶解于吡啶(400ml)中。在室溫下用無水H2S向該溶液中鼓泡3小時。然后將該反應器關閉，在室溫下放置60小時，然后在真空中和30℃下濃縮。將殘留物用水(500ml)稀釋，冷卻至5℃，用濃鹽酸酸化至pH4～5，然后用EtOAc(500ml)萃取。將有機層用250ml 1N HCl水溶液萃取2次，用200ml鹽水萃取2次，用無水MgSO4干燥，然后在真空中濃縮，獲得了化合物57c(27.8g，88％)；FAB-MS m/z368(MH+)。
步驟d
將化合物57c(27.0g，0.074mol)和甲基碘(75ml)在丙酮(750ml)中的溶液加熱回流，同時在氬氣氛中攪拌1小時。冷卻至室溫后，將反應混合物在真空中濃縮，獲得一種琥珀色玻璃狀的化合物57d的粗產品，將該粗產品直接用于下一個步驟；FAB-MS m/z 381(MH+)。
步驟e
將化合物57d(38.0g，0.075mol)加入一份乙酸銨(8.70g，0.112mol)在甲醇(200mol)中的溶液中，然后將其加熱回流，同時在氬氣氛中攪拌3.5小時。在冷卻至室溫之后，將反應混合物在真空中濃縮，將殘留物在CHCl3(500ml)與飽和NaHCO3水溶液之間分配。將CHCl3層過濾，用鹽水洗滌，用無水Na2SO4干燥，然后在真空中濃縮，獲得一種淡黃色玻璃狀的化合物57e；FAB-MS m/z 351(MH+)。
步驟f
將化合物57e(24.3g，0.069mol)和甲苯磺酰氯(14.6g，0.076mol)在丙酮(500ml)中的溶液冷卻至-15℃。向其中滴加1，8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU；21.4g，0.139mol)，同時在-15℃下攪拌45分鐘，讓該混合物在3小時內慢慢升溫至室溫。將反應混合物用100ml甲醇稀釋，然后在真空中濃縮。將殘留物用硅膠色譜純化，用EtOAc/己烷(3∶1)洗脫，獲得一種白色固體狀的化合物57f(14.4g，41％)；FAB-MS m/z 505(MH+)。
化合物57按照實施例3的一般方法將酰胺57f轉變成化合物57。按照制備化合物3c時所述的方法使化合物57f與2-鋰苯并噻唑反應。將所獲的酮中間體按照制備化合物3d和3e時所用的步驟來處理，然后按照步驟3f的方法將所獲的氨基醇與(CBZ)-N-甲基-D-苯基丙氨酰基-L-脯氨酸偶合。將該中間體類似地通過實施例3的其余步驟來處理；注意，分解HF的步驟(步驟h)需要在室溫下進行6小時而不是原來的在0℃下3小時。將所獲的化合物57用反相HPLC純化，用H2O/乙腈/TFA(65∶35∶0.2)洗脫，獲得一種白色固體狀的化合物57；FAB-MS m/z 583(MH+)；分析計算C32H34N6O3S·2.25TFA·1.0H2O計算值C，51.14；H，4.50；N，9.80；F，14.96；S，3.74；H2O，2.10實測值C，50.96；H，4.39；N，9.60；F，14.66；S，3.77；H2O，1.72實施例58步驟a
按照文獻M.Fujino等，日本化學藥物通報(Chem.Pharm.Bull.Jpn.)1982，30，2766中所述的用于制備N-ε-Mtr-L-賴氨酸的方法，將N-ε-甲基-L-賴氨酸與4-甲氧基-2，3，6-三甲苯磺酰(Mtr)氯反應。將所獲的N-ε-甲基-N-ε-Mtr-L-賴氨酸(5.00g，0.0134mol)溶解于二噁烷(52ml)中，用水(952ml)稀釋，冷卻至0℃，然后用3N NaOH水溶液將其pH值調節(jié)至11。加入雙碳酸二叔丁酯(8.79g，0.040mol)，將反應混合物在0℃下攪拌并在18小時內將pH值維持在pH10～11的范圍內。在真空中除去溶劑，將殘留物在水(100ml)與乙醚之間分配。將堿性水層(pH11)再用乙醚萃取(2次)，冷卻至0℃，用3N HCl水溶液將pH值調節(jié)至3，然后用EtOAc萃取(3次)。將合并的EtOAc萃取液用鹽水洗滌，用無水Na2SO4干燥，然后在真空中濃縮，獲得一種白色泡沫狀的化合物58a(3.34g，53％)；FAB-MS m/z 473(MH+)。
步驟b
按照制備化合物57b的一般方法將化合物58b與N，O-二甲基羥胺鹽酸化物反應，獲得一種白色固體狀的化合物58b；m/z 516(MH+)。
步驟c
按照實施例3的一般方法將酰胺58b轉變成58d。按照對化合物3c所述的方法使化合物58b與2-鋰苯并噻唑反應。將所獲的酮中間體按照制備化合物3d和3e所用的方法處理，然后按照步驟3f的方法將所獲的氨基醇與(CBZ)-N-甲基-D-苯基丙氨酰基-L-脯氨酸偶合。按照對化合物3g所述的方法用Dess-Martin全碘代烷(periodinane)將中間體氧化，獲得化合物58d；m/z 883(MH+)。
步驟d
化合物58將化合物58d(0.025g，0028mmol)、五甲苯(0.32g)和二甲硫(0.63ml)溶解在3ml無水三氟乙酸中，將其冷卻至5℃同時在氬氣氛中攪拌。用無水HBr向該溶液鼓泡15分鐘，使反應混合物在15小時內慢慢地升溫至室溫。在真空中除去溶劑，將殘留物用無水乙醚研碎并用反相HPLC純化，用H2O/乙腈/TFA(60∶40∶0.2)洗脫，獲得白色固體狀的化合物58；FAB-MS m/z 536(MH+)。
權利要求
1.一種由通式I表示的化合物或其可藥用的鹽，
式中A選自下列基團C1-8烷基、羧基C1-4烷基、C1-4烷氧基羰基C1-4烷基、苯基C1-4烷基、被取代的苯基C1-4烷基(其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、甲酰基、C1-4烷氧基羰基、C1-12烷基羰基、苯基C1-4烷氧基羰基、C3-7環(huán)烷基羰基、苯基羰基、被取代的苯基羰基(其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、C1-4烷基磺?；?、C1-4烷氧基磺?；?、全氟C1-4烷基磺?；?、苯基磺?；?、被取代的苯基磺?；?其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、10-樟腦磺?；⒈交鵆1-4烷基磺?；⒈蝗〈谋交鵆1-4烷基磺?；?、C1-4烷基亞磺?；?、全氟C1-4烷基亞磺?；?、苯基亞磺?；?、被取代的苯基亞磺酰基(其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、苯基C1-4烷基亞磺?；⒈蝗〈谋交鵆1-4烷基亞磺?；?、1-萘基磺?；?-萘基磺?；虮蝗〈妮粱酋；?其中的萘基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、1-萘基亞磺?；?、2-萘基亞磺?；虮蝗〈妮粱鶃喕酋；?其中的萘基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)；D或L氨基酸，它以它的羧基末端偶合到通式I所示的氮原子上，所說氨基酸選自丙氨酸、天冬氨酸、鈴蘭氨酸、甘氨酸、N-C1-8烷基甘氨酸、脯氨酸、1-氨基-1-環(huán)C3-8烷基羧酸、噻唑烷-4-羧酸、5，5-二甲基噻唑烷-4-羧酸、噁唑烷-4-羧酸、2-哌啶酸、纈氨酸、蛋氨酸、胱氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、正亮氨酸、亮氨酸、叔亮氨酸、異亮氨酸、苯基丙氨酸、1-萘基丙氨酸、2-萘基丙氨酸、2-噻吩基丙氨酸、3-噻吩基丙氨酸、[1，2，3，4]-四氫異喹啉-1-羧酸和[1，2，3，4]-四氫異喹啉-2-羧酸，其中所說氨基酸的氨基末端連接到一個選自下列基團的成員上C1-4烷基、四唑-5-基C1-2烷基、羧基C1-4烷基、C1-4烷氧基羰基C1-4烷基、苯基C1-4烷基、被取代的苯基C1-4烷基(其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、1，1-二苯基C1-4烷基、3-苯基-2-羥基丙?；?，2-二苯基-1-羥乙基羰基、[1，2，3，4]-四氫異喹啉-1-羰基、[1，2，3，4]-四氫異喹啉-3-羰基、1-甲氨基-1-環(huán)己烷羰基、1-羥基-1-環(huán)己烷羰基、1-羥基-1-苯乙酰基、1-環(huán)己基-1-羥基乙?；?-苯基-2-羥基丙?；?、3，3-二苯基-2-羥基丙?；?、3-環(huán)己基-2-羥基丙?；?、甲?；?、C1-4烷氧基羰基、C1-12烷基羰基、全氟C1-4烷基C0-4烷基羰基、苯基C1-4烷基羰基、被取代的苯基C1-4烷基羰基(其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、1，1-二苯基C1-4烷基羰基、被取代的1，1-二苯基C1-4烷基羰基(其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、全氟C1-4烷基磺?；?、C1-4烷基磺?；1-4烷氧基磺?；?、苯基磺酰基、被取代的苯基磺?；?其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、10-樟腦磺?；?、苯基C1-4烷基磺?；?、被取代的苯基C1-4烷基磺?；?、全氟C1-4烷基亞磺?；?、C1-4烷基亞磺?；?、苯基亞磺?；?、被取代的苯基亞磺?；?其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、苯基C1-4烷基亞磺?；?、被取代的苯基C1-4烷基亞磺?；?其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、1-萘基磺酰基、2-萘基磺?；⒈蝗〈妮粱酋；?其中的萘基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、1-萘基亞磺?；?-萘基亞磺酰基和被取代的萘基亞磺?；?其中的萘基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)；或者一種含有兩個氨基酸的多肽，其中的第一氨基酸是一種D或L氨基酸，該氨基酸通過其羧基末端連接到通式I示出的氮原子上，該氨基酸選自下列化合物甘氨酸、N-C1-8烷基甘氨酸、丙氨酸、鈴蘭氨酸、脯氨酸、噻唑烷-4-羧酸、5，5-二甲基噻唑烷-4-羧酸、噁唑烷-4-羧酸、1-氨基-1-環(huán)C3-8烷基羧酸、3-羥基脯氨酸、4-羥基脯氨酸、3-(C1-4烷氧基)脯氨酸、4-(C1-4烷氧基)脯氨酸、3，4-脫氫脯氨酸、2，2-二甲基-4-噻唑烷羧酸、2，2-二甲基-4-噁唑烷羧酸、2-哌啶酸、纈氨酸、蛋氨酸、胱氨酸、天冬氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、亮氨酸、叔亮氨酸、異亮氨酸、苯基丙氨酸、1-萘基丙氨酸、2-萘基丙氨酸、2-噻吩基丙氨酸、3-噻吩基丙氨酸、[1，2，3，4]-四氫異喹啉-1-羧酸、[1，2，3，4]-四氫異喹啉-2-羧酸、天冬氨酸-4-C1-4烷基酯和谷氨酸-5-C1-4烷基酯，和第二D或L氨基酸連接到所說第一氨基酸的氨基末端上，該第二氨基酸選自下列化合物苯基丙氨酸、4-苯甲酰基苯基丙氨酸、4-羧基苯基丙氨酸、4-(羧基C0-2烷基)苯基丙氨酸、被取代的苯基丙氨酸(其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、3-苯并噻吩基丙氨酸、4-聯(lián)苯基丙氨酸、高苯基丙氨酸(homophenylalanine)、八氫吲哚-2-羧酸、2-吡啶基丙氨酸、3-吡啶基丙氨酸、4-噻唑基丙氨酸、2-噻吩基丙氨酸、3-(3-苯并噻吩基)丙氨酸、3-噻吩基丙氨酸、色氨酸、酪氨酸、天冬酰胺、3-三-C1-4烷基甲硅烷基丙氨酸、環(huán)己基甘氨酸、二苯基甘氨酸、苯基甘氨酸、蛋氨酸亞砜、蛋氨酸砜、2，2-二環(huán)己基丙氨酸、2-(1-萘基丙氨酸)、2-(2-萘基丙氨酸)、苯基取代的苯基丙氨酸(其中的取代基選自下列的基團C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、天冬氨酸、天冬氨酸-4-C1-4烷基酯、谷氨酸、谷氨酸-5-C1-4烷基酯、環(huán)C3-8烷基丙氨酸、被取代的環(huán)C3-8烷基丙氨酸(其中的環(huán)上取代基是羧基、C1-4烷基羧基、C1-4烷氧基羰基或氨基羰基)、2，2-二苯基丙氨酸以及所有這些氨基酸的各種α-C1-5烷基的衍生物，其中所說第二氨基酸的氨基末端是未取代的或者被下列基團之一進行單取代，所說基團是甲酰基、C1-12烷基、四唑-5-基C1-2烷基、羧基C1-8烷基、烷氧基羰基(carboalkoxy)C1-4烷基、苯基C1-4烷基、被取代的苯基C1-4烷基(其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、1，1-二苯基C1-4烷基、C1-6烷氧基羰基、苯基C1-6烷氧基羰基、C1-12烷基羰基、全氟C1-4烷基C0-4烷基羰基、苯基C1-4烷基羰基、被取代的苯基C1-4烷基羰基(其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、1，1-二苯基C1-4烷基羰基、C1-4烷基磺?；?、C1-4烷氧基磺?；?、全氟C1-4烷基磺酰基、苯基磺?；⒈蝗〈谋交酋；?其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、10-樟腦磺?；?、苯基C1-4烷基磺?；⒈蝗〈谋交鵆1-4烷基磺?；?、C1-4烷基亞磺酰基、全氟C1-4烷基亞磺?；?、苯基亞磺酰基、被取代的苯基亞磺酰基(其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、苯基C1-4烷基亞磺?；⒈蝗〈谋交鵆1-4烷基亞磺?；?、1-萘基磺?；?-萘基磺?；?、被取代的萘基磺?；?其中的萘基取代基選自C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、1-萘基亞磺酰基、2-萘基亞磺?；捅蝗〈妮粱鶃喕酋；?其中的萘基取代基選自C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)；R1選自氫原子和C1-5烷基；R2選自下列基團氨基C2-5烷基、胍基C2-5烷基、C1-4烷基胍基C2-5烷基、二C1-4烷基胍基C2-5烷基、脒基C2-5烷基、C1-4烷基脒基C2-5烷基、二C1-4烷基脒基C2-5烷基、C1-3烷氧基C2-5烷基、苯基、被取代的苯基(其中的取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個氨基、脒基、胍基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、鹵素原子、全氟C1-4烷基、C1-4烷基、C1-3烷氧基或硝基)、芐基、苯基、被取代的芐基(其中的取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個氨基、脒基、胍基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、鹵素原子、全氟C1-4烷基、C1-4烷基、C1-3烷氧基或硝基)、羥基C2-5烷基、C1-5烷基氨基C2-5烷基、C1-5二烷基氨基C2-5烷基、4-氨基環(huán)己基C0-2烷基和C1-5烷基；P是0或1；B是
其中，n是0～3，R3是H或C1-5烷基以及B的羰基部分連接到E上；E是一個選自下列的雜環(huán)噁唑啉-2-基、噁唑-2-基、噻唑-2-基、噻唑-5-基、噻唑-4-基、噻唑啉-2-基、咪唑-2-基、4-氧代-2-喹喔啉-2-基、2-吡啶基、3-吡啶基、苯并[b]噻吩-2-基、苯并噁唑-2-基、苯并咪唑-2-基、苯并噻唑-2-基、三唑-4-基、三唑-6-基、四唑-2-基、嘧啶-2-基、喹啉-2-基、吲哚-2-基、吡唑-2-基、4，5，6，7-四氫苯并噻唑-2-基、萘并[2，1-d]噻唑-2-基、萘并[1，2-d]噻唑-2-基、喹喔啉-2-基、異喹啉-1-基、異喹啉-3-基、苯并[b]呋喃-2-基、吡嗪-2-基、喹唑啉-2-基、異噻唑-5-基、異噻唑-3-基、嘌呤-8-基以及一種被取代的雜環(huán)，其中的取代基選自C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基、C1-4烷氧基羰基、羥基或苯基C1-4烷基氨基羰基。
2.如權利要求1所述的化合物，其中A是一種含有兩個氨基酸的多肽，其中的第一氨基酸是一種D或L氨基酸，該氨基酸通過其羧基末端連接到通式I示出的氮原子上，該氨基酸選自下列化合物甘氨酸、N-C1-8烷基甘氨酸、丙氨酸、鈴蘭氨酸、脯氨酸、噻唑烷-4-羧酸、5，5-二甲基噻唑烷-4-羧酸、噁唑烷-4-羧酸、1-氨基-1-環(huán)C3-8烷基羧酸、3-羥基脯氨酸、4-羥基脯氨酸、3-(C1-4烷氧基)脯氨酸、4-(C1-4烷氧基)脯氨酸、3，4-脫氫脯氨酸、2，2-二甲基-4-噻唑烷羧酸、2，2-二甲基-4-噁唑烷羧酸、2-哌啶酸、纈氨酸、蛋氨酸、胱氨酸、天冬酰胺、絲氨酸、蘇氨酸、亮氨酸、正亮氨酸、叔亮氨酸、異亮氨酸、苯基丙氨酸、1-萘基丙氨酸、2-萘基丙氨酸、2-噻吩基丙氨酸、3-噻吩基丙氨酸、[1，2，3，4]-四氫異喹啉-1-羧酸、[1，2，3，4]-四氫異喹啉-2-羧酸、天冬氨酸-4-C1-4烷基酯和谷氨酸-5-C1-4烷基酯，和第二D或L氨基酸連接到所說第一氨基酸的氨基末端上，該第二氨基酸選自下列化合物苯基丙氨酸、4-苯甲酰基苯基丙氨酸、4-羧基苯基丙氨酸、4-(羧基C0-2烷基)苯基丙氨酸、被取代的苯基丙氨酸(其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、3-苯并噻吩基丙氨酸、4-聯(lián)苯基丙氨酸、高苯基丙氨酸(homophenylalanine)、八氫吲哚-2-羧酸、2-吡啶基丙氨酸、3-吡啶基丙氨酸、4-噻唑基丙氨酸、2-噻吩基丙氨酸、3-(3-苯并噻吩基)丙氨酸、3-噻吩基丙氨酸、色氨酸、酪氨酸、天冬酰胺、3-三-C1-4烷基甲硅烷基丙氨酸、環(huán)己基甘氨酸、二苯基甘氨酸、苯基甘氨酸、蛋氨酸亞砜、蛋氨酸砜、環(huán)C3-8烷基丙氨酸、被取代的環(huán)C3-8烷基丙氨酸(其中的環(huán)上取代基是羧基、C1-4烷基羧基、C1-4烷氧基羰基或氨基羰基)、2，2-二苯基丙氨酸、2，2-二環(huán)己基丙氨酸、2-(1-萘基丙氨酸)、2-(2-萘基丙氨酸)、苯基取代的苯基丙氨酸(其中的取代基選自下列的基團C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、天冬氨酸、天冬氨酸-4-C1-4烷基酯、谷氨酸、谷氨酸-5-C1-4烷基酯以及這些化合物所有各種α-C1-5烷基的衍生物，其中所說第二氨基酸的氨基末端是未取代的或者被下列基團之一進行單取代，所說基團是甲酰基、C1-12烷基、四唑-5-基C1-2烷基、羧基C1-8烷基、烷氧基羰基(carboalkoxy)C1-4烷基、苯基C1-4烷基、被取代的苯基C1-4烷基(其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、1，1-二苯基C1-4烷基、C1-6烷氧基羰基、苯基C1-6烷氧基羰基、C1-12烷基羰基、全氟C1-4烷基C0-4烷基羰基、苯基C1-4烷基羰基、被取代的苯基C1-4烷基羰基(其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、1，1-二苯基C1-4烷基羰基、C1-4烷基磺?；1-4烷氧基磺?；⑷鶦1-4烷基磺?；⒈交酋；?、被取代的苯基磺?；?其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、10-樟腦磺酰基、苯基C1-4烷基磺?；?、被取代的苯基C1-4烷基磺?；1-4烷基亞磺?；?、全氟C1-4烷基亞磺?；?、苯基亞磺?；?、被取代的苯基亞磺酰基(其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、苯基C1-4烷基亞磺?；?、被取代的苯基C1-4烷基亞磺?；?、1-萘基磺?；?、2-萘基磺?；?、被取代的萘基磺酰基(其中的萘基取代基選自C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、1-萘基亞磺酰基、2-萘基亞磺酰基和被取代的萘基亞磺?；?其中的萘基取代基選自C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)；以及p是0。
3.如權利要求2所述的化合物，其中第一氨基酸是一種L氨基酸，該氨基酸選自下列化合物甘氨酸、N-C1-8烷基甘氨酸、鈴蘭氨酸、脯氨酸、噻唑烷-4-羧酸、5，5-二甲基噻唑烷-4-羧酸、噁唑烷-4-羧酸、1-氨基-1-環(huán)C3-8烷基羧酸、3-羥基脯氨酸、4-羥基脯氨酸、3-(C1-4烷氧基)脯氨酸、4-(C1-4烷氧基)脯氨酸、3，4-去氫脯氨酸、2，2-二甲基-4-噻唑烷羧酸、2，2-二甲基-4-噁唑烷羧酸、2-哌啶酸、纈氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、正亮氨酸、叔亮氨酸、異亮氨酸、苯基丙氨酸、1-萘基丙氨酸、2-萘基丙氨酸、2-噻吩基丙氨酸、3-噻吩基丙氨酸，和第二氨基酸是一種D氨基酸，該氨基酸連接到所說第一氨基酸的氨基末端上，該第二氨基酸選自下列化合物苯基丙氨酸、4-羧基苯基丙氨酸、4-(羧基C0-2烷基)苯基丙氨酸、被取代的苯基丙氨酸(其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、3-苯并噻吩基丙氨酸、4-聯(lián)苯基丙氨酸、高苯基丙氨酸(homophenylalanine)、八氫吲哚-2-羧酸、4-噻唑基丙氨酸、2-噻吩基丙氨酸、3-(3-苯并噻吩基)丙氨酸、3-噻吩基丙氨酸、色氨酸、酪氨酸、天冬酰胺、環(huán)己基甘氨酸、二苯基甘氨酸、苯基甘氨酸、蛋氨酸亞砜、蛋氨酸砜、環(huán)C3-8烷基丙氨酸、被取代的環(huán)C3-8烷基丙氨酸(其中的環(huán)上取代基是羧基、C1-4烷基羧基、C1-4烷氧基羰基或氨基羰基)、2，2-二苯基丙氨酸、2，2-二環(huán)己基丙氨酸、2-(1-萘基丙氨酸)、2-(2-萘基丙氨酸)、苯基取代的苯基丙氨酸(其中的取代基選自下列的基團C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、天冬氨酸、天冬氨酸-4-C1-4烷基酯、谷氨酸、谷氨酸-5-C1-4烷基酯以及這些化合物所有各種α-C1-5烷基的衍生物，其中所說第二氨基酸的氨基末端是未取代的或者被下列基團之一進行單取代，所說基團是甲酰基、C1-12烷基、四唑-5-基C1-2烷基、羧基C1-8烷基、烷氧基羰基(carboalkoxy)C1-4烷基、苯基C1-4烷基、被取代的苯基C1-4烷基(其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、C1-6烷氧基羰基、苯基C1-6烷氧基羰基、C1-12烷基羰基、全氟C1-4烷基C0-4烷基羰基、苯基C1-4烷基羰基、被取代的苯基C1-4烷基羰基(其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、C1-4烷基磺?；?、C1-4烷氧基磺酰基、全氟C1-4烷基磺?；?、苯基磺?；⒈蝗〈谋交酋；?其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、10-樟腦磺?；?、苯基C1-4烷基磺酰基、被取代的苯基C1-4烷基磺?；?、C1-4烷基亞磺?；⑷鶦1-4烷基亞磺?；?、苯基亞磺?；?、被取代的苯基亞磺?；?其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、苯基C1-4烷基亞磺?；?、被取代的苯基C1-4烷基亞磺?；?-萘基磺?；?、2-萘基磺酰基、被取代的萘基磺酰基(其中的萘基取代基選自C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、1-萘基亞磺?；?、2-萘基亞磺酰基和被取代的萘基亞磺?；?其中的萘基取代基選自C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)。
4.如權利要求2所述的化合物，其中第一氨基酸是一種L氨基酸，該氨基酸選自下列化合物N-C1-8烷基甘氨酸、鈴蘭氨酸、脯氨酸、1-氨基-1-環(huán)C3-8烷基羧酸、3-(C1-4烷氧基)脯氨酸、4-(C1-4烷氧基)脯氨酸、2-哌啶酸、纈氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、正亮氨酸、叔亮氨酸、異亮氨酸、苯基丙氨酸、1-萘基丙氨酸、2-萘基丙氨酸、2-噻吩基丙氨酸、3-噻吩基丙氨酸，和第二氨基酸是一種D氨基酸，該氨基酸連接到所說第一氨基酸的氨基末端上，該第二氨基酸選自下列化合物苯基丙氨酸、4-羧基苯基丙氨酸、4-(羧基C0-2烷基)苯基丙氨酸、被取代的苯基丙氨酸(其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、八氫吲哚-2-羧酸、2-噻吩基丙氨酸、3-(3-苯并噻吩基)丙氨酸、3-噻吩基丙氨酸、色氨酸、環(huán)己基甘氨酸、二苯基甘氨酸、苯基甘氨酸、蛋氨酸亞砜、蛋氨酸砜、環(huán)C3-8烷基丙氨酸、被取代的環(huán)C3-8烷基丙氨酸(其中的環(huán)上取代基是羧基、C1-4烷基羧基、C1-4烷氧基羰基或氨基羰基)、2，2-二苯基丙氨酸、2，2-二環(huán)己基丙氨酸、2-(1-萘基丙氨酸)、2-(2-萘基丙氨酸)、苯基取代的苯基丙氨酸(其中的取代基選自下列的基團C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、天冬氨酸、谷氨酸以及這些化合物所有各種α-C1-5烷基的衍生物，其中所說第二氨基酸的氨基末端是未取代的或者被下列基團之一進行單取代，所說基團是C1-12烷基、四唑-5-基C1-2烷基、羧基C1-8烷基、烷氧基羰基(carboalkoxy)C1-4烷基、C1-6烷氧基羰基、苯基C1-6烷氧基羰基、C1-12烷基羰基、全氟C1-4烷基C0-4烷基羰基、苯基C1-4烷基羰基、被取代的苯基C1-4烷基羰基(其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、C1-4烷基磺?；?、C1-4烷氧基磺?；⑷鶦1-4烷基磺?；?、苯基磺?；?、被取代的苯基磺?；?其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、10-樟腦磺?；?、苯基C1-4烷基磺?；⒈蝗〈谋交鵆1-4烷基磺?；?、C1-4烷基亞磺酰基、全氟C1-4烷基亞磺酰基、苯基亞磺酰基、被取代的苯基亞磺酰基(其中的苯基取代基各自獨立地選自下列基團中的一個或多個C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、苯基C1-4烷基亞磺?；?、被取代的苯基C1-4烷基亞磺?；?、1-萘基磺?；?-萘基磺?；?、被取代的萘基磺酰基(其中的萘基取代基選自C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)、1-萘基亞磺?；?-萘基亞磺?；捅蝗〈妮粱鶃喕酋；?其中的萘基取代基選自C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基或C1-4烷氧基羰基)。
5.如權利要求4所述的化合物，其中R2選自下列基團氨基C2-5烷基、胍基C2-5烷基、脒基C2-5烷基、C1-5烷基氨基C2-5烷基、C1-5二烷基氨基C2-5烷基、4-氨基環(huán)己基C0-2烷基、3-氨基環(huán)己基C0-2烷基和C1-5烷基。
6.如權利要求5所述的化合物，其中E是一個選自下列基團的雜環(huán)噁唑啉-2-基、噁唑-2-基、噻唑-2-基、噻唑-5-基、噻唑-4-基、噻唑啉-2-基、咪唑-2-基、4-氧代-2-喹喔啉-2-基、2-吡啶基、苯并[b]噻吩-2-基、苯并噁唑-2-基、苯并咪唑-2-基、苯并噻唑-2-基、三唑-4-基、三唑-6-基、四唑-2-基、嘧啶-2-基、喹啉-2-基、吲哚-2-基、吡唑-2-基、[4，5，6，7]-四氫苯并噻唑-2-基、萘并[2，1-d]噻唑-2-基、萘并[1，2-d]噻唑-2-基、喹喔啉-2-基、異喹啉-1-基、異喹啉-3-基、苯并[b]呋喃-2-基、吡嗪-2-基、喹唑啉-2-基、異噻唑-5-基、異噻唑-3-基、嘌呤-8-基以及一種被取代的雜環(huán)，其中的取代基選自C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基、C1-4烷氧基羰基、羥基或苯基C1-4烷基氨基羰基。
7.如權利要求6所述的化合物，其中E是一個選自下列基團的雜環(huán)噻唑-2-基、噻唑-5-基、噻唑-4-基、噻唑啉-2-基、苯并噁唑-2-基、苯并咪唑-2-基、咪唑-2-基、4-氧代-2-喹喔啉-2-基、苯并噻唑-2-基、三唑-4-基、三唑-6-基、四唑-2-基、嘧啶-2-基、喹啉-2-基、吡唑-2-基、[4，5，6，7]-四氫苯并噻唑-2-基、萘并[2，1-d]噻唑-2-基、萘并[1，2-d]噻唑-2-基、喹喔啉-2-基、異噻唑-5-基、異噻唑-3-基、嘌呤-8-基以及一種被取代的雜環(huán)，其中的取代基選自C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基、C1-4烷氧基羰基或羥基。
8.如權利要求7所述的化合物，其中E是一個選自下列基團的雜環(huán)噻唑-2-基、噻唑-5-基、噻唑-4-基、噻唑啉-2-基、苯并噻唑-2-基、4，5，6，7-四氫苯并噻唑-2-基、萘并[2，1-d]噻唑-2-基、萘并[1，2-d]噻唑-2-基、異噻唑-5-基、異噻唑-3-基以及一種被取代的雜環(huán)，其中的取代基選自C1-4烷基、全氟C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、鹵素原子、酰氨基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4二烷基氨基、羧基、C1-4烷氧基羰基或羥基。
9.權利要求1所述的化合物，N-甲基-D-苯基丙氨酰基-N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[(苯并噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺。
10.權利要求1所述的化合物，N-甲基-D-苯基丙氨酰基-N-[5-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[(苯并噻唑-2-基)羰基]戊基]-L-脯氨酰胺。
11.權利要求1所述的化合物，N-甲基-D-苯基丙氨?；?N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-2S-[(6-甲氧基羰基苯并噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺。
12.權利要求1所述的化合物，N-甲基-D-苯基丙氨?；?N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[(6-羧基苯并噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺。
13.權利要求1所述的化合物，N-甲基-D-苯基丙氨酰基-N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[(6-羧酰氨基苯并噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺。
14.權利要求1所述的化合物，N-甲基-D-苯基丙氨?；?N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[(6-羥甲基苯并噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺。
15.權利要求1所述的化合物，N-甲基-D-苯基丙氨?；?N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[(6-氟苯并噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺。
16.權利要求1所述的化合物，N-甲基-D-苯基丙氨?；?N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[(4-乙氧基羰基噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺。
17.權利要求1所述的化合物，N-甲基-D-苯基丙氨?；?N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[(4-羧基噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺。
18.權利要求1所述的化合物，N-甲基-D-苯基丙氨酰基-N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[(6-甲氧基苯并噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺。
19.權利要求1所述的化合物，N-甲基-D-苯基丙氨酰基-N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[(6-羥基苯并噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺。
20.權利要求1所述的化合物，N-甲基-D-環(huán)己基丙氨?；?N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[(苯并噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺。
21.權利要求1所述的化合物，N-甲基-D-苯基丙氨?；?N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[(萘并[2，1-d]噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺。
22.權利要求1所述的化合物，N-甲基-D-(4-氟苯基)丙氨?；?N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[苯并噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺。
23.權利要求1所述的化合物，N-甲基-D-苯基甘氨?；?N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[苯并噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺。
24.權利要求1所述的化合物，N-甲基-D-(二苯基)丙氨?；?N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[苯并噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺。
25.權利要求1所述的化合物，N-甲基-D-環(huán)己基甘氨?；?N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1 S-[(苯并噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺。
26.權利要求1所述的化合物，N-甲基-D-苯基丙氨酰基-N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[(4，5，6，7-四氫苯并噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺。
27.權利要求1所述的化合物，D-苯基丙氨酰基-N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[(苯并噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺。
28.權利要求1所述的化合物，N-甲基-D-苯基丙氨?；?N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[(苯并噻唑-2-基)羰基]丁基]-2S-哌啶羧酰胺。
29.權利要求1所述的化合物，2，2-二苯基甘氨?；?N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[(苯并噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺。
30.權利要求1所述的化合物，α-甲基-D-苯基丙氨?；?N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[(苯并噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺。
31.權利要求1所述的化合物，1-(N-甲氨基)-1-環(huán)己基羰基-N-[4-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1S-[(苯并噻唑-2-基)羰基]丁基]-L-脯氨酰胺。
32.一種藥物組合物，其中含有可藥用的載體以及治療有效量的權利要求1的化合物。
33.一種藥物組合物，其中含有可藥用的載體以及有效量的用于治療哺乳動物與凝血酶有關疾病所必需的權利要求1所述的化合物。
34.一種用于抑制凝血酶的方法，包括將權利要求1所述的化合物與含有凝血酶的介質相接觸。
35.如權利要求34所述的方法，其中通過一種矯形外科或外科裝置使所說化合物與所說介質接觸。
36.權利要求34所述的方法，其中所說的介質是哺乳動物的血液。
37.權利要求36所述的方法，其中所說的哺乳動物是人。
38.一種用于治療哺乳動物與凝血酶有關疾病的方法，包括施予有效量的權利要求1所述的化合物。
39.一種用于抑制胰蛋白酶的方法，包括將權利要求1所述的化合物與含有胰蛋白酶的介質接觸。
40.一種用于治療哺乳動物與胰蛋白酶有關疾病的方法，包括施予有效量的權利要求1所述的化合物。
全文摘要
通式(Ⅰ)的化合物,適用于治療與凝血酶和胰蛋白酶有關的疾病。
文檔編號A61P7/02GK1192747SQ96196103
公開日1998年9月9日 申請日期1996年6月3日 優(yōu)先權日1995年6月7日
發(fā)明者M·J·科斯坦佐, B·E·馬賴安諾夫 申請人:鄰位藥品公司